فهرست مطالب نویسنده:

فائزه سید عطاران

انتخاب همه

اثر فلاونوئید کوئرستین بر تغییرات ساختاری ناحیه کینازی پروتئین نوترکیب FGFR2b

بنیامین علیمحمدی، فائزه سید عطاران، میلاد ولی شیرین، حسین پیری *

نشریه دانشگاه علوم پزشکی بیرجند، سال بیست و چهارم شماره 2 (پیاپی 71، تابستان 1396)، صص 94 -100

زمینه و هدف
اثرات فلاونوئید ها تنها مربوط به خاصیت آنتی اکسیدانی آن ها نمی باشد؛ بلکه این ترکیبات روی مسیرهای سیگنالی سلولی نیز تاثیر می گذارند. هدف از این مطالعه، بررسی تاثیر فلاونوئید کوئرستین بر ساختار سوم ناحیه کینازی پروتئین FGFR2b در شرایط آزمایشگاهی می باشد.
روش تحقیق: در این مطالعه از تکنیک اسپکتروسکوپی فلوئورسانس یا فلوئورسانس ذاتی برای بررسی ساختار سوم پروتئین تخلیص شده در شرایط مختلف استفاده گردید. به منظور ارزیابی پایداری کنفورماسیونی پروتئین تخلیص شده و با کمک غلظت های مختلفی از گوانیدین هیدروکلرید (GnHCl) در دامنه غلظتی صفر تا 6 مولار و طول موج تحریکی 280 نانومتر، دناتوراسیون شیمیایی پروتئین مذکور مورد بررسی قرار گرفت.
یافته ها
بررسی SDS-PAGE نشان داد که پروتئین به دست آمده خالص بوده و عاری از آلودگی پروتئین های باکتریایی بود. نتایج حاصل از آزمایشات اسپکتروسکوپی فلوئورسانس نشان داد که شدت نشر فلوئورسانس در حضور کوئرستین و با افزایش تدریجی غلظت آن ها کاهش می یابد. دناتوراسیون ساختمان پروتئین نشان داد که نشر فلوئورسانس در حضور کوئرستین و با افزایش تدریجی غلظت آن کاهش یافت که نتیجه ی آن، تغییر ساختار سوم ناحیه کینازی بر اثر دناتوراسیون شیمیایی می باشد.
نتیجه گیری
کوئرستین می تواند موجب تغییر ساختار سوم دومین کینازی و در نتیجه ناپایدار شدن آن گردد. این ناپایداری در سطح مولکولی می تواند موجب اختلال در مسیر پیام رسانی سلول شده و در نتیجه مهار رشد و تکثیر سلول های سرطانی گردد.

کلید واژگان: اسپکتروسکوپی, دومین کینازی, فلوئورسانس, فیبروبلاستی, کوئرستین, گیرنده عامل رشد

چکیده مشاهده متن زبان: فارسی

Effect of Quercetin flavonoid on structural changes of recombinant human FGFR2b kinase domain

Benyamin Alimohammadi, Faezeh Seyyed-Attaran, Milad Vali-Shirin, Hossein Piri *

Birjand University of Medical Sciences, Volume:24 Issue: 2, 2017, PP 94 -100

Background And Aim
Antioxidants are compounds that protect cells from attacks of free radicals. Lack of balance between antioxidants and free radicals results in oxidative stress, which ultimately results in cell damage. The effects of flavonoids are not related solely to their antioxidant properties, but also to their effects on cellular signal pathways. The present study was conducted to evaluate the effect of Quercetin on the structure of the third region of FGFR2b kinase using fluorescence method.
Materials And Methods
Using SDS-PAGE, expression of the protein was determined and its constant concentration was used in the present study. Using different concentrations of Quercetin in the presence of a constant concentration of pure protein, the fluorescence spectrum and chemical denaturation were evaluated.
Results
In the last studies, SDS-PAGE analysis of the purified proteins had confirmed that no contamination and unwanted bacterial proteins were co-eluted with the protein. Studying the spectrum of various concentrations of Quercetin in the presence of constant concentration of proteins showed a decrease in the intensity of the release; and also, the chemical denaturation changed the third structure of the kinase domain.
Conclusion
The tertiary structural change of FGFR2b kinase domain represents a conformational change that may have a critical role in signal transduction cascade. Thus, this molecular transduction inconsistency can lead to cellular transduction complication; and as a result, inhibit the development and multiplication of cancerous cells.

Keywords: Fibroblast growth factor receptor, Kinase domain, Flouresence spectroscopy, Quercetin

Abstract View Paper Original: Persian
بیان و تخلیص ناحیه ی کینازی پروتئین نوترکیب گیرنده ی عامل رشد فیبروبلاستی نوع 2b و بررسی تغییرات ساختاری آن بر اثر برهم کنش آن با گالیک اسید

فائزه سید عطاران، داریوش ایلغاری، نعمت الله غیبی، مهدی سهمانی، حسین پیری

مجله دانشکده پزشکی اصفهان، پیاپی 362 (هفته دوم بهمن 1394)، صص 2143 -2151

مقدمه
گیرنده ی عامل رشد فیبروبلاستی 2b (FGFR2b یا Fibroblast growth factor receptor 2b) در مسیر پیام رسانی سلولی و تنظیم فرایندهای مهم زیستی نظیر تمایز و تکثیر سلولی نقش اساسی دارد. تغییرات ژنتیک نظیر جهش نقطه ای در ناحیه ی تیروزین کینازی FGFR2b با سرطان پستان، تخمدان و پروستات در ارتباط است. این مطالعه، به منظور بیان و خالص سازی مقدار مناسبی از ناحیه ی کینازی FGFR2b انسانی و بررسی تغییرات ساختاری آن با گالیک اسید انجام شد.
روش ها
بیان پروتئین نوترکیب با استفاده از IPTG (Isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside) 1 میلی مولار در دمای 37 درجه ی سانتی گراد القا و با استفاده از الکتروفورز روی ژل پلی آکریلامید در حضور سدیم دودسیل سولفات (Sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis یا SDS-PAGE) ارزیابی شد. پروتئین بیان شده با استفاده از کروماتوگرافی میل ترکیبی خالص شد و فعال بودن نمونه ی پروتئین بعد از دیالیز بررسی شد. طیف فلوئورسانس و دناتوراسیون شیمیایی پروتئین خالص شده، در حضور غلظت های مختلف گالیک اسید سنجیده شد.
یافته ها
بررسی SDS-PAGE قبل و بعد از القا شدن نشان داد که پروتئین بیان شده در دمای 20 درجه ی سانتی گراد محلول است. همچنین، تایید کرد که پروتئین خالص شده است. بررسی طیف سنجی فلوئورسنس، افزایش شدت نشر را با افزایش تدریجی غلظت گالیک اسید نشان داد. دناتوراسیون شیمیایی ساختار سوم زیر واحدهای ناحیه ی کینازی را در حضور گالیک اسید تغییر داد.
نتیجه گیری
با توجه به یافته ها، ناحیه ی کینازی گیرنده ی نوترکیب عامل رشد فیبروبلاستی 2b که یک پروتئین 38 کیلودالتونی است، تولید و خالص گردید. تغییرات ساختار سوم دومین کینازی، موجب ناپایدار شدن آن در حضور گالیک اسید گردید. این ناپایداری در سطح مولکولی، می تواند موجب اختلال در مسیر پیام سانی سلول شود.

کلید واژگان: گیرنده ی عامل رشد فیبروبلاست نوع 2, گالیک اسید, اسپکترومتری فلورسانس

چکیده مشاهده متن زبان: فارسی

Expression and Purification of the Recombinant Kinase Domain of FGFR2b and Study of its Structural Changes Due to the Interaction with Gallic Acid

Faezeh Seyyed, Attaran, Dariush Ilghari, Nematollah Gheibi, Mehdi Sahmani, Hossein Piri

Journal Of Isfahan Medical School, Volume:33 Issue: 362, 2016, PP 2143 -2151

Background
FGFR2b plays a significant role in cell signaling pathway, regulating several key biological processes including cellular differentiation and proliferation. Genetic alterations of the tyrosine kinase domain of FGFR2b, such as point mutations, occur in breast, ovarian and prostate cancer. This study aimed to express and zepurify the human FGFR2b kinase domain and to analyze its structural changes upon interaction with Gallic acid (GA).
Methods
Expression of recombinant protein was induced with 1mM IPTG at 37 ºC and analyzed using sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). The protein was purified via affinity chromatography and the protein sample was dialyzed and then used to be analyzed via SDS-PAGE. Chemical denaturation and intrinsic fluorescence spectra of the purified proteins were carried out via adding different concentrations of Gallic acid.
Findings
Comparison between pre- and post-induction samples via SDS-PAGE analysis showed that the expressed protein was soluble at 20 ºC. Additionally, its purity was confirmed. The intrinsic fluorescence spectra of kinase domain in the presence of Gallic acid showed an increase in fluorescence intensity and maximum emission wavelength.
Conclusion
Regarding to the results, the recombinant kinase domain of FGFR2b (38 kDa) was expressed, solubilized and purified. Changing in tertiary structural kinase domain reflects a conformational change within the protein that is important for the biological function of FGFR2b.

Keywords: Receptor, Fibroblast growth factor 2, Gallic acid, Spectrometry, Fluorescence

Abstract View Paper Original: Persian

بدانید!

در این صفحه نام مورد نظر در اسامی نویسندگان مقالات جستجو می‌شود. ممکن است نتایج شامل مطالب نویسندگان هم نام و حتی در رشته‌های مختلف باشد.
همه مقالات ترجمه فارسی یا انگلیسی ندارند پس ممکن است مقالاتی باشند که نام نویسنده مورد نظر شما به صورت معادل فارسی یا انگلیسی آن درج شده باشد. در صفحه جستجوی پیشرفته می‌توانید همزمان نام فارسی و انگلیسی نویسنده را درج نمایید.
در صورتی که می‌خواهید جستجو را با شرایط متفاوت تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مطالب نشریات مراجعه کنید.

به جمع مشترکان مگیران بپیوندید!

فائزه سید عطاران