جستجوی مقالات مرتبط با کلیدواژه "escherichia coli" در نشریات گروه "زیست شناسی"
تکرار جستجوی کلیدواژه «escherichia coli» در نشریات گروه «علوم پایه»-
BackgroundRecombinant proteins produced in the cell factories are used in biological research, pharmaceutical production, and biochemical and agricultural applications. Molecular chaperones, such as heat shock proteins (Hsps), are co-expressed with recombinant proteins to enhance their yield, stability, and activity. When Escherichia coli (E. coli) is used as a cell factory, E. coli Hsps are the frequently used co-expression partners.ObjectivesWe examined if there are differences in the molecular chaperone activities of plant and bacterial Hsps on recombinant protein activity. We compared the effects of the Hsps from carrot (Daucus carota) and E. coli on enhancing the recombinant alcohol dehydrogenase (ADH) activity and solubility under normal and heat conditions in vitro.Materials and MethodsHis-tagged carrot Hsps (DcHsp17.7 and DcHsp70), E. coli Hsps (IbpA, IbpB, and DnaK), and ADH from a thermophile Geobacillus stearothermophilus were individually cloned in a pET11a or a pET26b vector, introduced into E. coli BL21(DE3), and expressed by isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside treatment (0.5 mM, 16 ℃, 20 h). The recombinant proteins were purified using Ni-NTA affinity chromatography and resolved in SDS-PAGE (17%). The recombinant ADH was treated with the individual Hsps or in combination, and the enzyme activity was examined by measuring the NADH product levels at O.D.340.ResultsThe recombinant ADH was expressed at high levels in E. coli and very thermotolerant when the purified enzyme reacted (up to 70 ℃). All five Hsps enhanced the ADH activity under normal and heat conditions in vitro, compared to the control. DcHsp17.7 and DcHsp70 were the most effective for improving the enzyme activity by up to 13.0- and 11.6-fold, respectively, followed by IbpA (8.4-fold), DnaK (6.5-fold), and IbpB (3.4-fold), at 37 ℃. Combined incubation of DcHsp17.7-DcHsp70 and DcHsp17.7-DnaK further enhanced the ADH activity by 13.8 and 14.2-fold, respectively. DcHsp70 effectively enhanced ADH's solubility at 37 ℃ in vitro.ConclusionOur results suggest that plant Hsps can enhance recombinant protein activity, such as ADH, more effectively than their bacterial counterparts. Identifying effective molecular chaperones in the bacterial and eukaryotic domains will help enhance the production of recombinant proteins in E. coli.Keywords: Daucus Carota, Enzyme Activity, Escherichia Coli, Molecular Chaperone, Recombinant Protein
-
باکتری اشرشیاکلی یکی از مهمترین میزبان های مورد استفاده برای تولید پروتئین نوترکیب می باشد. به عنوان مثال، بیشتر پروتئین های دارویی که توسط سازمان غذا و داروی آمریکا جهت مصرف مورد تایید قرار گرفته اند در اشرشیاکلی تولید شده اند. یکی از مزیت هایی که این موجود را به یک کارخانه مناسب جهت تولید پروتئین های نوترکیب تبدیل کرده، شناخت کامل ماهیت زیستی آن می باشد. این امر سبب شده است که در سال های اخیر امکان ایجاد تغییرات جهت دار برای مبدل ساختن این کارخانه کوچک به سامانه ای هوشمند برای ساخت آسان تر انواع پروتئین های نوترکیب با ویژگی های گوناگون فراهم شود. به طوری که هم اکنون سویه های مهندسی شده ی مختلف و بسیار پرکاربردی برای تولید مقدار بالا و پایدار پروتئین های مورد نظر از سویه های والد و وحشی به دست آمده است که در آزمایشگاه و صنعت قابل استفاده می باشد. در این مقاله مروری ما به معرفی تعدادی از این سویه ها که پرکاربردتر هستند می پردازیم.
کلید واژگان: اشرشیاکلی, پروتئین نوترکیب, میزبانOne of the most important hosts used for production of recombinant proteins is Escherichia Coli. For example, the most therapeutic proteins approved by FDA are produced in Escherichia Coli. Comprehensive knowledge about biologic nature of Escherichia Coli had made this microorganism to a favorable factory for production of recombinant proteins. Accessibility of this information have led to rational manipulation for changing of this small factory to intelligent system can make different recombinant proteins easier. So that, many engineered and useful strains were obtained from wild type and parental strains can produce high amount of diverse and stable recombinant proteins in lab and industrial scale. In this review, we will present some of these strains that are more widely used.
Keywords: Escherichia Coli, Recombinant Protein, Host -
سابقه و هدف
نانو کامپوزیت ها از ترکیبات مختلفی تهیه میشوند و میتوانند دارای خاصیت آنتی باکتریایی باشند. هدف از این مطالعه بررسی اثرات ضد باکتریایی نانو کامپوزیت های بوهمیت-طلا و بوهمیت -طلا-کیتوزان به کمک عصاره آبی گیاه نعناع فلفلی میباشد.
مواد و روش هادر این مطالعه نانو کامپوزیت های بوهمیت-طلا و بوهمیت-طلا-کیتوزان به روش بیوسنتز خارج سلولی تهیه شدند، سپس خواص ضد باکتریایی آنها با روش های تعیین حداقل غلظت بازدارندگی، حداقل غلظت کشندگی و سنجش زمان مرگ باکتری ها با روش کلاسیک تهیه رقتهای متوالی کمیته ملی استانداردهای آزمایشگاهی تعیین و گزارش گردید.
یافته هابر اساس نتایج به دست آمده، حداقل غلظت های بازدارندگی و کشندگی برای گروه بوهمیت به ترتیب 10 و 20 میکروگرم بر میلی لیتر بود. بر اساس نتایج، حداقل غلظت های بازدارندگی و کشندگی برای گروه های بوهمیت- طلا و بوهمیت-طلا-کیتوزان علیه باکتری اسینتوباکتر بومانی و به ترتیب 50/2 و 5 میکروگرم بر میلی لیتر و برای باکتری اشریشیا کلی به ترتیب 5 و 10 میکروگرم بر میلی لیتر بود. بیشترین فعالیت ضد باکتریایی نانو کامپوزیت بوهمیت-طلا و بوهمیت-طلا-کیتوزان برای دوره ی 6 تا 24 ساعته بود.
نتیجه گیریبا توجه به نتایج به دست آمده در تمام مطالعات انجام گرفته، بوهمیت دارای فعالیت ضد باکتریایی کمتری در مقایسه با گروه های بوهمیت-طلا و بوهمیت-طلاکیتوزان در مقابل باکتریهای مذکور بود. نانو کامپوزیت های بوهمیت-طلا و بوهمیت- طلا- کیتوزان دارای اثرات ضد میکروبی روی باکتریهای عفونی کننده ی زخم هستند.
کلید واژگان: نانو کامپوزیت, کیتوزان, بوهمیت, طلا, اسینتوباکتر بومانی, اشریشیا کلی, زخم عفونی, Iau ScienceAim and BackgroundNanocomposites are prepared from various materials that may have antibacterial activity. This study aimed to investigate antibacterial and antifungal activityies of nanocomposites of bohemite-gold and bohemite-gold-chitosan by help of aqeous extract of peppermint.
Material and methodsIn the current study, the nanocomposites were prepared by exextracellular biosynthesis and antibacterial properties were investigated by minimum inhibitory concentration (MIC), minimum bactericidal concentration (MBC) and killing-time curve by classic method of consecutive dilutions by Clinical & Laboratory Standards Institute.
ResultsThe results showed that MIC and MBC were 10 µg/mL and 20 µg/mL for bohemite group, respectively. The results also showed that MIC and MBC were 2.50 µg/mL and 5 µg/mL against Acinetobacter baumannii and 5 µg/mL and 10 µg/mL against Escherichia coli, respectively. The greatest antibacterial activity for of bohemite-gold and bohemite-gold-chitosan was observed for a period of 6 to 24 h. Based on ourfindings, bohemite showed lower antibacterial activity compared with bohemite-gold and bohemite-gold-chitosan against the mentioned bacteria.
ConclusionThe prepared nanocomposites did not show any antifungal activity. Thus, bohemite-gold and bohemite-gold-chitosan nanocomposites have antibacterial activities against bacteria inducing infection in wound.
Keywords: Nanocomposite, Chitosan, Bohemite, Gold, Acinetobacter Baumannii, Escherichia Coli, Infected Wound, Iau Science -
مهم ترین شاخصه نانو ذرات داشتن نسبت سطح ویژه بیشتر نسبت به همتای خود با اندازه بزرگتر است. هدف از این مطالعه سنتز نانوذره اکسید روی آلائیده شده با نقره و اثرات ضد میکروبی آن بر روی پاتوژنهای شایع باکتریایی جدا شده از محصولات خام لبنی بود. در این تحقیق جهت جداسازی نمونه ها ،45 نمونه محصول خام لبنی بعد از رقیق سازی نمونه ها ، جهت جداسازی استافیلوکوکوس اورئوس و اشرشیا کلی ، به ترتیب به محیط های برد پارکر و سوربیتول مک کانکی آگار انتقال داده شدند و با استفاده از یک سری تست های اختصاصی تشخیص داده شدند. نانو پودر اکسید روی آلائیده شده با نقره به روش سل- ژل سنتز شد.بررسی اثرات ضد میکروبی نانو ذره با روش انتشار در چاهک مورد بررسی قرار گرفت. حداقل غلظت بازدارندگی (MIC) نانوپودر اکسید روی آلائیده شده با نقره و همچنین حداقل غلظت باکتری کشی (MBC) تعیین گردید. میانگین قطر هاله های عدم رشد E. coli PTCC 1399 وE. coli (1) و E. coli (2) به ترتیب 5/22 ،5/18 و 4/15 میلی متر در غلظت 50 میلی گرم بر میلی لیتر و میانگین قطر هاله های عدم رشد S. aureus PTCC 1189 ، S. aureus (1)و S. aureus (2) به ترتیب 5/24 ،4/20و 5/19میلی متر در این غلظت بود. میزان MIC برای باکتری E. coli PTCC 1399 برابر با 57/1و اشرشیا کلی (ایزوله 1) و اشرشیا کلی (ایزوله 2) به ترتیب 57/1 و 13/3 میلی گرم بر میلی لیتر تعیین گردید. با توجه به تحقیق حاضر می توان به این نکته رسید که خود نانوذره اکسید روی دارای خاصیت ممانعت کنندگی خوبی روی دو سویه اشرشیا کلی و استافیلوکوکوس اورئوس است.یکی از روش های بهبود یا تغییر خواص نانوساختارهایی مانند اکسید روی، ورود ناخالصی در ساختار آن است. در صورت آزمایشات بیشتر می توان از این نانو ذره به عنوان ماده نگهدارنده استفاده کرد.
کلید واژگان: نانوذره, اکسید روی, استافیلوکوکوس, اشرشیا کلی, آنتی بیوگرامSynthetic nanoparticles have unique physical and chemical properties. The most important characteristic of these nanoparticles is having a higher surface area than their counterparts of larger size. In this research 45 samples of dairy raw products after dilution of samples, to isolate Staphylococcus aureus and Escherichia coli were transferred to the Baird Parker Agar and Sorbitol Mac Conkey Agar media respectively, and were identified using a series of specific tests. Zinc oxide-doped nanopowder was synthesized by the sol-gel method. The antimicrobial effects of nanoparticles were investigated by the well diffusion method. The minimum inhibitory concentration (MIC) of Zinc oxide-doped nanopowder and minimum bactericidal concentration (MBC) were determined. The mean diameter zone of the inhibitory growth of strains of E. coli PTCC 1399 and E. coli (1) and E. coli (2) were 22.5, 18.5, and 15.4 mm respectively at a concentration of 50 mg/ml and the mean diameter zone of the inhibitory of S. aureus PTCC 1189, S. aureus (1) and S. aureus (2) standard strains were 24.5, 20.4 and 19.5 mm. In this concentration. MIC for E. coli PTCC 1399 was 1.75, and E. coli (isolate 1) and E. coli (isolate 2) were 1.55 and 3.13 mg/ml, respectively. In the case of further experiments, this nanoparticle can be used as a preservative.
Keywords: Nanoparticle, Zinc Oxide, Staphylococcus, Escherichia Coli, Antibiogram -
اینتگرون ها نقش اساسی در انتشار ژن های مقاومت آنتی بیوتیکی در بین جدایه های اشریشیا کلی دارند. هدف از این مطالعه، تعیین شیوع اینتگرون های کلاس 1 و 2 در میان جدایه های اشریشیا کلی مولد بتالاکتامازهای وسیع الطیف (ESBLs) جدا شده از بیماران مبتلا به عفونت های دستگاه ادراری مراجعه کننده به بیمارستان آموزشی اهواز در سال 1396-97 بود.
در این مطالعه توصیفی- مقطعی، جدایه ها با استفاده از روش های مرسوم آزمایشگاهی شناسایی شدند. حساسیت آنتی بیوتیکی جدایه ها بوسیله روش دیسک دیفیوژن آگار و تولید آنزیم های ESBLs با استفاده از روش Double disc مورد سنجش قرار گرفت. در نهایت حضور ژن های مربوط به اینتگرون های کلاس 1 و 2 با استفاده از روش PCR انجام شد. در بین 123 جدایه اشریشیا کلی تولید کننده ESBLs، بیشترین میزان مقاومت آنتی بیوتیکی به ترتیب نسبت به سفوتاکسیم، سفتازدیدیم ، کوتریموکسازول، نالیدیکسیک اسید و کمترین مقاومت آنها نسبت به ایمی پنم مشاهده شد.
تعداد 84 (29/68 درصد) جدایه دارای مقاومت دارویی چند گانه (MDR) بودند. تعداد 93 (60/75 درصد) جدایه دارای اینتگرون کلاس 1 و 11 (94/8 درصد) جدایه دارای اینتگرون کلاس 2 بودند. ارتباط معنی داری بین حضور اینتگرون و مقاومت به آنتی بیوتیک های مختلف مشاهده نشد (P > 0/05). شیوع بالای اینتگرون کلاس 1 در بین جدایه های اشریشیا کلی مولد بتالاکتاماز وسیع الطیف ممکن است به مقاومت به آنتی بیوتیک های رایج، کمک کند. بنابراین بررسی فراوانی اینتگرون ها و ارتباط آنها با الگوهای مقاومت آنتی بیوتیکی ضروری بنظر می رسد.کلید واژگان: اشریشیا کلی, مقاومت آنتی بیوتیکی, بتالاکتاماز های وسیع الطیف, اینتگرونIntegrons play an essential role in spreading antibiotic resistance genes among Escherichia coli isolates. The aim of this study was to determine the prevalence of class 1 and 2 integrons amongst Escherichia coli isolates producing broad-spectrum beta-lactamases (ESBLs) in patients with urinary tract infections referred to Ahvaz teaching Hospital in 2017-2018. In this cross-sectional descriptive study, isolates were determined using conventional methods. Antibiotic susceptibility was measured by agar disc diffusion method. Production of ESBLs enzymes was measured via double disc method. Finally, presence of genes related to class 1 and 2 integrons was done using specific primers and Polymerase chain reaction method. Amongst 123 Escherichia coli ESBLs producing isolates the highest resistance was related to Cefotaxime, Ceftazidime, Cotrimoxazole and, Nalidixic acid, respectively, and the least resistance was related to Imipenem. About 84 (68.29%) isolates had multiple drug resistance (MDR). Additionally, 93 (75.60 %) isolates had class 1 integron and 11 (8.94 %) isolates had class 2 integron. There were no significant relationships between the presence of integrons and resistance to different antibiotics (p > 0.05). High prevalence of class 1 integron amongst Escherichia coli isolates producing broad-spectrum β-lactamase may contribute to resistance to common antibiotics. Therefore, identifying frequency of integrons and their relationship with drug resistance patterns seems to be necessary.
Keywords: Escherichia Coli, Antibiotic Resistance, Extended-Spectrum Β-Lactamase, Integrons -
سابقه و هدف
اشریشیاکلی یکی از شاخص های مهم در کنترل کیفیت نمونه های دارویی و واقعی است. هدف از این تحقیق بررسی مقایسه ای تشخیص این باکتری با روش های متداول و استفاده از یک حسگر زیستی برپایه نانولوله های کربنی چندلایه بر روی الکترود شیشه ای کربن در نمونه های داروئی و واقعی مانند آب می باشد.
مواد و روش هادر این پژوهش تجربی، از روش متداول کشت(پورپلیت) و حسگر زیستی ساخته شده بر پایه نانولوله های کربنی چندلایه بر روی الکترود شیشه ای کربن با آرایش GC/MWCNTs/AuNPs/Ab/BSA برای تشخیص اشریشیاکلی استفاده شد. رقت های CFU/ml 108 × 1- 101 × 1 از باکتری اشریشیاکلی در نمونه های دارویی، و آب در بافر فسفات M1/0 حاوی استامینوفن mM5/0 استفاده گردید. ویژگی های حسگر زیستی به وسیله میکروسکوپ الکترونی، روش های الکتروشیمیایی ولتامتری چرخه ای و ولتامتری موجی مربعی بررسی و از باکتری های مداخله گر در بررسی عملکرد اختصاصی آن استفاده شد.
یافته هانتایج تشخیص اشریشیاکلی توسط حسگر زیستی در نمونه های مختلف دارویی و آب ازنظر آماری در مقایسه با روش متداول کشت اختلاف معنی داری نشان نداد. اما حسگر زیستی طراحی شده برای باکتری اشریشیاکلی دارای حساسیت بالا و حداقل حد تشخیص CFU/ml02/3 باکتری اشریشیا کلی در زمان 3 دقیقه بود.
نتیجه گیریمعمولا شاخص های میکروبی مانند اشریشیاکلی را با روش های متداول تشخیص می دهند. پایش میکروبی در ترکیبات دارویی با روش های متداول زمان بر بوده و خطر از دست رفتن محصولات دارویی را نیز به همراه دارد. اما حسگر زیستی در تشخیص این باکتری با صرف هزینه کم و بدون نیاز به غنی سازی در حجم کم نمونه ها، کارایی مناسبی دارد.
کلید واژگان: حسگر زیستی, اشریشیاکلی, نانولوله های کربنی چندلایه, نانو ذرات طلاBackground & ObjectivesEscherichia coli is an important indicator in the quality control of pharmaceutical and real samples. This study compares the detection of this bacterium by regular method and a biosensor based on Multi-Walled Carbon Nanotubes (MWCNTs) on glassy carbon electrodes (GCE) in pharmaceutical and water as real sample.
Materials and MethodsIn this experimental study, the conventional culture method (pour plate) and modified biosensor based on Multi-Walled Carbon Nanotubes on glassy carbon electrode with the arrangement of GC/MWCNTs/AuNPs/Ab/BSA were used for the detection of E. coli. Dilutions of E. coli between (1 ×101–1×108 CFU/ml) were used in pharmaceutical and water samples, prepared in 0.1 M PBS (pH 7.4), mixed with 0.5mM acetaminophen. The efficiency of the designed biosensor was investigated using SEM, Cyclic Voltammetry, and Square-Wave Voltammetry electrochemical techniques, as well as interfering bacteria.
ResultsThe results of E. coli detection using the conventional culture and designed biosensor were not statistically significant. The designed biosensor had a high sensitivity with accuracy in 3 minutes and LOD 3.02 CFU/ml for Escherichia coli.
ConclusionConsidering the time-consuming and influenced by environmental factors in the microbial monitoring of pharmaceuticals for E. coli detection in conventional methods and the risk of losing pharmaceutical products, the biosensor has good efficiency in detection with low cost and no need for enrichment in a small volume of samples.
Keywords: Biosensor, Escherichia Coli, Multi-Walled Carbon Nanotubes (Mwcnts), Au Nanoparticles (Aunps)S), Au Nanoparticles (Aunps) -
اینتگرون ها عناصر متحرک ژنتیکی بوده که قادرند ژن های مقاومت به آنتی بیوتیک های مختلف را حمل کنند. این عناصر در مکان های مختلفی از پلاسمید و کروموزوم یافت شده اند. تحقیق حاضر با هدف ردیابی اینتگرون های کلاس 1، 2 و 3 در ایزوله های اشریشیاکلی جدا شده از موارد عفونت ادراری در شهرستان شهرکرد انجام شده است. در این تحقیق تعداد 64 ایزوله اشریشیاکلی جدا شده از موارد عفونت ادراری در شهرستان شهرکرد مورد بررسی قرار گرفتند. مقاومت آنتی بیوتیکی ایزوله های مورد بررسی با استفاده از روش دیسک گذاری ساده در محیط مولر هینتون آگار مورد بررسی قرار گرفت. به منظور تعیین فراوانی اینتگرون های کلاس 1، 2 و 3 از زوج پرایمرهای اختصاصی استفاده گردید. پس از انجام آزمون آنتی بیوگرام، بیشترین مقاومت نسبت به آمپی سیلین (75%) و کمترین مقاومت نسبت به ایمی پنم (5/12%) مشاهده گردید. فراوانی ژن های اینتگرون کلاس 1 و 2 و 3 به ترتیب 5/12%، 25/6% و 12/3% مشاهده گردید. در 52 جدایه هیچ یک از ژن های اینتگرون مشاهده نگردید. در تجزیه و تحلیل آماری با آزمون کای دو بین اینتگرون کلاس 1 و مقاومت نسبت به آنتی بیوتیک آمپی سیلین ارتباط آماری معنی داری (p =0.02< 0.05) مشاهده گردید. با توجه به این که ژن های مقاومت بر روی اینتگرون ها قرار دارند و می توانند از یک سویه به سویه دیگر منتقل شوند و مقاومت را در بیمارستان یا دیگر محیط ها منتشر نمایند، لذا این امر اهمیت شناسایی این نوع از ژن های مقاومت آنتی بیوتیکی را دو چندان کرده است.
کلید واژگان: اشریشیاکلی, اینتگرون, مقاومت آنتی بیوتیکی, عفونت ادراریIntegrons are mobile genetic elements capable of carrying resistance genes to various antibiotics. These elements have been found in different places of plasmid and chromosome. The aim of this present study was determine the prevalence of class 1, 2 and 3 integrons in Escherichia coli isolates isolated from urinary tract infection in Shahrekord. In this research, the number of 64 isolates of Escherichia coli were investigated. The antibiotic resistance of the investigated isolates was evaluated using a simple disking method in Mueller Hinton agar medium. In order to determine the frequency of class 1, 2 and 3 integrons, specific primer pairs were used. After the antibiogram test, the highest resistance to ampicillin (75%) and the lowest resistance to imipenem (12.5%) were observed. The frequency of class 1, 2 and 3 integron genes was observed as 12.5%, 6.25% and 3.12%, respectively. None of the integron genes were observed in 52 isolates. In the statistical analysis with chi-square test, a statistically significant relationship was observed between class 1 integron and resistance to the antibiotic ampicillin (p = 0.02 < 0.05). Due to the fact that resistance genes are located on integrons and can be transferred from one strain to another strain and spread resistance in the hospital or other environments, this has doubled the importance of identifying this type of antibiotic resistance genes. Key words: Escherichia coli, integron, antibiotic resistance, urinary infection
Keywords: Escherichia Coli, Integron, Antibiotic Resistance, Urinary Infection -
گیاه مرزه (Satureja macrantha) به خانواده نعناعیان تعلق دارد، گیاهی است یک ساله یا چند ساله که ایران 12 گونه علفی یک ساله یا چند ساله دارد. در مطالعات متعدد، خواص ضد میکروبی، ضد ویروسی، ضد قارچی، ضد اسپاسم، تقویت کننده معده و تسهیل کننده هضم از این جنس گزارش شده است. نیوزوم ها مزایای متعددی را برای سیستم های دارورسانی ارایه می دهند، از جمله فعال اسمزی، پایداری شیمیایی و زمان نگهداری طولانی در مقایسه با لیپوزوم ها. در مطالعه حاضر نیوزوم های استخراج شده از مرزه به عنوان دارو به روش کالریمتریک (روش فولین) تعیین شد. در این مطالعه فرمولاسیون نیوزوم حاوی عصاره Satureja macrantha ، بر اساس نسبت مولی Span 60/Tween 60، کلسترول و با زمان سونیکاسیون 7 دقیقه تهیه شد. نیوزوم های استخراج شده از گیاه مرزه به شکل معنی داری سبب بازدارندگی فعالیت دو باکتری استافیلوکوکوس اوریوس (Staphylococcus aureus) و اشرشیاکلی (Escherichia coli) مورد آزمایش در پژوهش حاضر گردید.
کلید واژگان: آنتی بیوتیک, مرزه, نیوزوم, Staphylococcus aureus و Escherichia coliThe savory(Satureja macrantha) belongs to the mint family, it is an annual or multi-year plant, Iran has 12 annual or multi-year grass species. In many studies, antimicrobial, antiviral, antifungal, antispasmodic, stomach strengthening and digestion facilitating properties of this genus have been reported. Nisome is a important surfactant-based non-ionic vesicle. Niosomes offer several advantages for drug delivery systems, including osmotically active, chemical stability and long retention time compared to liposomes. In the present study, niosomes extracted from as a drug are dynamically evaluated by calorimetric method (Folin's method). In this study niosomes formulation containing Satureja macrantha extract, in order to achieve the optimal formulation, different formulations were prepared based on the molar ratio of Span 60/Tween 60, cholesterol and with a sonication time of 7 minutes. The niosomes extracted from the savory plant significantly inhibited the activity of the two bacteria(Staphylococcus aureus ) and (Escherichia coli) tested in the present study.
Keywords: antibiotic, savory, Niosome, Staphylococcus aureus, Escherichia coli -
This study was conducted to evaluate the antibacterial potential of Euphorbia tirucalli L. and Vernonia glabra (Steetz) Vatke and their safety level. The plants were obtained from Kiwere ward in the Iringa district, prepared and extracted in aqueous and ethanol solvents. The E. tirucalli and V. glabra plant extracts were studied for their antimicrobial activities against E. coli isolates and E. coli ATCC 25922 using the agar well diffusion method. Minimum inhibitory and bactericidal concentrations (MIC and MBC) were determined. Among the tested plant extracts, the ethanol extracts of V. glabra showed the highest activity against E. coli isolates and E. coli 25922 with a mean inhibition zone of 17.909±0.3297 and 22.5 ± 0.500 respectively. Furthermore, on MIC and MBC, the ethanol extracts of V. glabra had a better activity with the values ranging from 1.25-2.5 mg/ml and 2.5-5 mg/ml respectively compared to other plant extracts. Phytochemical screening revealed the extract’s presence of alkaloids, flavonoids, tannins, saponins, triterpenes and steroids. The brine shrimp lethality test showed that the aqueous extract of E. tirucalli was non-toxic with LC50 of 1007 µg/mL, while ethanol extract of E. tirucalli, aqueous extract of V. glabra and ethanol extract of V. glabra were less toxic with LC50 values of 589, 507 and 658 µg/mL respectively. These results indicate that the plant extracts have bioactive constituents that could be accounted for their pharmacological properties. Furthermore, these results proved the claim of indigenous people in the study area on the effectiveness and safety of the plants and supported the use of these plant species in traditional medicine.Keywords: Antibacterial activity, Euphorbia Tirucalli, Vernonia Glabra, Escherichia coli, Phytochemical screening, Brine Shrimp Lethality Test
-
مقدمهبا توجه به اهمیت ضدعفونی کردن و پیشگیری از بیماری های ناشی از اشرشیا کلی، گاهی شرکت های تولید کننده این ضدعفونی کننده ها در معرفی محصولات خود اغراق نموده و باعث می شود کارکنان مراکز بهداشتی و بیمارستان ها بدون انجام آزمایشات، این محصولات را به عنوان ضدعفونی کننده برای ضدعفونی کردن سطوح و اماکن به کار ببرند، اگر این محصولات کارایی و اثر بخشی توصیه شده که در دستورالعمل شرکت سازنده به آن اشاره کرده نداشته باشد ضرر های جبران ناپذیری خواهد داشت.هدفاین مطالعه در سال 1400 با هدف ارزیابی تاثیر سه ماده ضدعفونی کننده میکروتن، بنزوالکونیوم کلراید، ساولن با رقت های توصیه شده بر روی جدایه های اشرشیاکلی از بخش های عمومی بیمارستان انجام شده است.مواد و روش هادر این مطالعه از نوع پژوهشی، تعداد 50 نمونه از بخش های مختلف بیمارستان جمع آوری شده و باکتری اشرشیاکلی با استفاده از روش های بیوشیمیایی و روش مولکولی مورد بررسی قرار گرفت. از باکتری E.coli(G4S45) به عنوان کنترل استفاده گردید. با استفاده از روش رقت سازی فارما مطابق با استاندارد واحد دارویی امریکا کشت باکتری ها به روش پورپلیت صورت گرفت و در آخر تاثیر مواد ضدعفونی کننده نام برده شده روی باکتری اشرشیاکلی بررسی شد.یافته هااز مجموع نمونه های بررسی شده 19 نمونهE.coli مثبت بوده و سه ماده ضدعفونی کننده در زمان های5،10،15 دقیقه پس از انکوباسیون و انجام روش پورپلیت باعث عدم رشد 100 درصد گردیدند.نتیجه گیرینتایج کار ما نشان دادندکه کارایی سه ماده ضدعفونی کننده مورد آزمایش طبق دستورالعمل شرکت سازنده 100 درصد موثر بودند.کلید واژگان: ضد عفونی کننده, ساولن, میکروتن, بنزالکونیوم کلراید, اشرشیاکلیIntroductionDue to the importance of disinfection and prevention of diseases caused by Escherichia coli, sometimes the companies producing these disinfectants have exaggerated and it causes the employees of health centers and hospitals to use these products as sterilizers to sterilize surfaces and places without conducting tests. If these products do not have the recommended efficiency and effectiveness mentioned in the instructions of the manufacturer, it will cause irreparable losses.AimThis study was carried out in 1400 with the aim of evaluating the effect of three disinfectants Microten, Benzalkonium Chloride, and Savlon with recommended dilutions on Escherichia coli isolates from general hospital wards.Materials and methodsIn this study, 50 samples were collected from the general departments of the hospital, and E.coli were analyzed using biochemical and molecular methods. E.coli (G4S45) was used as a control. Bacteria were cultured using the pour plate method using the pharma dilution method according to the American USP standard. Finally, the effect of the mentioned disinfectants on E.coli was investigated.Results19 samples were positive for the presence of E.coli and three disinfectants were in 5, 10, and 15 minutes after incubation, and performing the pour plate method caused a 100% lack of growth.Discussionthe efficiency of the three tested disinfectants was 100% effective according to the manufacturer's instructions.Keywords: Escherichia coli, Disinfectant, Savlon, Benzalkonium, Microten
-
زمینه
عفونت های مجاری ادراری یکی از معضلات درمانی و بهداشتی می باشد این نوع عفونت در زنان ، به دلیل آناتومی دستگاه ادراری و عدم رعایت بهداشت، بیشتر از مردان می باشد.هدف</strong>: هدف از مطالعه حاضر بررسی مقاومت دارویی پاتوژن های ادراری در زنان دچار عفونت ادراری در شهرستان ساوجبلاغ می باشد.
مواد و روش ها:
مطالعه حاضر از نوع توصیفی-مقطعی بوده که با بررسی 5100 نمونه ادراری از زنان دچار و مشکوک به عفونت ادراری جمع آوری شد و بعد از کشت دادن در محیط های عمومی و اختصاصی و تست های بیوشیمیایی، نوع میکروارگانیسم پاتوژن مشخص گردید؛ سپس با آنتی بیوگرام میزان مقاومت در سویه ها گزارش شد. برای رسم نمودار ها از نرم افزار مایکروسافت اکسل 2022 استفاده گردید.
نتایج:
از مجموع 5100 نمونه ادراری 302 نمونه مثبت تلقی گردید که بیشترین پاتوژن مولد عفونت را اشریشیا کلی (93/60درصد) و استرپتوکوکوس های گروه B (56/16درصد) گزارش گردید. گروه سنی 40-31 سال (55/17درصد) به عنوان گروه پرخطر شناخته شد و بیشترین فراوانی مقاومت دارویی در اشریشیا کلی به سفازولین (87/60درصد) و در استرپتوکوکوس های گروه B به تتراسایکلین (88درصد) مشاهده گردید.
نتیجه گیری:
روز به روز به میزان مقاومت دارویی میکروارگانیسم ها افزوده می شود و این مسیله تهدیدی علیه تمامی انسان ها و حیوانات می باشد. در این مطالعه بیشترین میزان مقاومت دارویی به سفازولین و تتراسایکلین در دو پاتوژن عامل اصلی ایجاد کننده عفونت ادراری ملاحظه گردید.
کلید واژگان: مقاومت دارویی, عفونت ادراری, زنان, اشریشیا کلی, استرپتوکوکوس های گروه B, ساوجبلاغBackgroundUrinary tract infections are one of the medical and health problems. This type of infection is more common in women than in men due to the anatomy of the urinary tract and lack of hygiene. The aim of the present study is to investigate the drug resistance of urinary pathogens in women with urinary tract infection in Savojbolagh city.
MethodsThe current study is descriptive-cross-sectional, which was collected by examining 5100 urine samples from women suffering from and suspected of urinary tract infection, and after culturing in general-pourpose media and selective media and biochemical tests, the type of pathogenic microorganism was determined; then, the level of resistance in the strains was reported with antibiogram. Microsoft Excel 2022 software was used to draw graphs.
ResultsOut of a total of 5100 urine samples, 302 samples were considered positive, and the most infectious pathogens were Escherichia coli (%60.93) and group B streptococcus (%16.56). The age group of 31-40 years (%17.55) was recognized as the high-risk group, and the highest frequency of drug resistance in Escherichia coli to cefazolin (%60.87) and in group B streptococci to tetracycline (%88) was observed.
ConclusionsThe amount of drug resistance of microorganisms is increasing day by day, and this issue is a threat to all humans and animals. In this study, the highest rate of drug resistance to cefazolin and tetracycline was observed in two pathogens, which are main causes of urinary tract infection.
Keywords: drug resistance, urinary tract infection, women, Escherichia coli, group B streptococci, Savojbolagh -
سابقه و هدف
سیستم CRISPR (تکرارهای پالیندرومیک کوتاه فاصله دار منظم خوشه ای) و پروتین های Cas، بخشی از سیستم ایمنی میکروارگانیسم ها می باشد. ژن های cas می توانند در کاهش مقاومت آنتی بیوتیکی باکتری ها مشارکت کنند. هدف از این مطالعه ارزیابی فراوانی ژن های cas سیستم CRISPR/Cas در سویه های اشریشیا کلی تولید کننده آنزیم های بتالاکتاماز وسیع الطیف (ESBLs)، جدا شده از بیماران مبتلا به عفونت های دستگاه ادراری می باشد.
مواد و روش هادر این مطالعه مقطعی، 437 نمونه کشت ادرار، از بیمارستان های چالوس جمع آوری شد. جداسازی سویه های اشریشیا کلی، براساس تست های بیوشیمیایی استاندارد و کیت تشخیص تجاری انتروباکتریاسه آ و همچنین حساسیت آنتی بیوتیکی با استفاده از روش انتشار دیسک (کربی بایر) انجام شدند. آزمون دیسک ترکیبی(CDT) نیز برای جدایه هایی که در آزمون قبلی حداقل در برابر یکی از سفالوسپورین های نسل سوم مقاوم بودند، انجام شد. شناسایی مولکولی ژن های cas1، cas2،cas3،cas7 و cas5 با استفاده از روش واکنش زنجیره ای پلی مراز انجام شد.
یافته ها:
از میان 437 نمونه کشت ادرار 106 نمونه (24/3 درصد) مبتلا به عفونت اشریشیا کلی بودند. بیشترین مقاومت آنتی بیوتیکی مرتبط با آمپی سیلین (99 درصد) بود. در میان جدایه های مقاوم، 30 جدایه (88/3 درصد) تولید کننده ESBL بودند. ژنcas1 بیشترین فراوانی (96/2 درصد) را داشت و دیگر ژن های cas تقریبا فراوانی یکسانی داشتند.
نتیجه گیرینتایج مطالعه حاضر نشان داد که درصد قابل توجهی از جدایه های اشریشیا کلی دارای فنوتیپ ESBL بودند که می تواند دلیل بر حضور ژن های بتالاکتاماز وسیع الطیف در این نمونه ها باشد. همچنین، نشان داده شد که رابطه ای بین حضور فنوتیپESBL و توزیع ژن های cas وجود ندارد.
کلید واژگان: اشریشیا کلی, عفونت دستگاه ادراری, سیستمCRISPR, Cas, ESBLBackground & ObjectivesCRISPR system (clustered regularly interspaced short palindromic repeats) and Cas portions is a part of the immune system in microorganisms. The cas genes could be involved in reducing antibiotic resistance in bacteria. The aim of the study was to investigate the frequency of cas genes of the CRISPR/Cas system in Extended Spectrum Beta-Lactamase (ESBL) producing Escherichia coli isolated from urine culture of patients with urinary tract infection.
Materials & MethodsIn this cross-sectional study, 437 positive urine culture samples were collected from Chalus hospitals. Escherichia coli strains were isolated based on standard biochemical tests and Enterobacteriaceae commercial diagnostic kit, as well as antibiotic sensitivity using disc diffusion method (Kerby Baer). Combined disk test was conducted for isolates that were resistant to at least one of the third-generation cephalosporins in the foregoing antibiotic susceptibility test. Molecular identification of cas1,cas2,cas3,cas7 and cas5 genes was performed using the PCR method.
ResultsOut of 437 urin culture samples, 106 samples (24.3%) had E.coli infection. The highest antibiotic resistance was associated with ampicillin (99%). Among the resistant isolates, thirty isolates (88.3%) were ESBL producing. cas1 gene had the highest frequency (96.2%) and other cas genes had almost the same frequency.
ConclusionThe results of the present study showed that a significant percentage of E. coli isolates had ESBL phenotype, which may be due to the presence of broad-spectrum beta-lactamase genes in these samples. Besides, it was shown that there is no relationship between the presence of ESBL phenotype and the distribution of cas genes.
Keywords: Escherichia coli, Urinary tract infections, CRISPR, Cas system, ESBL -
مقدمه
سرطان دهانه رحم با حدود 528000 مورد بیمار و 266000 مرگ در سال، یکی از سرطان های رایج در بین زنان جهان به شمار می رود و عفونت پایدار با ویروس پاپیلومای انسانی HPV عامل اصلی آن است. واکسن های مبتنی بر پپتید مشتق شده از دو پروتیین انکوژن E6 و E7 به علت ایمنی و پایداری بالا و سهولت در تولید، پتانسیل بالایی برای تولید واکسن درمانی HPV نشان داده اند. در این مطالعه اثر سویه های مختلف اشرشیاکلی در کنار پارامترهای محیطی ازجمله دما، زمان القایی و غلظت القاکننده بر میزان بیان پروتیین پلی اپی توپ نوترکیبHPV16-E6 بررسی می شود.
مواد و روشها:
در این مطالعه ژن بهینه شده پروتیین نوترکیب E6، در درون وکتور دارای پروموتور T7 کلون شد. وکتور نوترکیب به سویه های اشرشیاکلی BL21(DE3)، BL21(DE3)-AI، Rosetta، C41(DE3) و BL21(DE3)-pLysS ترانسفورم شد و توانایی این سویه ها برای بیان پروتیین نوترکیب مدنظر در شرایط مختلف محیطی مقایسه شد. بیان پروتیین نوترکیب E6 در سویه های ذکرشده، در دو دمای 25 و 37 درجه سانتی گراد و غلظت های 0/1 و 1/0 میلی مولار از IPTG و زمان های مختلف انکوباسیون بررسی شدند.
نتایجپس از انجام بهینه سازی بیان، شرایط بهینه برای بیان پروتیین نوترکیب E6 به دست آمد. بیشترین میزان بیان در سویه اشرشیاکلی BL21(DE3)-AI و در شرایط Optical Density (OD)=0.9، غلظت 1/0 میلی مولار IPTG و مدت زمان القای 16 ساعت در دمای 25 درجه سانتی گراد به دست آمد.
بحث و نتیجه گیری:
نتایج به دست آمده از این مطالعه می توانند برای تولید پروتیین E6، به عنوان کاندید واکسن درمانی در درمان سرطان های مرتبط با HPV استفاده شوند.
کلید واژگان: اشرشیا کلی, پروتئین نوترکیب, پروتئین HPV16-E6, بهینه سازی بیانIntroductionCervical cancer is the leading cause of morbidity and cancer mortality in women throughout the world and persistent infection with human papillomavirus (HPV) is the main etiology for the development of this cancer. Peptide vaccines derived from E6 and E7 oncogenes are promising candidates for HPV vaccine production due to their safety, high stability, and ease of production. In the current study, expression strains such as Escherichia coli BL21 (DE3), BL21 (DE3)-AI, Rosetta, C41 (DE3), and BL21 (DE3)-pLysS were applied for poly epitopic E6 expression and the effects of temperature, induction time, and inducer concentration on the expression level of recombinant HPV16-E6 polypeptide protein were examined in the mentioned strains.
Materials and MethodsIn the present study, the optimized gene of E6 recombinant protein was cloned into pET28a vector under the control of T7 promoter and the resulting plasmid was successfully transformed into Escherichia coli strains BL21 (DE3), BL21 (DE3)-AI, Rosetta, C41 (DE3), and BL21 (DE3)-pLysS. Then, the ability of these strains to express the desired recombinant protein in different conditions was compared. Two temperatures of 25 ° C and 37 ° C, IPTG concentrations between 0.1 and 1.0 mM, and different incubation times were selected to examine the expression level of recombinant E6 protein in these strains.
ResultsThe highest level of expression was obtained in Escherichia coli BL21 (DE3) -AI strain inducing at Optical Density (OD) of 0.9, 0.1 mM IPTG, and 16 hours induction at 25 °C.
Discussion and ConclusionThe results of this study can be used to produce E6 protein as a vaccine candidate in the treatment of HPV-related cancers.
Keywords: Escherichia coli, Recombinant protein, HPV16-E6 protein, Expression optimization -
سابقه و هدف
سویه های خارج روده ای اشریشیاکلی بیماریزای پرندگان (APEC) با تحمیل ضرر و زیان های اقتصادی گسترده به لحاظ درصد تلفات بالا در گله های گوشتی یکی از تهدیدهای جدی صنعت پرورش طیور جهان و ایران می باشد. بررسی های مولکولی و تعیین فراوانی عوامل حدت سویه های APEC اطلاعات بسیار سودمندی به منظور طراحی و ساخت واکسن بر علیه بیماری های ناشی از این سویه ها ارایه می دهد. هدف از این مطالعه شناسایی فاکتورهای حدت iss و fimC در جدایه های اشریشیاکلی از طیور مبتلا به کلی باسیلوز در شهرستان ایلام بود.
مواد و روش هااین مطالعه به صورت توصیفی - مقطعی بر روی یکصد و پنجاه جدایه APEC که از موارد کلی باسیلوز طیور جمع آوری شده بود، در سال 1399 انجام گردید. ابتدا جدایه ها با استفاده از محیط های کشت انتخابی, افتراقی و با انجام آزمایش های بیوشیمیایی استاندارد، شناسایی و تعیین هویت گردیدند. جهت جستجو و شناسایی ژن های حدت iss و fimC در میان جدایه های اشریشیاکلی از آزمون PCR با بهره گیری از آغازگرهای اختصاصی استفاده گردید.
یافته هانتایج آزمون PCR بر روی یکصد و پنجاه جدایه APEC اخذ شده از موارد کلی باسیلوز با استفاده از آغازگرهای اختصاصی جهت ردیابی و شناسایی ژن های حدت کدکننده ی فیمبریه تیپ یک fimC و ژن افزایش پایداری در سرم iss نشان داد که 139جدایه (66/92 درصد) واجد ژن fimC و تعداد 126 جدایه (84 درصد) دارای ژن افزایش پایداری در سرم iss بودند.
نتیجه گیرییافته های این بررسی نشان از حضور بالای ژن های حدت iss و fimC در جدایه های اشریشیاکلی جدا شده از موارد کلی باسیلوز طیور در منطقه ی مورد مطالعه می باشد. ردیابی این ژن ها می تواند به عنوان مارکرهای تشخیصی اشریشیاکلی بیماریزای طیور مورد استفاده قرار گیرد.
کلید واژگان: اشریشیاکلی, کلی باسیلوز, فاکتورهای حدت, fimC, iss, .Iau ScienceAim and BackgroundExtra-intestinal strains of the pathogenic Escherichia coli APEC are one of the most serious threats to the poultry industry in the world and in Iran, with extensive economic losses due to the high mortality rate in broiler herds. Molecular studies and determination of the frequency of virulence factors of APEC strains provide very useful information for designing and manufacturing vaccines against diseases caused by these strains. The aim of this study was to molecular detection of virulence genes iss and fimC in Escherichia coli Isolates from Poultry with Colibacillosis in Ilam City.
Material and methodsThis descriptive cross-sectional study was performed on one hundred and fifty APEC isolates collected from general cases of poultry Colibacillosis in the year 1399. First, isolates were identified using selective and differential culture media and standard biochemical tests. PCR test was used to determine the presence of virulence genes iss and fimC among Escherichia coli isolates using a specific primer.
ResultsResults of PCR test on one hundred and fifty APEC isolates obtained from Colibacillosis cases using specific primers to detect the genes encoding fimbriae type 1 fimC and the gene Increased serum survival iss showed that 139 isolates (92.66%) had fimC gene. Also, the results showed that among the total isolates, 126 isolates (84%) have the increased serum survival iss gene.
ConclusionThe results of this study indicate the high presence of virulence genes iss and fimC in Escherichia coli isolates isolated from avian Colibacillosis in the study area. Detection of these genes can be used as diagnostic markers of pathogenic Escherichia coli in poultry.
Keywords: Colibacillosis, Escherichia coli, fimC, iss, Virulence Factors, Iau Science -
اشرشیاکلی یک باکتری است که سبب بیماری های متعدد در انسان و دام میگردد. این باکتری به دلیل افزایش مقاومت به آنتی بیوتیک ها، مشکلات عدیده ای در صنعت دامداری و پزشکی ایجاد کرده است. هدف از این مطالعه تعیین مقاومت به فلوروکینولون ها، شناسایی ژن های پلاسمیدی مقاومت به کینولون (PMQR) و تعیین قدرت تشکیل بیوفیلم توسط سویه های اشرشیاکلی جدا شده از نمونه های انسانی و گاوی در همدان می باشد. در این مطالعه توصیفی تحقیقی، تعداد 40 جدایه اشریشیاکلی (20 جدایه انسانی، 20 جدایه گاوی) مورد بررسی قرار گرفت. ابتدا مقاومت جدایه ها به سیپروفلوکساسین و لوفلوکساسین با روش میکرودایلوشن براث سنجیده شد و سپس شناسایی ژن های مقاومت به فلوروکینولون ها (qnrA، qnrB، qnrC، qnrD، qnrS و acc) با روش PCR انجام گرفت. در ادامه توانایی جدایه های اشرشیاکلی در تولید بیوفیلم با روش میکر تیتر پلیت و میکروسکوپ الکترونی سنجیده شد و نتایج با استفاده از آزمون مربع کای با نرم افزار SPSS (ورژن 19) مورد آنالیز قرار گرفت نتایج میکرو دایلوشن براث نشان داد که از 40 جدایه اشریشیاکلی، 26 جدایه (65 درصد) به سیپروفلوکساسین و 23 جدایه (5/57 درصد) به لوفلوکساسین مقاوم بود. در بررسی فراوانی ژن های PMQR با روش PCR، فراوانی ژن های qnrA، qnrB، qnrC، qnrD، qnrS و aac به ترتیب 45، 5/47، 5/67، 5/27، 60 و 55 درصد گزارش شد. همچنین نتایج میکروتیتر پلیت نشان داد که40 درصد ایزوله ها توانایی تشکیل بیوفیلم قوی را دارند و تنها 4 درصد بیوفیلم تشکیل ندادند. نتایج مطالعه حاضر نشان داد که مکانیسم اصلی مقاومت این جدایه ها به فلوروکینولون ها مربوط به ژن های PMQR می باشد و احتمالا مصرف بی رویه فلوروکینولون ها در عفونت های انسانی، منجر به گسترش مقاومت به این داروها در جدایه های انسانی نسبت به جدایه های گاوی شده است. همچنین تشکیل بیوفیلم در ایجاد مقاومت به فلوروکینولون ها نقش بسزایی داشت.کلید واژگان: اشریشیاکلی, بیوفیلم, ژن های PMQR, فلوروکینولونEscherichiacoli is an opportunistic pathogenic bacterium that causes numerous diseases in humans and animals.Because of increased resistance to antibiotics, this bacterium has raised many concerns in the livestock industry as well as in medicine. The aim of this study was to determine the resistance to fluoroquinolones, to identify plasmid-mediated quinolone resistance (PMQR) genes and to determine the biofilm formation ability of E. coli strains isolated from human and bovine samples in Hamadan.In this descriptive study, 40 isolates of E. coli(20 human isolates, 20 bovine isolates) were studied. First, the resistance of the isolates to ciprofloxacin and levofloxacin was measured by microdilution broth method, and then the identification of fluoroquinolone resistance genes (qnrA, qnrB, qnrC, qnrD, qnrS and acc) was performed by PCR method. In the following, the ability of E. coli isolates to produce biofilm was evaluated by microtiter plate method and the results were analyzed by chi-square test using SPSS software (version 19). Microdilution results showed of 40 E.coli isolates, 26 (65%) were resistant to ciprofloxacin and 23 (57.5%) were found to be resistant to levofloxacin.In PMQR genes frequency analysis by PCR,the qnrA, qnrB, qnrC,qnrD, qnrS and aac genes were detected in 45%, 47.5%, 67.5%, 27.5%, 60% and 55% of the isolates, respectively. Also microtiter plate test results showed that 40% of the isolates were capable of forming strong biofilm and only 4% did not form biofilm.The results of the present study showed that the main mechanism of resistance to fluoroquinolones is related to PMQR genes and possibly excessive use of fluoroquinolones in human infections leads to the development of resistance to these drugs.Biofilm formation has also been shown to be effective in creating fluoroquinolone resistance.Keywords: escherichia coli, Fluoroquinolone, Biofilm, PMQR genes
-
با توجه به مصرف گسترده مواد ضد میکروبی در دامپزشکی و افزایش تولیدات دامی به نظر می رسد خطر گسترش مقاومت آنتی بیوتیکی در جوامع انسانی بیشتر در ارتباط با حیوانات و حوزه دامپزشکی باشد. در این مطالعه مقاومت آنتی بیوتیکی و فراوانی ژن های حدت fimH، papC و sfa-foc در اشریشیا کلی های جدا شده از مدفوع اسب های کاسپین در گیلان مورد مطالعه قرار گرفت. در این مطالعه مقطعی، جدایه های اشریشیا کلی از مدفوع 157 اسب کاسپین به ظاهر سالم به روش کشت و انجام تست های بیوشیمیایی جداسازی شد. الگوی مقاومت نسبت 17 آنتی بیوتیک مورد مطالعه، به روش انتشار از دیسک و فراوانی ژن های حدت به روش واکنش زنجیره ای پلیمراز در جدایه ها بررسی شد. در بررسی فنوتیپی مقاومت آنتی بیوتیکی جدایه ها، بیشترین میزان مقاومت به آنتی بیوتیک های استرپتومایسین و سولفامتوکسازول-تریمتوپریم بود. ایمیپنم و جنتامایسین موثرترین آنتی بیوتیک ها بودند و 59/51 درصد جدایه ها الگوی مقاومت چندگانه آنتی بیوتیکی نشان دادند. فراوانی ژن های حدت fimH، papC و sfa-foc در جدایه ها به ترتیب 91، 6/56 و 3/33 درصد بود. فراوانی هر سه ژن مورد مطالعه در جدایه های MDR به طور معنی داری بیشتر بود (05/0<p). نتایج مطالعه حاضر بیانگر آن است که اشریشیا کلی های جدا شده از مدفوع اسب های گیلان پتانسیل انتقال مقاومت های آنتی بیوتیکی از طریق محیط و به مخاطره انداختن بهداشت عمومی را داراست.
کلید واژگان: مقاومت آنتی بیوتیکی, اشریشیا کلی, ژن های حدتDue to the widespread use of antimicrobials in veterinary medicine and the increase in livestock production, it seems that the risk of spreading antibiotic resistance in human societies is more related to animals and the veterinary field. In this study, antibiotic resistance and frequency of fimH, papC and sfa-foc virulence genes among Escherichia coli isolated from Caspian horse feces in Guilan were studied. In this cross- sectional study, E. coli isolates were isolated from the feces of 157 apparently healthy Caspian horses by culture method and biochemical tests. Resistance patterns against 17 different antibiotics were determined by disk diffusion method and frequency of virulence genes were assessed by PCR in isolates. In phenotypic assay of antibiotic resistance, the isolates showed the most resistance to streptomycin and sulfamethoxazole-trimetoprim antibiotics. Imipenem and gentamicin were the most effective antibiotics and 51.59 percent of isolates showed multi drug resistance pattern. The frequency of fimH, papC and sfa-foc virulence genes in isolates were 91%, 56.6% and 33.3%, respectively. Frequency of all of three investigated genes were significantly higher in MDR isolates (P< 0.05). The results of the present study indicate that Escherichia coli isolated from the feces of horses in Guilan has the potential to transmit antibiotic resistance and endanger public health.
Keywords: Antibiotic resistance, Escherichia coli, Virulence genes -
Cholera toxin B subunit (CTB) is a non-toxic and immunostimulatory component of Vibrio cholera toxin. CTB is one of the most studied protein compounds for adjuvant design. This study aimed to produce and purify recombinant CTB (rCTB) by pET-22a plasmid in Escherichia coli BL21(DE) strain, focusing on cost-effectiveness and ease of use. The target gene was identified in the genome of Vibrio cholerae biotype El Tor through the NCBI database, and its specific primers were designed. The gene fragment was amplified by PCR and cloned into pET-22a plasmid by NcoI and SacI restriction enzymes and transformed into E. coli. Transformed bacteria were inoculated into a 2×YT medium. Stimulation of recombinant protein production was performed by adding IPTG with a final concentration of 0.4 mM. Finally, recombinant protein was purified by a Ni-IDA column. The concentration of recombinant protein was determined by GM1-ELISA and Bradford tests. The Western blotting technique verified recombinant CTB, So results showed the expected bands at a molecular weight of about 12.76 kDa (denatured) and 63 kDa (non-denatured). GM1-ELISA and Bradford tests showed the final protein concentrations of 11 and 9.57 mg/L, respectively. GM1-ELISA confirmed the biological activity of rCTB in the presence of GM1 ganglioside receptor. Recombinant CTB produced by the method proposed in this research has high purity and appropriate concentration and can be used in immunological studies, especially adjuvant design.Keywords: Cholera toxin B subunit, Escherichia coli, Molecular cloning, Vibrio cholerae
-
سابقه و هدف
متابولیسم بالا در حضور اکسیژن با سرعت رشد سریع در طیف وسیعی از ارگانیسمها از جمله باکتریها، مخمرها و یا سلولهای سرطانی رخ میدهد. توانایی رشد با راندمان بالا نقش مهمی در بیوتکنولوژی به ویژه در طی فرآیند تولید پروتیینها (به طور ترجیحی نوترکیب) و یا ترکیب های متابولیک مانند اسیدهای آلی و متابلیت های ثانویه ایفا میکند. افزایش راندمان رشد باکتری ها به ویژه باکتری اشرشیاکلی که موتور فعالیت های تحقیقاتی و صنعتی است هدف آرمانی در بیوتکنولوژی میکربی است. در این تحقیق بر آن شدیم تا با بررسی مسیرهای متابولیکی E. coli راهکاری برای کاهش میزان CO2 تولیدی و در نتیجه افزایش راندمان تولید توده سلولی از مواد آلی در فرآیند رشد و تکثیر پیدا کنیم.
مواد و روش هامسیرهای متابولیکی مستند شده در وبگاه KEGG با دیدگاه کاهش راندمان تولید CO2 از اسید فرمیک بررسی شد. دو سویه باکتری ناک اوت شده با منشاء K12 از بانک میکروبی Keio تهیه شد. سپس، سویه های منتخب در محیط کمپلکس (LB) و ساده (M9+Glycerol) کشت داده شدند. میزان تولید توده سلولی در تیمارهای مختلف با اندازه گیری جذب نوری در 600 نانومتر با یکدیگر و هم چنین با سویه استاندار BL21 مقایسه شدند.
نتایجدر محیط پیچیده LB، موتان باکتری های اشرشیا (W3866 و W4040.) نسبت به BL21 از رشد بیش تری (در حدود 5 برابر درساعات 8 و 10 ساعته و 3 برابری در زمان 12 ساعته نسبت به نمونه های دارای ژن فورمات دهیدروژناز) برخوردارند. البته این تفاوت در محیط ساده M9 بارزتر بود به طوری که رشد بیش از 6 برابری در زمان 24ساعت از انکوباسیون در نمونه های موتان فاقد ژن فورمات دهیدروژناز نسبت به سویه مادر BL21 مشاهده نمودیم.
بحث: آزمایش ها با پیش بینی های متابولیکی به طور کامل مطابقت داشت و رشد باکتری های موتان از باکتری BL21 بیش تر بود. نکته جالب توجه رشد بیش تر موتان ها در محیط ساده حاوی گلیسرول بود که نشان داد گلیسرول منبع به طور کامل مناسبی برای رشد باکتری اشرشیاکلی است. این نتایج دلایل عدم تطابق پیش بینی های مدل های متابولیکی قبلی که گلیسرول را یک منبع کربن مناسب برای رشد E. coli اعلام کرده بود، ولی در عمل به آن دست نمی یافت، را توضیح می دهد.نتیجه گیریدر شرایط فیزیولوژیکی نرمال E. coli قادر به رشد بالایی در محیط گلیسرول نیست، حذف ژن فورمات دهیدروژناز در آن سبب تغییرهای اساسی در روند متابولیسمی و افزایش چند برابری رشد در مقایسه با سویه بیانی BL21 گردید که بیانگر نقش این آنزیم در جلوگیری از افزایش راندمان رشد E. coli در حضور گلیسرول است. به علاوه از سویه حاصل می توان در بیان پروتیین های نوترکیب با راندمان بالاتر استفاده نمود.
کلید واژگان: اشرشیاکلی, مسیر متابولیکی, فورمات دهیدروژناز, افزایش ضریب رشد, Iau ScienceAim and BackgroundHigh metabolism occurs in the presence of oxygen with rapid growth rate in a wide range of organisms including bacteria, yeasts or cancer cells. The ability to grow at high yields plays an important role in biotechnology, especially during the production of proteins (preferably recombinant) or metabolic compounds such as organic acids and secondary metabolites. Increasing the growth efficiency of bacteria, especially Escherichia coli, which is the engine of research and industrial activities, is a noble goal in microbial biotechnology. In this study, we sought to find a solution to reduce the amount of CO2 produced and thus increase the production efficiency of cell mass from organic matter in the process of growth and proliferation by examining the metabolic pathways of E. coli.
Materials and MethodsMetabolic pathways documented on the KEGG site were examined with a view to reducing the CO2 production efficiency of formic acid. Two strains of knockout bacteria of K12 origin were obtained from Keio microbial bank. Then, selected strains were cultured in complex (LB) and simple (M9 + Glycerol) media. Cell mass production in different treatments were compared with the standard BL21 strain based on optical absorption at 600 nm.
ResultsIn the LB complex medium, Escherichia coli mutants (W3866 and W4040) grew faster than BL21 (approximately 5-fold at 8 and 10 h and 3 times at 12 h compared to samples with the dehydrogenase formate gene). However, this difference was more pronounced in the simple M9 medium, as we observed more than 6-fold growth in 24 hours of incubation in mutant samples lacking the FDH gene compared to the BL21 maternal strain.
DiscussionThe experiments were completely in line with metabolic predictions and the growth of mutant bacteria was higher than that of BL21. Interestingly, most mutants grew in a simple medium containing glycerol, which showed that glycerol is a very good source for the growth of Escherichia coli bacteria. These results explain the inconsistency of predictions of previous metabolic models that declared glycerol a suitable carbon source for the growth of E. coli, but did not achieve it in practice.
ConclusionUnder normal physiological conditions, E. coli is not able to grow high in glycerol medium. Deletion of formate dehydrogenase gene caused fundamental changes in metabolic process and increased growth rate compared to BL21 strain, which indicates the inhibitory role of this enzyme in increased growth efficiency of E. coli in the presence of glycerol. In addition, the resulting strain can be used to express recombinant proteins with higher efficiency
Keywords: Escherichia coli, Metabolic pathways, Formate dehydrogenase, Increased growth rate, IauScience -
زمینه و هدف
مقاومت آنتی بیوتیکی علاوه بر پیچیده سازی درمان بیماری های عفونی دام و طیور، از نظر بهداشت عمومی نیز نگرانی بزرگی محسوب می شود. هدف از مطالعه اخیر تعیین فراوانی ژن های کد کننده مقاومت به کینولون ها و سولفانامیدها در اشریشیاکلی جدا شده از ضایعات پری کاردیت و پری هپاتیت در جوجه های گوشتی است تا پیش زمینه مناسبی برای درمان با این دسته از داروها در ضایعات ذکر شده فراهم شود.
روش کاردر این مطالعه به منظور ردیابی ژن های مقاومت علیه فلوروکینولون ها و سولفانامیدها، 50 سویه باکتری از مواد پریکاردیت و پری هپاتیت جوجه های گوشتی جداسازی شد و با تست های میکروبی و بیوشیمیایی، کلنی های اشریشیاکلی تایید شد. سپس با روش معمول آنتی بیوگرام، مقاومت سویه ها نسبت به آنتی بیوتیک های تجاری انروفلوکساسین و سولفانامید+تری متوپریم بررسی شد. علاوه بر آن، با روش جوشاندن، ژنوم باکتری استخراج شد و با پرایمر های اختصاصی به تکثیر ژن های qnrA و sul1 جهت ارزیابی مقاومت آنتی بیوتیکی علیه فلوروکینولون ها و سولفانامیدها پرداخته گردید.
یافته هادر این بررسی، 54 درصد سویه های مقاوم علیه انروفلوکساسین واجد ژن qnrA و 48 درصد سویه های مقاوم علیه سولفانامیدها به علاوه تری متوپریم حاوی ژن sul1 بودند. در این بررسی سویه های مقاوم فاقد ژن های مورد بررسی نیز یافت شد که نشان از اهمیت سایر ژن های مقاومت در بروز مقاومت علیه سولفانامید ها و فلوروکینولون ها است.
نتیجه گیریارزیابی مقاومت آنتی بیوتیکی علیه انروفلوکساسین و سولفانامیدها به کمک یک ژن امکان پذیر نیست و برای تعیین دقیق مقاومت آنتی بیوتیکی تست های فنوتیپی معمول از کارایی بیشتری نسبت به ردیابی یک ژن خاص برخوردار است.
کلید واژگان: اشریشیاکلی, جوجه گوشتی, ژن های مقاومتInroduction & ObjectiveAntibiotic resistance can complicate the treatment of infectious diseases of livestock and poultry. The aim of this study was to determine the frequency of genes encoding resistance to quinolones and sulfonamides in Escherichia coli (E. coli) isolated from pericarditis and periphepatitis lesions in broilers to provide a suitable background for treatment with these drugs in these lesions.
Material and MethodsIn this study, for detecting of resistance genes to fluoroquinolones and suvanamides, 50 bacterial strains were isolated from broiler chickens with pericarditis and periphepatitis and E. coli colonies were confirmed by microbial and biochemical tests. Then, the resistance of the strains to the commercial antibiotics (Enrofloxacin and sulfonamide + trimethoprim) was evaluated by the conventional antibiogram method. In addition, the bacterial genome was extracted by boiling method and the qnrA and sul1 genes were amplified with specific primers to evaluate antibiotic resistance against fluoroquinolones and sulfonamides.
ResultsIn this study, 54% of enrofloxacin-resistant strains possed qnrA gene and 48% of sulfonamide-resistant strains plus trimethoprim contained sul1 gene. In this study, resistant strains without studied resistance genes were also found, which indicates the importance of other resistance genes in the development of resistance against sulfonamides and fluoroquinolones.
ConclusionEvaluation of antibiotic resistance against enrofloxacin and sulfonamides is not possible with the help of one gene and to accurately determine antibiotic resistance, routine phenotypic tests are more effective than detecting a specific gene.
Keywords: Escherichia coli, Antibiotic resistance, Chiken -
زمینه و هدف
از آنتی بیوتیک ها به طور گسترده ای در سراسر جهان استفاده می شود. بااین حال، به دلیل ظهور مقاومت آنتی بیوتیکی در طیف وسیعی از میکروارگانیسم ها، استفاده از آن ها در سطح جهانی دچار شکست بزرگی شده است. استفاده از پروبیوتیک ها به عنوان درمان مکمل و جایگزین برای آنتی بیوتیک ها مطرح شده اند. هدف از پژوهش حاضر بررسی اثرات پروبیوتیک های جداشده از مرغ های محلی بر بیان ژن های luxS, ctxM در اشریشیاکلی مقاوم به درمان بود.
روش کار300 نمونه مدفوعی در فاصله اردیبهشت تا مهرماه سال 1399 از بیماران مراجعه کننده به بیمارستان امام خمینی تهران اخذ شد و با محیط های کشت اختصاصی و آزمایش های بیوشیمیایی نمونه های اشریشیاکلی جداسازی شد و سپس توسط PCR با پرایمرهای اختصاصی وجود ژن های luxS و ctxM مورد شناسایی قرار گرفت. جهت استخراج سویه های بومی باسیلوس کوآگولانس و باسیلوس سوبتلیس محتویات روده تعداد 9 قطعه جوجه محلی که هیچ آنتی بیوتیکی مصرف نکرده بودند کشت، جداسازی و توسط روش های بیوشیمیایی و PCR شناسایی شد. سویه های تجاری باسیلوس سوبتلیس و باسیلوس کوآگولانس برای مقایسه اثرات با باکتری های بومی خریداری شده و در ادامه این سویه ها در کشت هم زمان با سویه های اشریشیاکلی مقاوم به درمان حاوی ژن های ctxm و luxs قرار گرفتند. جهت بررسی تاثیر این پروبیوتیک ها بر بیان ژن ها از ریل تایم PCR استفاده شد.
یافته هااز 300 نمونه مدفوعی گرفته شده 40 جدایه(5/7 درصد) اشریشیاکلی به دست آمد؛ که 13 نفر از نمونه ها(5/32 درصد) مربوط به بیماران سرپایی و 27 نفر را(5/67 درصد) بیماران بستری تشکیل می دادند. همه ایزوله ها از زنان و مردان با رنج سنی بین 21 تا 62 سال جداشده بودند. 4 سویه اشریشیاکلی جداشده از بیماران حامل ژن های ctxM, luxS, بودند. جداسازی باسیلوس کوآگولانس و باسیلوس سوبتلیس از نمونه ها با آزمایش های بیوشیمیایی و مولکولی تایید شد. سویه تجاری باسیلوس کوآگولانس بیان ژن های، ctxM, luxS را به ترتیب به میزان 3/3 ، 2/7 برابر کاهش و سویه بومی بیان این ژن ها را به ترتیب 6/3 ، 2/2 برابر نسبت به گروه کنترل در باکتری اشریشیاکلی کاهش داد. نتایج آنالیز آماری نشان داد که بین حضور پروبیوتیک های بومی و تجاری موجود درکشت و کاهش بیان ژن های ctxM و luxS ارتباط معنی داری وجود دارد.
نتیجه گیریمصرف مکمل باسیلوس کوآگولانس و باسیلوس سوبتلیس با کم کردن بیان ژن های مقاومت باعث افزایش تاثیر آنتی بیوتیک ها بر اشریشیاکلی مقاوم به درمان می شوند.
کلید واژگان: پروبیوتیک, اشریشیاکلی, باسیلوس کوآگولانس, باسیلوس سوبتلیس ctxm, luxsInroduction & ObjectiveThe aim of this study was to investigate the effects of probiotics isolated from local chickens on the expression of luxS, ctxM genes in resistant Escherichia coli.
Material and MethodsBiochemical tests of Escherichia coli samples were isolated and then the presence of luxS and ctxM genes was detected by PCR with specific primers. In order to extract the native strains of Bacillus coagulans and Bacillus subtilis, the intestinal contents of 9 local chickens were cultured, isolated and identified by biochemical and PCR methods.
ResultsCommercial strains of Bacillus subtilis and Bacillus coagulans were isolated along with isolates of resistant Escherichia coli strains containing ctxm and luxs genes. Real-time PCR was used to evaluate gene expression. From 300 fecal samples taken, 40 isolates(7.5%) of Escherichia coli were obtained; Four Escherichia coli strains were isolated from patients carrying ctxM and luxS genes. Isolates of Bacillus coagulans and Bacillus subtilis were confirmed by molecular experiments. Decreased by 2.2 times, equal to the control group in Escherichia coli.
ConclusionThe results of statistical analysis showed that there was a significant relationship between the presence of native and commercial probiotics in culture and reduced expression of ctxM and luxS genes.
Keywords: probiotics, Escherichia coli, Bacillus coagulans, Bacillus subtilis, Ctxm, Luxs
- نتایج بر اساس تاریخ انتشار مرتب شدهاند.
- کلیدواژه مورد نظر شما تنها در فیلد کلیدواژگان مقالات جستجو شدهاست. به منظور حذف نتایج غیر مرتبط، جستجو تنها در مقالات مجلاتی انجام شده که با مجله ماخذ هم موضوع هستند.
- در صورتی که میخواهید جستجو را در همه موضوعات و با شرایط دیگر تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مجلات مراجعه کنید.