شاهدی بر وجود کانال پتاسیمی در شبکه اندوپلاسمیک بر اساس ثبت از تک کانال در غشای دو لایه لیپیدی

مطالعات زیادی وجود کانال های پتاسیمی را در غشاء ارگانال های داخل سلولی نشان داده است. این کانالها در فرایندهای مختلف سلولی همانند سیگنالینگ کلسیم داخل سلولی، تخریب پروتئینها، خنثی سازی شارژ الکتریکی و محافظت سلولی نقش دارند. بر خلاف شبکه سارکوپلاسمیک که وجود کانال های پتاسیمی بخوبی در آنها شناسائی شده است، اطلاعات کمی در مورد حضور کانال پتاسیمی در شبکه اندو پلاسمیک وجود دارد. هدف از این مطالعه بررسی وجودکانال پتاسیمی در شبکه اندو پلاسمیک و بررسی خصوصیات بیوفیزک و فارماکولوژیک آن است. پس از جدا کردن و هموژنیزاسیون کبد موش صحرائی و مراحل مختلف سانتریفوژ، وزیکولهای شبکه اندوپلاسمیک دانه دار (rough endoplasmic reticulum - RER) تهیه و به داخل غشاء دو لایه لیپیدی (bilayer lipid membrane-BLM) الحاق شد. غشاء دولایه لیپیدی توسط فسفاتیدیل کولین برروی منفذی به قطر μm350 که بین دو محفظه تفلونی بنامهای محفظه cis که حاوی کلرور پتاسیم 200 میلی مولار و محفظه trans که حاوی کلرید پتاسیم 50 میلی مولار بود تشکیل گردید. سپس با استفاده ازروش ثبت از تک کانال (single channel recording)، حضور کانال پتاسیم درشبکه آندوپلاسمیک مورد بررسی قرارگرفت. کانال کاتیونی با نفوذ پذیری بالا به پتاسیم، با کنداکتانس pS 599 مشاهده گردید که منحنی جریان ولتاژ آن خطی بود واحتمال باز بودن کانال وابستگی به ولتاژ داشته بطوریکه در ولتاژهای مثبت بالاتر از 30 میلی ولت بشدت افزایش می یافت. در تمام ولتاژها یک subconductance state به اندازه 60% وضعیتی که کانال بطور کامل بازبود (fully open state)، مشاهده گردید. کانال کاتیونی با 4-آمینوپیریدین(مهارکننده غیر اختصاصی کانال پتاسیمی) مهار گردید.
با استفاده از ثبت از تک کانال شاهدی دال بر حضور کانال پتاسیمی با کنداکتانس بالا در شبکه آندو پلاسمیک دانه دار هپاتوسیتها به دست آمد.