شناسایی و تشخیص گونه های شایع مالاسزیا در ایران با استفاده از روش PCR-RFLP

مخمرهای فرصت طلب جنس مالاسزیا متعلق به شاخه بازیدیومیکوتاها و خانواده کریپتوکوکاسه می باشند که به طور طبیعی روی پوست انسان و حیوانات خونگرم ساکن هستند. این مخمرها تحت شرایط خاصی قادر به ایجاد بیماری نظیر تینه آورسیکالر، درماتیت سبوره،... و حتی عفونت های سیستمیک است. در سال های اخیر در پی استفاده از آزمایشات بیوشیمیایی، مورفولوژیکی و روش های مولکولی 9 گونه از جنس مالاسزیا شناسایی شده است.
تحقیق اخیر با هدف به کارگیری روش های PCR-RFLP برای شناسایی این گونه ها و بررسی سوش های شایع در ایران پایه ریزی شد. ابتدا نمونه های به دست آمده بر اساس تست های متداول میکروسکوپی و ماکروسکوپی و خصوصیات بیوشیمیایی در حد گونه شناسایی شدند و در آزمایشات مولکولی الگوهای واحدی برای هر یک از 3 گونه شایع مالاسزیا به دست آمد.
قطعات تولیدی PCR در حدود 600bp تا 800bp طول داشتند. محصول PCR مالاسزیا سیمپودیالیس 600bp) تا (700bp کوچکتر از محصول PCR سایر گونه های مالاسزیا بود و از این رو به راحتی و تنها از روی باند مربوط به PCR که با استفاده از پرایمرهای ITS1 و ITS4 به دست آمده، از سایر گونه های مالاسزیا قابل افتراق بود. محصول PCR دو گونه مالاسزیا گلوبوزا و مالاسزیا فورفور کاملا مشابه هم بوده و افتراق این دو گونه بر اساس قطعات تولیدی ITS1/4PCR تقریبا غیر ممکن است. برای شناسایی و افتراق دو گونه مزبور از الگوی RFLP با آنزیم ECOR1 استفاده شد.
بحث: استفاده از روش های مولکولی، شناسایی سریع و دقیق گونه های مختلف مالاسزیا را امکان پذیر می سازد. نتایج به دست آمده از روش RCR-RFLP با نتایج به دست آمده از روش های روتین آزمایشگاهی، کاملا مطابقت داشت.