غنی سازی کتابخانه ژنی نانوبادی علیه پروتئین سطحی ویروس پاپیلومای انسانی عامل سرطان دهانه رحم

ویروس پاپیلومای انسانی، عامل اصلی سرطان دهانه رحم است و به راحتی از فردی به فرد دیگر منتقل می شود. برای جلوگیری از انتشار این ویروس، نیاز به تشخیص زود هنگام و حساس سرطان دهانه رحم به خوبی احساس می شود. هدف از این مطالعه، غنی سازی کتابخانه فاژی به منظور جداسازی نانوبادی های اختصاصی علیه پروتئین 1L ویروس پاپیلومای انسانی است. از این نانوبادی ها می توان در کیت های تشخیصی با حساسیت بالا برای سرطان دهانه رحم استفاده کرد.
تکثیر فاژهای حاوی کتابخانه نانوبادی در باکتری Escherichia coli انجام شد و غنی سازی کتابخانه به کمک روش نمایان سازی فاژی صورت گرفت. به منظور اطمینان از غنی سازی، تعداد فاژهای حاصل از هر مرحله شمرده شد و محصولات حاصل از هر مرحله غنی سازی به کمک روش پلی کلونال فاژ الایزا مورد بررسی قرار گرفتند؛ سپس بهترین کلون ها از طریق روش مونوکلونال فاژ الایزا جداسازی شدند و با کمک تعیین توالی ژنی صحت آنها تایید شد.
صحت فرایند غنی سازی از طریق افزایش تعداد کلون ها در خروجی غنی سازی و افزایش اختلاف جذب نوری با کمک روش فاژ الایزا، در طول موج 450 نانومتر به اثبات رسید و در انتها، 4 کلون به عنوان بهترین کلون ها انتخاب شدند.
پس از سه مرحله غنی سازی، کتابخانه فاژمیدی علیه پروتئین 1L چهار سویه ویروس پاپیلومای انسانی غنی سازی شد.