به جمع مشترکان مگیران بپیوندید!

تنها با پرداخت 70 هزارتومان حق اشتراک سالانه به متن مقالات دسترسی داشته باشید و 100 مقاله را بدون هزینه دیگری دریافت کنید.

برای پرداخت حق اشتراک اگر عضو هستید وارد شوید در غیر این صورت حساب کاربری جدید ایجاد کنید

عضویت

جستجوی مقالات مرتبط با کلیدواژه « تجزیه فیلوژنتیکی » در نشریات گروه « بیوتکنولوژی و ژنتیک گیاهی »

تکرار جستجوی کلیدواژه «تجزیه فیلوژنتیکی» در نشریات گروه «کشاورزی»
  • ناهید مسعودی، احمد روحی بخش*، محمدحسن عصاره، مسعود نادرپور، داود کولی وند
    بیان ژن ویروس ها در باکتری برای مطالعه پروتئین ویروس ها و تولید آنتی بادی اختصاصی مورد استفاده قرار می گیرد. در این پژوهش، نمونه های سیب زمینی از هشت استان ایران جمع آوری شده و ردیابی ویروس Potato virus S، به عنوان یکی از مخرب ترین ویروس های سیب زمینی، بوسیله داس-الیزا و آرتی-پی سی آر انجام گرفت. تعیین گروه غالب با توجه به توالی ژن پوشش پروتئینی و پس از تجزیه فیلوژنی انجام شد. ژن کامل CP تکثیر و همسانه سازی شده و مورد توالی یابی قرار گرفت، سپس از پلاسمید pJET1.2/blunt برش داده شده و به پلاسمید بیان pET-28a (+) متصل شد و سازه (pET-28a:PVS:CP) به باکتری Escherichia coli سویه BL21 منتقل شد. بهینه سازی بیان ژن با القا بوسیله IPTG در غلظت های 5/0، 1 و 2 mM به مدت 3، 4 و 6 ساعت انجام گرفت و توسط SDS-PAGE و وسترن بلات تایید شد. بر اساس توالی نوکلئوتیدی، جدایه های ایرانی PVS به سه گروه تقسیم شدند که یک گروه با 22 عضو به عنوان گروه غالب شناخته شد. بیان پروتئین نوترکیب با وزن 34 کیلودالتون توسط وسترن تایید شد. القاء با غلظت 1 میلی مولار IPTG و به مدت 4 ساعت بهترین بیان را نشان داد. این نخستین گزارش بیان ژن پوشش پروتئینی ویروس PVS است که برای تهیه آنتی بادی این ویروس اهمیت دارد.
    کلید واژگان: ویروس اس سیب زمینی, بیان ژن, پروتئین نوترکیب, تجزیه فیلوژنتیکی, PVS}
    Nahid Masoudi, Ahmad Rouhibakhsh*, Mohammad Hassan Asareh, Masoud Naderpour, Davoud Koolivand
    Gene expression in bacteria have already been used to study the protein of viruses and to produce specific antibodies. In this research, potato samples were collected from eight provinces of Iran and were tested for Potato virus S, as one of the most destructive viruses of potato fields, by DAS-ELISA and RT-PCR. Dominant isolate of PVS was selected according to coat protein (CP) gene sequences following phylogenetic analysis. Full length CP gene was amplified, cloned and sequenced, then was digested from pJET1.2/blunt vector, ligated into the expression vector pET-28a and the construct (pET-28a:PVS:CP) was transformed into Escherichia coli BL21 strain. Gene expression was optimized by induction with 0.5, 1 and 2 mM final concentrations of IPTG for 3, 4 and 6 h and was verified by SDS-PAGE and Western blotting. Based on the nucleotide analysis, the Iranian isolates of PVS were divided into three groups that one group with 22 members known as the dominant group. The expression of recombinant CP of about 34 kDa was proved by western blotting. Induction by 1 mM IPTG for 4 h proved to be the most efficient method of expression. This is the first report of the expression of PVS CP gene, which is important for the preparation of anti-PVS antibody.
    Keywords: Potato virus S, Gene expression, Recombinant protein, Phylogenetic analysis, PVS}
  • معصومه فلاح زیارانی، مسعود توحیدفر، زهرا امینی فر
    مسیر بیوسنتز اسید چرب یکی از مسیرهای مهم در بدن اکثر موجودات (پروکاریوت ها و یوکاریوت ها) است که آنزیم Acyl carrier protein (ACP) نقش مهمی در مسیر بیوسنتز اسید چرب دارد. هدف از این مطالعه آنالیز in silico و فیلوژنتیکی ژن ACP است. با آنالیز های بیشتر مشخص شد که ژنACP در پروکاریوت ها دارای 4 اگزون و 3 اینترون و 2mRNA و در یوکاریوت ها دارای 13 اگزون، 12 اینترون و 9 mRNA است. این پروتئین در یوکاریوت های گیاهی دارای هدف گیری میتوکندریایی و در پروکاریوت به مناطقی غیر از میتوکندری هدف گیری می شود و جزو پروتئین های ترشحی نیز نمی باشد. نتایج همردیفی چندگانه با استفاده از T-coffee نشان داد که ژن ACP در بین گونه های باکتریایی محافظت شده تر از گونه های گیاهی می باشد. آنالیز فیلوژنتیکی پروتئین ACP در پروکاریوت ها مشخص کرد که به جز یک خوشه، در بقیه ی موارد باکتری های گرم مثبت در یک خوشه و باکتری های گرم منفی در خوشه ی دیگر قرار گرفتند. در یوکاریوت ها گونه های مختلف گیاهی به طور پراکنده در خوشه های مختلف قرار می گیرند و نتایج کلاستربندی در یوکاریوت ها ربطی به گونه ی موجود ندارد. بعلاوه در بررسی همزمان پروتئین ACP در یوکاریوت ها و پروکاریوت ها مشخص شد که یوکاریوت ها و پروکاریوت ها در بعضی خوشه ها کنار همدیگر قرار می گیرند که ناشی از شباهت توالی این پروتئین در این گونه ها می باشد. مقایسه ساختار ثانویه پروتئین در یوکاریوت ها و پروکاریوت ها نشان داد که تعداد صفحات آلفا و بتا در پروکاریوت ها در مقایسه با یوکاریوت بیشتر است. مدل سازی سه بعدی این پروتئین در گندم (به عنوان نماینده یوکاریوت ها) و باکتری Clostridioides difficile 630 (به عنوان نماینده پروکاریوت ها) به روش همولوژی مدلینگ و با استفاده از پایگاه داده Swiss Model پس از انتخاب الگوی مناسب با میزان شباهت بالا که از پایگاه داده PDB استخراج شدند، انجام گرفت. جهت اعتبارسنجی ساختاری مدل ترسیم شده سه بعدی و آنالیز استرئوشیمیایی، نمودار راماچاندران ترسیم و زوایای دی هیدرال محاسبه شدند. نتایج ارزیابی کیفیت ساختاری نشان داد که مدل های پیشنهادی دارای کیفیت و پایداری مناسبی می باشند. مطالعه ساختار پروتئین می تواند به درک عملکرد پروتئین کمک کند و بررسی جزئیات ساختار آن می تواند در مطالعات جایگاه فعال پروتئین و داکینگ سودمند باشد.
    کلید واژگان: تجزیه فیلوژنتیکی, ژن ACP, همردیفی, یوکاریوت, پروکاریوت}
    Masoumeh Fallah Ziarani, Masoud Tohidfar, Zahra Aminfar
    The biosynthesis pathway of fatty acids is one of the important pathways in the body of most organisms that an enzyme Acyl carrier protein (ACP) plays an important role in it. The purpose of this study is phylogenetic and in silico analysis of gene ACP. More analysis indicate that ACP gene has 4 exons, 3 introns and and 2 mRNA in prokaryotes and 13 exons, 12 introns and 9 mRNA in eukaryotes. This protein has target mitochondrial in plant eukaryotes and non-mitochondrial target in prokaryotes and it is not also included of secreted proteins. The results of multiple alignments by T-Coffee server showed that the ACP genes between bacterial species are more protected than plant species. Phylogenetic analysis of ACP proteins in prokaryotes is revealed that except for a cluster, in other case Gram-positive bacteria are in one cluster and gram-negative bacteria are in another cluster. In eukaryotes, different plant species are scattered in different clusters. These results indicated that clustering in eukaryotes are not relate to species. In addition, the study of ACP proteins in eukaryotes and prokaryotes revealed that both eukaryotes and prokaryotes are placed together in some clusters that is due to the similarities of sequences in species. Comparison of the secondary structure of the protein in eukaryotes and prokaryotes showed that the number of alpha and beta sheets in prokaryotes are more than of eukaryotes. Three-dimensional modeling of this protein was done by homology modeling using Swiss Model database in wheat (as representative of eukaryotic) and bacteria Clostridioides difficile 630 (as represented prokaryotes). The best templates were extracted with high similarity from PDB database. To validation of modeled structure and esterochemical analysis, Ramachandran plot was drawn and dihydral angles were calculated. Structural quality evaluation results showed that the proposed models are good quality and stability. The study of protein structure may help to understand protein function and the details of its structure can be useful in studies of the active site of the protein and docking.
    Keywords: phylogenetic analysis, ACP gene, alighnment, eukaryote, prokaryot}
  • فروه سادات مصطفوی نیشابوری، محمود معصومی، سعید نصرالله نژاد
    ویروس موزاییک کوتولگی ذرت (Maize Dwarf Mosaic Virus، MDMV) یکی از مهمترین و گسترده ترین پوتی ویروس-های ذرت در دنیا محسوب می شود. به منظور تعیین جایگاه تاکسونومیکی ویروس جدایه استان گلستان در میان پوتی ویروس های غلات و سایر سویه های MDMV و قرابت آن با سویه های سایر کشورها، گیاهان ذرت و قیاق با علائم موزاییک و کوتولگی در سال زراعی 1389 از مزارع استان گلستان جمع آوری شد. نمونه های آلوده به MDMV با آنتی سرم این ویروس در آزمون الایزای غیر مستقیم مشخص شد. نمونه آلوده به MDMV انتخاب و RNA ویروسی آن استخراج شده، سپس ناحیه /3 ژنوم آن با استفاده از آغازگرهای عمومی پوتی ویروس ها و اختصاصیMDMV به روش RT-PCR تکثیر و همسانه سازی شد. ترادف استنتاجی ناحیه CP-UTR، قطعه ای به طول 1107 نوکلئوتید بود. این ترادف با ترادف سایر جدایه های MDMV موجود در بانک ژن و نیز پوتی ویروس های دیگر غلات مورد مقایسه قرار گرفت و درخت فیلوژنتیکی حاصل از این ترادف ها به روش neighbor-joining بدست آمد. در این تجزیه فیلوژنتیکی، 46 ترادف در 6 گروه شامل SrMV، ZeMV، PenMV، JGMV، SCMV و MDMVقرار گرفت و جدایه گلستان در کنار جدایه ای از کشور بلغارستان گروه مشترکی تشکیل دادند. نتایج این آزمایش نشان می دهد احتمالا منشاء جدایه های MDMV در ایران کشورهای اروپایی یا بطور دقیق تر حوزه مدیترانه باشد
    کلید واژگان: پوتی ویروس, تجزیه فیلوژنتیکی, ویروس موزاییک کوتولگی ذرت, MDMV, RT, PCR}
    Mostafavi Neishaburi Fs, Masumi M., Nasrolahnejad S
    Maize dwarf mosaic virus (Maize dwarf mosaic virus) is one of the most important and widespread maize potyviruses in the world. In order to determine the taxonomic position of the isolates of the virus in Golestan province among cereal potyviruses and other strains of MDMV and its relationship with strains of other countries, corn and johnsongrass plants with mosaic symptom and dwarfing were collected from fields of Golestan province. Samples were verified using an antiserum against MDMV by indirect ELISA. The viral RNA was isolated from an infected sample and the 3΄-region of the genome of virus was amplified using potyviral degenerate and specific primers by RT-PCR.The obtained consensus sequence for CP-UTR region was 1126 nucleotides. Comparison was made between these isolates and a number of other cereal potyviruses available in GenBank and phylogenetic tree was constructed by neighbor-joining majority- rule method. In phylogenetic analysis 46 sequences were grouped into 6 viruses: SCMV, PenMV, IJMV, SrMV, ZeMV and MDMV. In this tree, isolate of Golestan were grouped with isolate of Bulgaria. Based on this analysis the Iranian isolate of MDMV has been probably originated from Europe or more probable from Mediterranean basin
نکته
  • نتایج بر اساس تاریخ انتشار مرتب شده‌اند.
  • کلیدواژه مورد نظر شما تنها در فیلد کلیدواژگان مقالات جستجو شده‌است. به منظور حذف نتایج غیر مرتبط، جستجو تنها در مقالات مجلاتی انجام شده که با مجله ماخذ هم موضوع هستند.
  • در صورتی که می‌خواهید جستجو را در همه موضوعات و با شرایط دیگر تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مجلات مراجعه کنید.
درخواست پشتیبانی - گزارش اشکال