مطالعه کاتپسین های مرتبط با هضم هموگلوبین و ویتلین در نوزاد کنه ری پی سفالوس (بوافیلوس) آنولاتوس به روش زایموگرافی یک بعدی و دوبعدی

بیوشیمی هضم پروتئین ها در کنه ها یک فرآیند پیچیده است و مطالعات پروتئومیکس عملکردی که بیانگر نقش آنزیم های پروتئولیتیک است می تواند در ارتباط با انتخاب این آنزیم ها بعنوان واکسن مفید واقع شود. تبدیل پروتئین های خون از جمله هموگلوبین به ویتلین در کنه های بالغ ماده صورت می گیرد. همچنین هضم ویتلین در تخم و لارو کنه های خون نخورده در جهت تامین اسید آمینه و انرژی، از فرآیندهای مهم و حیاتی در روند تکاملی کنه ها می باشد. مطالعات متعدد، حاکی از وجود شبکه ای از آنزیم های پروتئولیتیک در رابطه با هضم هموگلوبین و ویتلین می باشد. این آنزیم ها در اغلب موارد مربوط به سیستئین پپتیدازها و آسپارتیک پپتیدازها می باشند.

هدف از این مطالعه، بررسی کاتپسین ها در عصاره لارو کنه ری پی سفالوس (بوافیلوس) آنولاتوس، بوده است.

در این تحقیق، با اضافه نمودن هموگلوبین و ژلاتین به ژل آکریل آمید و با روش زایموگرافی یک بعدی و دو بعدی، به بررسی کاتپسین ها در عصاره لارو کنه ری پی سفالوس (بوافیلوس) آنولاتوس، پرداخته شد.

نتایج بدست آمده از زایموگرافی یک بعدی، نشان دهنده حضور یک باند حدود kDa 28 بود. در زایموگرافی دوبعدی نیز نواحی شفاف در زمینه تیره ژل با وزن های مولکولی حدود kDa 21 تا 65 و با pH ایزوالکتریک مختلف مربوط به کاتپسین ها، مشاهده شد. زمانی که DTT به بافر انکوباسیون (بافر استاتmM 10 و 4 =)pH اضافه گردید، فعالیت پروتئازی افزایش یافت که در زایموگرافی یک بعدی به صورت تشکیل باند شفاف واضح تر در مقایسه با نمونه های قرار گرفته در بافر فاقد DTT نمایان گردید.
نتیجه گیری نهایی: با توجه به این که pH بافر انکوباسیون اسیدی بوده و با اضافه نمودن DTT فعالیت این آنزیم ها افزایش یافته است، لذا به نظر می رسد که برخی از این آنزیم های پروتئولیتیک مربوط به سیستئین پروتئازها بوده اند.