ارزیابی اثرات تحریکی پروتئین Tax ویروس HTLV-I بر مسیرهای سیگنالینگ وابسته به CREB وNFkB با استفاده از دو پلاسمید جدید ریپورتر مبتنی بربیان آنزیم بتاگالاکتوزیداز

ساخت دو پلاسمید ریپورتر برای بررسی اثرات پروتئین Tax ویروس HTLV-I بر مسیرهای سیگنالینگ داخل سلولی که ازدو پروتئین CREB و NFkB استفاده می کنند پس از انتقال ژن بتاگالاکتوزیداز باکتریایی و سیگنال پلی آدنیلاسیون ژن BGH به پلاسمید pUC18، نواحی پروموتری HTLV-I LTR و Human IL2 Receptor alpha با PCR تکثیر و به پلاسمید اخیر منتقل شدند. برای ارزیابی میزان تحریک این پروموترها، پس از ترانسفکشن سلولهای 293Tبا پلاسمیدهای ساخته شده و پلاسمید بیانی HTLV-I Tax، روش های رنگ آمیزی با X-gal، الایزا و اندازه گیری فعالیت آنزیمی بتاگالاکتوزیداز در مصرف سوبسترای CPRG، آماده و مورد مقایسه قرار گرفت.
نتایج نشان داد که پلاسمیدهای ساخته شده به خوبی به تحریک با Tax پاسخ داده و بتاگالاکتوزیداز تولیدی با هر سه روش قابل ارزیابی است. دو روش الایزا و فعالیت سنجی همبستگی بسیار بالایی (949/0r=) را نشان داد.
هر دو پلاسمید ساخته شده در این تحقیق قادر به افزایش بیان قابل توجه بتاگالاکتوزیداز پس از تحریک با HTLV I Tax هستند. مزایای روش های مختلف ارزیابی بیان مورد مقایسه قرار گرفت.