استفاده از روش های مولکولی RFLP-PCR و توالی یابی مستقیم جهت تعیین ژنوتیپ های هپاتیت B در زندانیان معتاد به مواد مخدر تزریقی استان تهران

عفونت حاصل ازهپاتیت Bیک مشکل جدی بهداشت جهانی است. طبق ارزیابی هایی که تاکنون انجام شده، هر ساله حدود 500000 تا 2/1 میلیون مرگ ناشی از هپاتیت مزمن، سیروز و هپاتوسلولار در سراسر جهان گزارش می شود. از انجائی که داده های اپیدمیولوژیکی حاصل از تعیین ژنوتیپ ها و ساب ژنوتیپ های ویروس هپاتیت B، کمک شایانی در برنامه های واکسیناسیون، درمانهای ضد ویروسی، تشخیص و پیشگیری از بیماری را فراهم می سازد، لذا بر آن شدیم تا ژنوتیپ های این ویروس را در زندانیان معتاد به مواد مخدر تزریقی مورد بررسی قرار دهیم.
در تحقیقی که به صورت مقطعی در سال 2008، برروی 122 نمونه سرمی ازافراد معتاد به مواد مخدر تزریقی حامل HBsAg جهت تعیین نوع ژنوتیپ ویروس HBV درسطح استان تهران انجام گردید، با استفاده از روش های مولکولی مقرون به صرفه PCR و RFLP، ژنوتیپ آنها تعیین شد. سپس آزمایشات تاییدی توالی یابی مستقیم انجام و درخت فیلوژنتیکی با استفاده از نرم افزارهای بیوانفورماتیک (Bioedit،Mega،ClustalW) ترسیم گردید و به وسیله آزمون آماری SPSS16، P<0.05 مورد بررسی قرار گرفت.
115نمونه سرمی پس از انجامNested PCR مثبت گزارش شدند. ژنوتیپ کلیه نمونه ها پس از RFLP با استفاده از آنزیم های برشی (BsrI، StyI، EaeI، DpnI، HpaI)Iو همچنین توالی یابی مستقیم به همراه رسم درخت فیلوژنتیکی با روش Neighbor-Joining، در 100% نمونه ها، ژنوتیپ D (ساب ژنوتیپ D1 وساب تایپayw2 (را نشان دادند.
در این پژوهش از 115 نمونه سرمی مورد مطالعه، مشخص گردید که ژنوتیپ غالب در زندانیان مبتلا، ژنوتیپ D می باشد. به عبارتی گونه های ژنوتیپی HBV ایرانیان در ارتباط نزدیک با یکدیگر و همگون می باشند. حضور این ژنوتیپ با پایین بودن میزان بیماری های شدید کبدی ناشی ازعفونت مزمن هپاتیت B (سیروز، هپاتوسلولار کارسینوما) در ایران مطابقت دارد.