به جمع مشترکان مگیران بپیوندید!

تنها با پرداخت 70 هزارتومان حق اشتراک سالانه به متن مقالات دسترسی داشته باشید و 100 مقاله را بدون هزینه دیگری دریافت کنید.

برای پرداخت حق اشتراک اگر عضو هستید وارد شوید در غیر این صورت حساب کاربری جدید ایجاد کنید

عضویت

فهرست مطالب شهرام تیموریان

  • فریبا ظفری*، مرتضی صادقی، مهرداد بختیاری، شهرام تیموریان
    هدف
    نانو داربست های سه بعدی با ایجاد محیط مشابه بافت های بدن چشم انداز جدیدی در کشت سلول و ترمیم بافت ایجاد کرده اند، هدف این مطالعه، بررسی اثر داربست نانو فیبر زیست تخریب پلی کاپرولاکتون(PCL)  در ترمیم زخم های دیابتی بود.
    مواد و روش ها
    داربست نانو PCL - ژلاتین به روش الکتروریسی سنتز شد. در پوست پشت 15 موش آزمایشگاهی زخم پوستی دایره ای به قطر 6 میلی متری ایجاد شد و موش ها به 3 گروه فاقد دیابت (Sham)، گروه دیابتی بدون دریافت داربست نانو(Control) ، گروه دیابتی دریافت کننده داربست نانو(Scaffold)  تقسیم شدند. سطح زخم و میزان ترمیم زخم در 3 گروه مورد مطالعه در روزهای7 و 14 بعد از پیوند سلول با استفاده از  رنگ آمیزی H&E و نرم افزارهای Image J وSPSS بررسی شد.
    یافته ها
    در بررسی سطح زخم در روز 7 کوچک ترین و بیش ترین سطح زخم  به ترتیب در گروه Scaffold  وControl مشاهده شد) 04/0(P<. در روز 14 کوچک ترین و بیش ترین سطح زخم به ترتیب در گروه Sham و Control مشاهده شد)00/0(P<. در بررسی درصد بهبودی زخم در روز 7  و  14 بیش ترین درصد بهبودی به ترتیب در گروه Scaffold و Sham مشاهده شد و در روز 14 تفاوت معنی داری بین این دو گروه وجود نداشت) 04/0(P<.
    نتیجه گیری
    نانوداربست پلی کاپرولاکتون سازگاری مناسبی با زخم های پوستی در موش دارد و  می تواند سرعت و میزان ترمیم زخم در موش های دیابتی را افزیش دهد.
    کلید واژگان: پلی کاپرولاکتون, دیابت شیرین, زخم, موش}
    Fariba Zafari*, Morteza Sadeghi, Mehrdad Bakhtiyari, Shahram Teimourian
    Introduction
    Three-dimensional nano scaffolds by creating a three-dimensional structure similar to the body tissues have created a new perspective on cell culture and tissue repair. The aim of this study was to investigate the effect of polycaprolactone biodegradation scaffold (PCL) in treatment of diabetic wounds.
    Materials and Methods
    Nano PCL-Gelatine scaffold was synthesized by electrospun method. A circular wound (6 mm) was created in skin of 15 BALB/c rats and the rats were divided into 3 groups including: Non-diabetic group (sham), Diabetic group without nano scaffold receiving (control) and diabetic group with nano scaffolds (scaffold). Wound surface area and wound healing were evaluated on the 7th and 14th days using H & E staining with Image J and SPSS softwares.
    Results
    On 7th day, the smallest and highest wound surface was observed in the Scaffold and Control groups respectively (P <0.04). On 14th day, the smallest and highest levels of ulcers were observed in sham and control groups respectively (P <0.00). In the evaluation of wound healing on 7th and 14th days, the highest treatment rates were observed in the Scaffold and sham groups respectively, and on the 14th day there was no significant difference between the two groups (0.40).
    Conclusion
    Polycaprolactone nano-fiber scaffold has a good compatibility with skin ulcers in rats and it can increase the rate and extent of wound healing in diabetic rats.
    Keywords: Polycaprolactone, Diabetes Mellitus, Ulcer, Rats}
  • اعظم موسیوند، شهرام تیموریان، مریم رضایی، امیرحسن شهابی یونسی، ایرج رسولی*
    مقدمه و هدف
    FSH هورمون گلیکوپروتئین هترودایمری است که در رشد و بلوغ اندام های جنسی و صفات ثانویه موثر است. گنادوتروپین های قابل تزریق نقش پیشرو در درمان ناباروری داشته اند. تولید FSH در داخل کشور یکی از اهداف مهم پیرامون این دارو است. هدف از این مطالعه امکان تولید آزمایشگاهی FSH نوترکیب می باشد.
    مواد و روش ها
    وکتور حاوی زیر واحد آلفا و بتای ژن FSH انسانی در باکتری DH5α انتقال و پلاسمید جداسازی و توسط لیپوفکتامین 2000 به سلول تخمدان همستر چینی ترانسفکت شد. سلول ها بوسیله نئومایسین به مدت 10 روز تیمار و سلول‎های ترانسفکت شده انتخاب شدند. بیان پروتئین بوسیله الایزا مورد بررسی قرار گرفت. محصول با روش کروماتوگرافی افینیتی خالص شد. جهت محاسبه راندمان تخلیص، غلظت پروتئین قبل و بعد از کروماتوگرافی به وسیله الایزا مورد سنجش قرار گرفت. جهت تائید خلوص پروتئین از روش SDS-PAGE و وسترن بلاتینگ استفاده شد. سپس به رت ماده تزریق و عملکرد پروتئین بررسی شد.
    نتایج
    بیان پروتئین با استفاده از تست الایزا در 450 نانومتر mIU/ml 538/43 تائید شد. در مرحله تخلیص با روش کروماتوگرافی افینیتی، پیک مربوط به FSH در بازه زمانی حدود 9/7 دقیقه مشاهده و راندمان تخلیص 70% محاسبه شد. وجود باند 45 کیلودالتونی بر روی ژل و غشای PVDF پس از تخلیص، حضورFSH را تائید نمود. افزایش وزن تخمدان بعد از تزریق، عملکردی بودن پروتئین را تائید نمود.
    نتیجه گیری
    در حال حاضر تولید هورمون های نوترکیب از نیازهای کشور محسوب می شود، بنابراین دست یابی به این هدف ارزشمند نیاز به برنامه ریزی بلندمدت دارد و ما در این پژوهش سعی نمودیم این مسیر را به منظور تولید هورمون FSH انسانی به عنوان یک داروی نوترکیب موثر در درمان ناباروری هموار نماییم.
    کلید واژگان: انتقال, بیان, E, coli, FSH, سلول تخمدان همستر چینی}
    Aezam Mousivans, Shahram Timurian, Maryam Rezaei, Amirhassan Shahabi, Iraj Rasooli*
    Background and Objective
    FSH is a heterodimeric glycoprotein that performs an important role in the regulation of reproductive processes. Over the past decades, injectable gonadotrophins have played a leading role in the treatment of infertility. The production of FSH in the country is one of the main goals around this drug. The aim of this study was to produce a semi- industrial recombinant FSH.  
    Materials and Methods
    In this research study, the FSH gene contained within the pVITRO2-neo-mcs vector was transfected into the cell line of CHO after transformation in DH5α and plasmid purification. The amount of FSH in cell supernatant was measured by ELISA. The FSH protein was purified by HPLC. The presence of FSH protein after purification was confirmed by SDS-PAGE and Western blotting methods. Finally, the clinical effects of purified FSH on the ovary in the rat model were investigated.  
    Results
    The expression of the protein was determined by ELISA test at 450 nm that was 43.538 mIU/ml. In the HPLC purification step, the FSH peak was observed at a time interval of about 7.9 minutes, and the purification efficiency was 70%. The existence of a 45 KDa band on the pvdf membrane was confirmed after western blotting of FSH.  Increasing the weight of the ovary after the injection has confirmed the functionality of the protein.  
    Conclusion
    At present, the production of recombinant hormone is one of the basic needs of every country. In order to arrive at this aim, a long-term planning is required. We are trying to pave the way for producing human FSH hormone as an effective recombinant drug in the treatment of infertility.
    Keywords: E. coli, Follicle stimulating hormone (FSH), Expression, Chinese hamster ovary cell line (CHO)}
  • فریبا ظفری، احسان مقانلو، مرتضی صادقی، مصطفی خفایی، مهرداد بختیاری، شهرام تیموریان
    سابقه و هدف
    سلولهای بنیادی هماتوپوئتیک یکی از گزینه های جدید درمان زخم های پوستی هستند. اخیرا با استفاده از داربست های نانو چشم انداز جدیدی در استفاده بهتر از سلول های بنیادی ایجاد شده است، این مطالعه به منظور بررسی تاثیر داربست نانو فیبر پلی کاپرولاکتون- ژلاتین (PCL) در عملکرد درمانی سلول های بنیادی هماتوپوئتیک انجام شد.
    مواد و روش ها
    در این مطالعه تجربی 15 موش نژاد BALB/c به سه گروه پنج تائی شامل گروه کنترل ، گروه تحت تزریق سلولهای بنیادی در محل زخم (گروه سلول) و گروه دریافت کننده سلول + نانو داربست PCL تقسیم شدند. نانو داربست -PCL ژلاتین توسط روش الکتروریسی تهیه شد، بعد از رنگ آمیزی هماتوکسیلین و ائوزین پارامترهای ترمیم اپیدرم و تشکیل فولیکول مو در محل زخم توسط میکروسکوپ فلورسنت و نرم افزارهای Image J وSPSS بررسی شد.
    یافته ها
    در روز 28 بعد از پیوند بیشترین و کمترین ضخامت اپیدرم به ترتیب در گروه سلول+ داربست و گروه کنترل مشاهده شد که به ترتیب برابر با 0/3± 10/5 و 0/9 ±27/3 میکرومتر بود که تفاوت معنی دار بود (0/05p<). همچنین بیشترین و کم ترین تعداد فولیکول مو در گروه سلول+ داربست و گروه کنترل مشاهده شد که به ترتیب برابر با 0/2±5/2 و0/3±4/2 بود که تفاوت بین دو گروه معنی دار بود (0/01p<).
    نتیجه گیری
    نانو داربست –PCL ژلاتین باعث افزایش قابل توجه کارائی درمانی سلول های هماتوپوئتیک در محل زخم ها می شود.
    کلید واژگان: سلول های بنیادی خونساز, نانو فیبر, ترمیم زخم}
    F Zaffari, E Moghanloo, M Sadeghi, M Khafaei, M Bakhtiyari, Sh Teimourian
    BACKGROUND AND OBJECTIVE
    Hematopoietic stem cells are one of the new therapeutic options for treating skin ulcers. Recently, a new perspective has been developed to better utilize stem cells using nanofiber scaffolds. The present study was conducted to investigate the effect of polycaprolactone/gelatin (PCL/GT) nanofiber scaffold on the therapeutic function of hematopoietic stem cells.
    METHODS
    In this experimental study, 15 male BALB / c mice were divided into three groups of five, including the control group, the group receiving stem cells in the wound site (cell group) and the group receiving cell + PCL nanofiber scaffold. PCL/GT nanofiber scaffold was prepared by electrotherapy. After hematoxylin and eosin staining, the parameters of epidermal repair and hair follicle formation in the wound site were evaluated by fluorescence microscope and Image J and SPSS programs.
    FINDINGS: On day 28 after transplantation, the highest and lowest epidermal thicknesses were observed in the cell + scaffold group and control group, which were 10.5±0.3 and 27.3±0.9 μm, respectively, which was significant (p<0.05). Moreover, the highest and lowest number of hair follicles were observed in the cell + scaffold group and control group, respectively; 5.2±0.2 and 4.2±0.3. The difference between the two groups was significant (p<0.01)
    CONCLUSION
    Polycaprolactone / gelatin (PCL/GT) nanofiber scaffold significantly increases the therapeutic function of hematopoietic stem cells in the wound site
    Keywords: Hematopoietic Stem Cells, Nanofiber, Wound Healing}
  • الهام علی پور فایز، مهدی شکرآبی *، سیدعلی جواد موسوی، علی اکبر دلبندی، سیاوش کورانی فر، شهرام تیموریان، محمدرضا بلوری، مجید خوش میرصفا، عاطفه صادقی شرمه
    زمینه و هدف
    سرطان ریه، پنجمین سرطان شایع در ایران است که نسبت ابتلای آن در مردان و زنان به ترتیب 5/10 و 5/1 در هر 100 هزار نفر می باشد. مطالعه عفونت سل نهفته در بیماران مبتلا به سرطان ریه، به دلیل احتمال فعال-شدن آن در طی شیمی درمانی و افزایش میزان مرگ ومیر، از اهمیت قابل توجهی برخوردار است. از این رو این مطالعه با هدف بررسی فراوانی سل نهفته در بیماران مبتلا به سرطان ریه و مقایسه آن با افراد سالم انجام شد.
    روش کار
    در این مطالعه مورد-شاهدی که بصورت مقطعی از سال 1395 تا1396 انجام شد، 29 نفر بیمار مبتلا به سرطان ریه تازه تشخیص داده شده و 40 نفر فرد سالم مورد مطالعه قرار گرفتند. اطلاعات دموگرافیک افراد مورد مطالعه در پرسشنامه ای ثبت شد. در این مطالعه جهت بررسی عفونت سل نهفته از تست IGRAs(کوانتی-فرون) استفاده شد.
    یافته ها
    نتایج این مطالعه نشان داد فراوانی سل نهفته در مبتلایان به سرطان ریه 1/24% و در گروه سالم 5/22% می باشد. همچنین با بررسی تاثیر مصرف سیگار در ابتلای به سرطان ریه و نیز استعداد ابتلا به LTBi، نتایج نشان داد که سیگار با ابتلا به بیماری سرطان ریه و نیز ابتلای به LTBi در افراد سالم ارتباط معناداری دارد (007/0p<).
    نتیجه گیری
    به دلیل بالا بودن فراوانی LTBi در بیماران مبتلا به سرطان ریه نسبت به افراد سالم توصیه می شود که غربالگری برای LTBi در افراد پرخطر قبل از هرگونه درمان انجام شود. همچنین با توجه به نقش سیگار در ابتلا به سرطان ریه و نیز استعداد ابتلا به LTBi در افراد سالم، توجه به ترک سیگار در برنامه مراقبت های بهداشتی، پیشگیری و درمان بیماران ریوی توصیه می گردد.
    کلید واژگان: عفونت سل نهفته, سرطان ریه, IGRA, مصرف سیگار}
    Elham Alipour, Mehdi Shekarabi Dr *, Seyed Ali Javad Moosavi Dr, Ali Akbar Delbandi Dr, Siavash Kouranifar Dr, Shahram Teimourian Dr, Mohammad Reza Bolouri Dr, Majid Khoshmirsafa Dr, Atefeh Sadeghi Shermeh
    Background
    Lung cancer is the fifth most common cancer in Iran, with 10.5 and 1.5 per 100,000 in males and females, respectively. The study of latent tuberculosis infection (LTBi) in patients with lung cancer is significant due to the possibility of its activation during chemotherapy and increased mortality. Therefore, the aim of this study was to compare the prevalence of LTBi in patients with lung cancer with healthy individuals.
    Methods
    In this case-control study, which was performed from 2016 to 2017, 29 patients with newly diagnosed lung cancer and 40 healthy subjects were studied. Demographic data of all subjects were recorded in questionnaire. IGRAs (Quantiferon) were used to determine the LTBi.
    Results
    The results of this study showed that prevalence of LTBi were 24.1% in lung cancer and 22.5% in the healthy group. The results of this study showed that smoking had a significant relationship with the risk of lung cancer and also LTBi infection in healthy people (p
    Conclusion
    Since LTBi activates under chronic conditions such as malignancies, and because of high rates of LTBi in patients with lung cancer, it is recommended that screening for LTBi in high-risk individuals such as Lung cancer patients should be done before any treatment. Considering the role of smoking in lung cancer as well as the ability to develop LTBi in healthy people, attention to cessation of smoking in the health care program, prevention and treatment of pulmonary patients is recommended.
    Keywords: Latent tuberculosis infection, Lung Cancer, IGRA, Smoking}
  • فریبا ظفری، مرتضی صادقی، احسان مقانلو، مهرداد بختیاری، شهرام تیموریان
    مقدمه و هدف
    سلول درمانی یکی از رویکردهای جذاب و نوین در درمان زخم های مزمن است. در این مطالعه، هدف بررسی عملکرد سلول های بنیادی خون ساز مشتق شده از مغزاستخوان (CD93) در درمان زخم های دیابتی است.
    مواد و روش ها
    در این مطالعه از پانزده موش نژاد BALB/c با وزن 250 تا 300 گرم استفاده شد که ده موش قبلا توسط القاء استرپتوزوتوسین دیابتی شده بودند. زخم پوستی دایره ای به قطر شش میلی متر و عمق دو میلی متر در پوست پشت موش ها ایجاد شد. موش های موردمطالعه در سه گروه به صورت موش های نرمال فاقد دیابت (sham)، موش های دیابتی بدون پیوند سلول CD93 (Control) و موش های دیابتی که دو بار تحت پیوند سلول های CD93 (سلول1×107) قرار گرفتند، تقسیم شدند. پارامترهای سطح زخم، میزان ترمیم زخم و میزان تمایز و بقاء سلول های CD93 در محل زخم در روزهای7 و 14 و 28 بعد از پیوند سلول میکروسکوپ فلورسانس و آنتی بادی نشان دار DiLو نرم افزارهای Image J و SPSS محاسبه و بررسی شد.[ملاباشی1]
    نتایج
    در بررسی سطح زخم ودرصد بهبودی بیشترین تفاوت به ترتیب مربوط به گروه سلول و گروه کنترل بود P<0.05)و (P<0.01. بررسی ایمونوهیستوشیمی نشانگر زنده ماندن و فعالیت سلول های بنیادی CD93 در محل زخم تا روز 28 بعد از پیوند بود.
    نتیجه گیری
    پیوند سلول های بنیادی CD93 باعث تسریع قابل توجه پروسه ترمیم زخم دیابتی می شود و این سلول ها به عنوان گزینه مناسبی برای سلول درمانی زخم های دیابتی معرفی می شوند.
    کلید واژگان: سلول های بنیادی خون ساز CD93, مغز استخوان, دیابت, ترمیم زخم}
    Fariba Zafari, Morteza Sadeghi*, Ehsan Moghanloo, Mehrdad Bakhtiyari, Shahram Teimourian
    Background And Objective
    Cell therapy is one of the attractive and novel approaches in the treatment of chronic wounds. The aim of this study was to evaluate the function of bone marrow derived hematopoietic stem cells (CD93) in the treatment of diabetic ulcers.
    Materials And Methods
    In this study, 15 BALB/c strain mice, weighing 25-30 g were used, of which 10 were made diabetic by streptozotocin (STZ). Circular skin lesions 6 mm in diameter and 2 mm depth were created in the skin of mice. Studied mice were divided into 3 groups including normal mice without diabetes (sham), diabetic mice without transplanted CD93 cells (Control) and diabetic mice that underwent CD93 cell transplantation twice (density of cells: 1 × 107). The parameters of wound area, wound healing, differentiation and survival of CD93 cells were calculated on days 7, 14 and 28 after cell transplantation using the fluorescent microscope and DiL labeling antibody with Image J and SPSS softwares.
    Results
    The most difference in the level and rate of healing was related to cell group and the control group, respectively (p
    Conclusion
    CD93 stem cell transplantation significantly accelerated diabetic wound healing process and these cells are introduced as an appropriate option for diabetic wounds cell therapy.
    Keywords: CD93 hematopoietic stem cells, Bone marrow, Diabetes, Wound healing}
  • نوید احمدی نسب، حسن حسنی کومله، شهرام تیموریان، مجتبی بیگ زاده، محمود کاظم زاد
    کورسیتین یک متابولیت گیاهی ایمن است که به عنوان عامل مهار کننده شیمیایی در مهار سلول های توموری و پیشرفت بسیاری از سرطان ها نقش موثر دارد. در این تحقیق به منظور بهبود کارایی و دسترسی زیستی مولکول کورسیتین از نانوحفرات مزوپور سیلیکا با پوشش کیتوسان به عنوان یک بیوپلیمر حساس به pH استفاده شد. برای این منظور ابتدا نانوحفرات مزوپور سیلیکا به روش سل-ژل سنتز شد. سپس، در یک محیط اسیدی با استفاده از گلیسیدیل اکسی پروپیل تری متوکسی سیلان، لایه ای از کیتوسان به دور نانوحفرات سیلیکا پوشش داده شد. برای مشخصه یابی نانوحامل سنتز شده از روش های مختلفی نظیر FESEM، BET وFTIR استفاده شد. نتایج FESEM و BET به ترتیب حاکی از اندازه ذرات و حفرات در محدوده نانومتر بود. هم چنین حضور پیک های موجود در آنالیزFTIR نشان داد که دارو با موفقیت در نانو حامل قرار گرفته است. از طرفی نتایج محاسبه ظرفیت بارگیری دارو در نانوحامل و هم چنین میزان رهایش دارو در دو pH اسیدی و فیزیولوژی بدن نشان داد نانوحامل از کارایی و پایداری مناسب در بارگیری و رهایش دارو برخوردار است. میزان سمیت سلولی فرمولاسیون دارویی در غلظت های مختلف بر روی رده سلولی سرطانی HeLa با کمک روش MTT بررسی شد. نتایج نشان داد میزان سمیت سلولی فرمولاسیون دارویی نسبت به داروی آزاد به شکل معناداری افزایش می یابد و مقدار IC50 در رده سلولی سرطانی HeLa از 58 میکرومولار برای کورسیتین آزاد به 36 میکرومولار برای کورسیتین بارگذاری شده در نانوحامل کاهش یافت. در نهایت، این تحقیق نشان داد نانوحامل مزوپورسیلیکا-کیتوسان قادر است به عنوان سیستم دارورسانی هوشمند و زیست سازگار برای انتقال داروی کورسیتین به سلول های سرطانی در نظر گرفته شود.
    کلید واژگان: سیستم دارورسانی هوشمند, نانوحامل, فلاونوئید, سمیت سلولی, درمان سرطان}
    Navid Ahmadi Nasab, Hassan Hassani Kumleh, Shahram Teimourian, Mojtaba Beygzadeh, Mahmood Kazemzad
    Quercetin is a safe herbal metabolism which has effective role on inhibition of tumor cells and growth of many types of cancers. In this study to improve the efficiency and bioavailability of Quercetin molecule, Chitosan-functionalized nanoporous mesoporous Silica was used as a pH-sensitive biopolymer. For this purpose, at first nanoporous Mesoporous silica was synthesized by sol-gel method; then Chitosan layer was coated on nanoporous of silica using GPTMS in an acidic medium. Different analysis methods such as FESEM, BET and FTIR were used to characterize the synthesized nanocarrier. FESEM and BET analysis results demonstrated nanometric sizes of particles and porosities. FTIR analysis picks showed successful drug loading on nanocarrier. On the other hand, calculation of drug loading content and encapsulation efficiency in acidic and physiologic pH, illustrated that nanocarrier has suitable performance and stability for drug loading and release. Cytotoxicity of as-drug formulation in different concentrations was investigated by MTT assay on HeLa cells. The results showed that cytotoxicity of as-drug formulation increased in comparison to free drug and IC50 value of HeLa cells decreased from 58 M for free Quercetin to 36 M for loaded Quercetin. Eventually this study showed Chitosan-functionalized Mesoporous Silica nanocarrier could be considered as a smart and biocompatible drug delivery system to carry Quercetin drug for cancer cells treatment.
    Keywords: Smart Drug Delivery System, Nanocarriers, Flavonoid, Cytotoxicity, Cancer Treatment}
  • زهره سرابی نژاد، داود نوری اینانلو، شهرام تیموریان*
    زمینه و هدف
    اینفلیکسیماب (Infliximab) شکلی از آنتی بادی های نوترکیب کایمریک می باشد که هدف مناسبی برای مهار فاکتور نکروز توموری آلفا در بیماری های التهابی است. پژوهش کنونی با هدف ارزیابی بیان آنتی بادی منوکلونال اینفلیکسیماب در مقیاس نیمه صنعتی در سلول تخمدان هامستر چینی انجام شد.
    روش بررسی
    این مطالعه با هدف تولید نیمه صنعتی، از بهمن 1393 تا مرداد 1394 در مرکز رشد دانشگاه تهران انجام گردید. وکتور حاوی ژن های اینفلیکسیماب، به باکتری E.coli انتقال و وجود ناقل پلاسمیدی حاوی ژن برروی ژل 2% آگارز بررسی شد پلاسمید جداسازی و توسط لیپوفکتامین 2000 (Invitrogen، Germany) به سلول تخمدان هامستر چینی ترانسفکت شد. سلول ها توسط G-418، دو هفته تیمار و سلول های ترانسفکت شده انتخاب شدند. میزان تولید اینفلیکسیماب در کلون های انتخابی پس از 48 ساعت با کیت الایزا IgG، مورد سنجش قرار گرفت. کلون با بیان بالا کشت و محصول با ستون افینیتی پروتئین A خالص شد. جهت تایید خلوص، از روش Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) و برای تعیین راندمان تخلیص، از تست الایزا استفاده شد.
    یافته ها
    بررسی ژل آگارز، وکتور حاوی ژن را تایید نمود. ارزیابی غلظت اینفلیکسیماب پس از ترانسفکشن با استفاده از تست الایزا IgG در nm 450، بیشترین و کمترین میزان بیان را به ترتیب ng/ml 23 و ng/ml 6 نشان داد. در مرحله تخلیص با ستون افینیتی پروتئین A، پیک مربوط به اینفلیکسیماب، در بازه زمانی 7/0 الی 8/0 دقیقه مشاهده و راندمان تخلیص، 70% محاسبه شد و وجود باند های 25 و 50 کیلو دالتونی بر روی ژل پس از تخلیص حضور اینفلیکسیماب را تایید نمود.
    نتیجه گیری
    در پژوهش کنونی بیان اینفلیکسیماب در مقیاس نیمه صنعتی با استفاده از سیستم بطری غلطان با درصد بیان بالا و راندمان تخلیص حدود 70% انجام شد.
    کلید واژگان: بیان ژن, آنتی بادی منوکلونال, اینفلیکسیماب, تخمدان هامستر چینی}
    Zohreh Sarabinejad, Davoud Nouri Inanlou, Shahram Teimourian*
    Background
    Infeliximab is a form of chimeric antibody which neutralizes the most important inflammatory cytokine, TNF-a, in inflammatory disorders. The aim of current study was to pilot expression of chimeric infliximab in Chinese Hamster ovary (CHO) cells.
    Methods
    In this research study, pVITRO2-neo-mcs vector that consist of infliximab light chain and heavy chain was used to transform into the E.coli by CaCl2 method. The plasmid was then purified and transfected to cultured CHO cells by Lipofectamine 2000® (Invitrogen GmbH, Germany). Transfected cells were selected upon G-418 treatment after 2 weeks and the level of expression, based on standard curve, was measured using IgG ELISA kit after 48 hours for each clone. High level expressed clone was then cultured in roller bottles and recombinant chimeric product was purified by protein A affinity chromatography. The purity of the product was analyzed by 10% gel SDS-PAGE from eluted samples. The efficacy of the purification was analyzed by ELISA before and after purification step. This article is a master's student thesis from February 2015 to August 2016 in pharmaceutical technology development center, Tehran University of Medical Sciences, Tehran, Iran.
    Results
    The purified plasmid was analyzed on 2% agarose gel. After selective pressure of G-418, 10 stable transfect clones were assessed for infliximab secretion by IgG ELISA kit at 450 nm. The maximum and minimum expression which detected by ELISA were 23 ng/ml and 6 ng/ml, respectively. The band width of infliximab fraction during purification procedure was observed at 0.7-0.8 min. The efficiency of the purification by ELISA was 70%. On SDS-PAGE analysis, two bands, 25 and 50 kDa, respect to light and heavy chains of Infliximab, was confirmed the expression of recombinant protein.
    Conclusion
    In the current study, the construct for infliximab monoclonal antibody production was designed using genetic engineering techniques and the expression was confirmed by conventional molecular biology methods. The high yield production was carried out in semi-industrial scale using roller bottles with a 70 percentage of purification efficiency.
    Keywords: Chinese hamster ovary, gene expression, infliximab, monoclonal antibody}
  • حسین نوروزی*، علی کاظمی، مسعود تشفام، شهرام تیموریان، پروانه عدیمی، محسن بشاشتی
    زمینه و هدف
    اشعه اولتراویوله (UV) به عنوان یک ضدعفونی کننده قوی مطرح است. عفونت ناشی از گونه های مختلف مقاوم قارچی در بیماران منجر به برگشت بیماری با شدت بیشتر می شود. این مطالعه به منظور ارزیابی تست حساسیت دارویی سویه های مختلف قارچ کاندیدا قبل و بعد از تابش اشعه اولتراویوله نسبت به داروهای ایتراکونازول، فلوکونازول و آمفوتریسین B انجام شد.
    روش بررسی
    این مطالعه آزمایشگاهی روی 12 سوش قارچ کاندیدا جدا شده از بیمار طبق روش (NCCLS M27-A) انجام شد. نمونه ها با سالین استریل به صورت سوسپانسیون درآمدند و جذب نوری با اسپکتروفوتومتر در طول موج 530 نانومتر خوانده شد. رقت های سریالی 16-0.0313 میکروگرم بر میلی لیتر برای ایتراکونازول و آمفوتریسین B و 128-0.0313 میکروگرم بر میلی لیتر برای فلوکونازول تهیه گردید و حداقل میزان مهارکنندگی (MIC) بعد از 48 ساعت انکوباسیون در دمای 35 درجه سانتی گراد تعیین شد. اشعه UV به مدت 1، 2، 5، 10، 60، 90، 120 ثانیه در فاصله یک متری به قارچ ها تابانده شد و MIC تعیین گردید.
    یافته ها
    بیشترین MIC قبل از تابش UV در استفاده از فلوکونازول با میزان بیش از 128μg/ml مشاهده شد. بعد از تابش UV میزان MIC برای سه داروی مورد مطالعه کاهش یافت؛ به طوری که بعد از 10 ثانیه MIC برای داروهای ایتراکونازول و آمفوتریسین B بیش از 0.0313 μg/ml تعیین شد. MIC فلوکونازول بعد از 60 ثانیه تابش اشعه اولتراویوله بیش از 0.0313 μg/ml بود. با مقایسه MIC قبل و بعد از تابش اشعه اولتراویوله، داروهای مختلف سبب کاهش آماری معنی داری نسبت به قبل از تابش UV گردید (P<0.05).
    نتیجه گیری
    اشعه UV باعث کاهش MIC سویه های قارچی کاندیدا نسبت به داروهای ایتراکونازول، فلوکونازول و آمفوتریسین B می گردد.
    کلید واژگان: قارچ, کاندیدا, اشعه اولتراویوله, ایتراکونازول, فلوکونازول, آمفوتریسین B, مقاومت دارویی}
    Nowrozi H. *, Kazemi A., Teshfam M., Temorian Sh, Adimi P., Bashashati M.
    Background And Objective
    Ultraviolet (UV) radiation is a important disinfectant. Fungal infections with resistant isolates in patients culminate in recurrence of disease even with worse condition. This study was done to evaluate the efficacy of ultraviolet radiation on drug susceptibility of Candida Spp. to itraconazole، fluconazole and amphotericin B.
    Materials And Methods
    This laboratory study was done on 12 Candida spp. isolated from patients according to NCCLS M27- A method. Samples were suspended with sterile saline and optical density was read by spectrophotometer at the wavelength of 530 nm. Serial dilutions (0. 0313-16 µg/ml) and (0. 0313-128 µg/ml) were supplied for itraconazole، amphotericin and fluconazole، respectively. MICs were determined after 48h incubation at 35°C. Following UV radiation for 1، 2، 5، 10، 60، 90 and 120 seconds MICs were determined، subsequently.
    Results
    The highest MIC pre UV radiation was (>128 µg/ml) for fluconazole. After UV radiation، MICs were steadily decreased for all mentioned drugs while after 10 sec، MICs of itraconazole and amphotericin B were >0. 0313 µg/ml. Secondary MICs significantly decreased with respect to MICs obtained in pre UV radiation (P<0. 05).
    Conclusion
    UV radiation reduces MICs of Candida spp. to itraconazole، fluconazole، amphotericin B.
    Keywords: Candida, Ultraviolet radiation, Itraconazole, Fluconazole, Amphotericin B, Drug resistance}
  • علی کاظمی*، حسین نوروزی، مسعود تشفام، شهرام تیموریان
    زمینه و هدف
    آسپرژیلوزیس شایع ترین عامل ایجاد کننده عفونت های بیمارستانی قارچی با منشا خارجی است. این مطالعه به منظور ارزیابی حساسیت دارویی سویه های بالینی آسپرژیلوس فلاووس و فومیگاتوس نسبت به داروهای ایتراکونازول و آمفوتریسین B انجام شد.
    روش بررسی
    این مطالعه آزمایشگاهی روی 25 سویه آسپرژیلوس فلاووس و 25 سویه آسپرژیلوس فومیگاتوس جدا شده از بیماران دریافت کننده عضو پیوندی انجام شد. تست حساسیت دارویی طبق استاندارد NCCLS M 38-P انجام شد. سوسپانسیون قارچی از قارچ های مذکور با محدوده سلولی 0.5-5X104 CFU/ml توسط اسپکتروفوتومتر در 530 نانومتر تهیه گردید. رقت های سریالی از داروها از 0.03125 تا 16 میکروگرم بر میلی لیتر تهیه و میزان MIC داروها بعد از 48 ساعت انکوباسیون در دمای 35 درجه سانتی گراد تعیین گردید.
    یافته ها
    محدوده MIC به دست آمده در مورد سویه آسپرژیلوس فومیگاتوس و آسپرژیلوس فلاووس در برابر ایتراکونازول به ترتیب یک تا 4 میکروگرم بر میلی لیتر و نیم تا 4 میکروگرم بر میلی لیتر بود. در حالی که محدوده MIC برای سویه های آسپرژیلوس فومیگاتوس و آسپرژیلوس فلاووس در برابر آمفوتریسین B به ترتیب نیم تا 2 میکروگرم بر میلی لیتر و 0.25 تا 2 میکروگرم بر میلی لیتر تعیین شد. میزان MIC آمفوتریسین B به طور معنی داری کمتر از ایتراکونازول بود (P<0.05).
    نتیجه گیری
    با توجه به میزان محدوده MIC حاصل از آمفوتریسین B و ایتراکونازول، آسپرژیلوس فلاووس و آسپرژیلوس فومیگاتوس جزء سویه های حساس ارزیابی شدند و سویه مقاوم از لحاظ in vitro مشاهده نگردید.
    کلید واژگان: آسپرژیلوس فلاووس, آسپرژیلوس فومیگاتوس, حساسیت دارویی, آمفوتریسین B, ایتراکونازول}
    Kazemi A. *, Nowrozi H., Teshfam M., Teimorian Sh
    Background And Objective
    Aspergillosis is the most current causative agent of exogenous fungal nosocomial infection. This study was done to evaluate the drug susceptibility of Aspergillus flavus and A. fumigatus to itraconazole and amphotericin B.
    Materials And Methods
    This Laboratory study was done on 25 Aspergillus fumigatus and 25 Aspergillus flavus species isolated from transplant''s patients. Drug susceptibility test was done according to NCCLS M38-P document. Fungal suspensions of mentioned fungi were supplied with ranges 0. 5–5×104 by spectrophotometer at 530 nm. Serial dilutions of drugs were supplied from 0. 03125 to 16 µg/ml and MICs determined following 48h incubation at 35°C.
    Results
    Obtained MICs ranges for Aspergillus fumigatus and Aspergillus flavus were 1-4 µg/ml and 0. 5–4 µg/ml for itraconazole، respectively while MICs ranges against Aspergillus fumigatus and Aspergillus flavus were 0. 5-2 µg/ml and 0. 25-2 µg/ml for amphotericin B، respectively. Amphotericin B MICs were significantly lower than itraconazole (P<0. 05).
    Conclusion
    Aspergillus flavus and A. fumigatus were susceptible to amphotericin B and itraconazole.
    Keywords: Aspergillus flavus, Aspergillus fumigatus, Drug susceptibility, Amphotericin B, Itraconazole}
  • فرزانه معتمد، محمود سلطانی، اصغر آقایمحمدی، محبوبه منصوری، زهرا پورپاک، شهرام تیموریان، نیما پولادی، سینا عبداللهزاده
    هدف
    هدف از این مطالعه بررسی تظاهرات بالینی و آزمایشگاهی، علل و پیش آگهی درگیری کبد در بین بیماران مبتلا به کمبود آنتی بادی اولیه تحت نظر در مرکز تحقیقات نقص ایمنی اولیه تهران بود.
    روش مطالعه
    شصت و دو بیماری که از نظر بالینی و آزمایشگاهی تشخیص قطعی ابتلا به کمبود آنتی بادی اولیه داشتند، مورد مطالعه قرار گرفته و علایم و نشانه های بیماری کبد در آنها بررسی گردید. همه بیماران از نظر آلودگی با ویروس هپاتیت C و از نظر آلودگی با انگل کریپتوسپوریدیوم پارووم غربالگری گردیدند. بیماران مبتلا به درگیری کبد از جنبه های کلینیکی، آزمایشگاهی و رادیولوژیک بررسی شده و در صورت لزوم بیوپسی کبد و مطالعات پاراکلینیک بیشتر انجام گرفت.
    یافته ها
    شواهد بالینی درگیری کبد در 22 بیمار (35.5%) مشاهده گردید. هشت بیمار (13%) معیارهای بالینی، رادیولوژی و آزمایشگاهی ابتلا به بیماری مزمن کبد داشتند. در 6 بیمار بیوپسی کبد انجام شد که یک مورد شواهد کلانژیت اسکلروزان و پنج مورد نمای هپاتیت فعال مزمن با علت ناشناخته داشتند. فقط یک بیمار آزمایش PCR هپاتیت C مثبت داشت که از نظر پاتولوژیک نیز نمای هپاتیت فعال مزمن و سیروز مشاهده گردید. بدنبال آزمایش مدفوع، یک مورد آلودگی با کریپتوسپوریدیوم در بیمار مبتلا به سندرم hyper IgM مشاهده گردید ولی هیچ یافته ای به نفع درگیری کبدی نداشت. در بیماران مبتلا به هپاتیت فعال مزمن با علت ناشناخته، آسیب های ارگان های دیگر از جمله اتوایمونیتی، مهار مغز استخوان، برونشکتازی و بیماری های التهابی روده شایع بودند.
    نتیجه گیری
    بیماری های کبدی صفراوی یک عارضه شایع در کمبود آنتی بادی اولیه می باشند. بیماری کبدی در بیماران هپاتیت C منفی، غالبا همراه با درگیری سایر ارگان ها می باشد. هپاتیت فعال مزمن با علت ناشناخته شایع ترین تظاهر درگیری کبدی (75%) در بیماران ایرانی مبتلا به کمبود آنتی بادی اولیه می باشد.
    کلید واژگان: بیماری کبد, کمبود آنتی بادی اولیه, نقص ایمنی}
  • اعظم کوه کن، زهرا پورپاک، رضا صفرعلیزاده، شهرام تیموریان، علیرضا فیروز
    زمینه و هدف
    درماتیت آتوپیک بیماری التهابی راجعه و مزمن پوستی همراه با خارش شدید است که اغلب در افراد با سابقه شخصی یا خانوادگی نشانه های آلرژیک دیده می شود. تحقیق های اخیر به تغییرهای ایمونولوژیک در این بیماری و اثر سلنیوم در درمان آن اشاره دارد. مطالعه حاضر با هدف مقایسه سطح سرمی و خون تام سلنیوم در کودکان مبتلا به درماتیت آتوپیک با گروه شاهد صورت گرفته است.
    روش اجرا: مطالعه به روش تحلیلی از نوع مورد - شاهدی به اجرا درآمد. 46 بیمار مبتلا به درماتیت آتوپیک)با تشخیص بر اساس معیارهای Hanifin و Rajka و رد تشخیص های افتراقی مربوط(با 46 کودک همسان شده از نظر سن و جنس مورد مطالعه قرار گرفتند. شدت بیماری براساس SCORAD از صفر تا 100 تعیین شد. از بقایای خون و سرم بیمار - که برای آزمایش های اولیه گرفته شد - برای اندازه گیری سلنیوم سرم و خون تام به روش جذب اتمی و با دستگاه اسپکتروسکوپی استفاده شد. یافته ها با استفاده از آزمون های مربع کای و t با قبول مرز معنی داری روی 0.05 مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت.
    یافته ها
    در این مطالعه 46 کودک 1 ماهه تا 12 ساله مبتلا به درماتیت آتوپیک با سن)انحراف معیار ± میانگین(2.57±2.6 سال با 46 کودک سالم به عنوان شاهد با سن 2.63±2.6 سال مقایسه شدند (P>0.05). هر گروه شامل 24 پسر و 22 دختر بودند. میانگین سطح سرمی سلنیوم در گروه بیمار (72.58±16.5 ng/ml) پایین تر از گروه شاهد (84.8±15.6 ng/ml) بود (P<0.0001). هم چنین میانگین سلنیوم خون تام در گروه بیمار (88.07+19.0 ng/ml) پایین تر از گروه شاهد (99.38+19.3 ng/ml) به دست آمد (P<0.001). کمبود سلنیوم سرم)کم تر از (63 ng/ml در %28.3 بیماران و %10.9 گروه شاهد (P<0.05) و کمبود سلنیوم خون تام)کم تر از (75.5 ng/ml در %30.4 بیماران و %15.2 شاهد مشاهده شد (P>0.05). ارتباط معنی داری بین سطح سرمی و خون تام سلنیوم با شدت درماتیت آتوپیک مشاهده نشد.
    نتیجه گیری
    میانگین سلنیوم سرم و خون تام در بیماران مبتلا به درماتیت آتوپیک در مقایسه با گروه شاهد کاهش چشمگیری دارد. لذا پیشنهاد می شود در برنامه ریزی درمانی این بیماران به این جنبه نیز توجه و برای جبران کمبود سلنیوم در بیماران با کاهش سطح سرمی و خون تام توصیه های تغذیه ای خاص و حتی در موارد حاد از روش های درمانی استفاده شود.
    کلید واژگان: درماتیت آتوپیک, سلنیوم}
بدانید!
  • در این صفحه نام مورد نظر در اسامی نویسندگان مقالات جستجو می‌شود. ممکن است نتایج شامل مطالب نویسندگان هم نام و حتی در رشته‌های مختلف باشد.
  • همه مقالات ترجمه فارسی یا انگلیسی ندارند پس ممکن است مقالاتی باشند که نام نویسنده مورد نظر شما به صورت معادل فارسی یا انگلیسی آن درج شده باشد. در صفحه جستجوی پیشرفته می‌توانید همزمان نام فارسی و انگلیسی نویسنده را درج نمایید.
  • در صورتی که می‌خواهید جستجو را با شرایط متفاوت تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مطالب نشریات مراجعه کنید.
درخواست پشتیبانی - گزارش اشکال