جستجوی مقالات مرتبط با کلیدواژه "pvy" در نشریات گروه "بیوتکنولوژی و ژنتیک گیاهی"
تکرار جستجوی کلیدواژه «pvy» در نشریات گروه «کشاورزی»-
یکی از بیماری های مهمی که سالانه خسارت های اقتصادی بسیاری به کشاورزان کشور وارد می کند و باعث افت عملکرد و کیفیت محصول می شود، ویروس Y سیب زمینی (PVY) است. امروزه استفاده از سازوکار های ایجاد مقاومت ناشی از پاتوژن افق های جدیدی در راستای تولید گیاهان تراریخت مقاوم به ویروس گشوده است. در این پژوهش از روش خاموشی ژن برای ایجاد مقاومت بر علیه PVY استفاده شده است. برای این منظور از یک سازه ژنی RNAi برگرفته از بخش پروتئین پوششی (CP) ژنوم PVY استفاده شد. سازه با استفاده از اگروباکتریوم به ریزنمونه های میانگره و برگ گیاه سیب زمینی انتقال داده شد. درصد نوساقه های تولید شده در محیط انتخابی حاوی علفکش فسفینوتریسین پس از رشد و تکثیر مورد ارزیابی قرار گرفت. تراریختی بوته ها و بررسی بیان ژن در گیاهان تراریخته با استفاده از آزمون زنجیره ای پلیمراز (PCR) و RT-PCR بررسی شد. بر اساس نتایج 42 درصد گیاهان باززا شده تراریخته بودند. بیان ژن CP نیز در اغلب لاین ها به اثبات رسید. به منظور تعیین مقاومت گیاهان تراریخته در برابر آلودگی PVY، آزمون زیست سنجی صورت گرفت. نتایج حاصله نشان داد که حدود 82 درصد گیاهان سیب زمینی تراریخت نسبت به آلودگی PVY مقاوم هستند.
کلید واژگان: سیب زمینی, مقاومت به ویروس, PVY, RNAi, خاموشی ژنPotato virus Y (PVY) is one of the most damaging viruses of potato plants which infects most cultivars and causes a significant decrease in yield products quality and also economical losses annually. Recently, the application of pathogen derived resistance mechanisms has opened new horizons for the development of virus-resistant transgenic plants. This research was carried out to study RNA silencing to engineered potato plants that are resistant to potato virus Y (PVY). RNAi construct was designed from coat protein (CP) segment of PVY. Potato explants were transformed by Agrobacterium tumefaciens AGL1 with pCAMRNAiCP containing bar selectable gene. The rate of regenerated plants was evaluated in the selected medium containing the herbicide phosphinotricin after growth and propagation. Transgenic plants and their gene expression were investigated using polymerase chain reaction (PCR) and RT-PCR. Results showed that 42 percent of regenerated plants were transformed. The expression of CP hairpin construct was determined by RT-PCR analysis in most of the lines. PVY resistance bioassay showed that 82 percent of transgenic potato plants were resistance to PVY.
Keywords: gene silencing, potato, PVY, RNAi, virus resistance -
توتون، یکی از گیاهان مهم صنعتی است که در اقتصاد و درآمد کشورهای تولیدکننده نقش بسیار مهمی دارد. Potato Virus Y یکی از مهم ترین بیماری های ویروسی خسارت زا روی توتون است و باعث کاهش کمیت و کیفیت محصول توتون می گردد. ویروس Y سیب زمینی (PVY) متعلق به جنس Potyvirus است که گیاهان خانواده سولاناسه مانند سیب زمینی، توتون و گوجه فرنگی را آلوده می کند. موثرترین و بهترین روش برای کاهش خسارت این ویروس، اصلاح ارقام مقاوم یا متحمل نسبت به این ویروس است. نشانگرهای DNA پیوسته با ژن های مقاومت و دارای چندشکلی زیاد، مانند نشانگرهای SSR می توانند در تسریع برنامه های اصلاح ارقام مقاوم مفید باشند. این تحقیق به منظور ارزیابی مقاومت نسبی توتون نسبت به بیماری ویروس Yسیب زمینی با استفاده از نشانگرهای SSR اجرا شد. جهت اجرای این تحقیق رقم VAMمقاوم به ویروس PVY با رقم K326 حساس به این بیماری تلاقی داده شد. تلاقی اولیه در سال 1389 انجام شد، در سال1390 بذور F1 کشت شده و بذور F2 به دست آمده بود. بذور F2 حاصل در سال 1390 در مزرعه تحقیقاتی مرکز تحقیقات و آموزش توتون تیرتاش کشت شدند. در طول دوره رشد، عملیات زراعی لازم به موقع انجام پذیرفت و ارزیابی مزرعه ای (مورفولوژیکی) از نظر علائم آلودگی به بیماری PVY از بین گیاهان کشت شده در مزرعه هر دو هفته یک بار صورت گرفت. سپس، گیاهان F2 به دست آمده با جدایه خالص سازی شده سویه O ویروس PVY مایه زنی شدند. در ادامه کار از تعداد 10 بوته متحمل و 10 بوته حساس، براساس علایم مزرعه ای نمونه برگ تهیه گردید. روی این نمونه ها برای تایید مقاومت و حساسیت به PVY آزمون الایزا انجام شد و براساس نتایج الایزا ژنوتیپ های حساس و مقاوم شناسایی شدند. DNA ی مربوط به بوته های والد حساس و مقاوم به بیماریPVY به طور جداگانه به روش دلاپورتا استخراج شده و جهت تهیه نمونه های بالک (توده) حساس و مقاوم، DNA ی نمونه های حساس با یکدیگر و DNA ی نمونه های مقاوم با هم مخلوط شدند. در ادامه100 جفت آغازگر SSR انتخابی روی دو رقم والدینی تست شد. نتایج نشان داد که از بین 100 جفت آغازگر مورد استفاده در این تحقیق، 28 جفت آغازگر توانستند الگوی نواربندی متفاوتی را برای هر نشانگر در بین والدین مقاوم و حساس به PVY نشان دهند. در مرحله بعد این 28 نشانگر بر روی بالک حساس و مقاوم تست شد تا نشانگر پیوسته با ژن مقاومت شناسایی گردد. مشخص شد که 3 نشانگر SSR (PT30002)، (PT20165)، (PT20357) دارای بیشترین چندشکلی بوده و می توانند به عنوان نشانگر پیوسته به ژن مقاومت به بیماری PVY در برنامه های اصلاحی توتون مدنظر قرار گیرند.کلید واژگان: توتون, PVY, چندشکلی, نشانگر ریزماهواره, جفت آغازگرTobacco is one of the industrial plants which plays important role in economy and income of producer contries. Potato Virus Y (PVY) is one of Viral diseases causing the most damage on tobacco plants and reduces the quality and quantity of tobacco products. Severity of damage depends on different factors such as tobacco variety and time of infection. Potato Virus Y (PVY) is belonging to the Potyvirus genus that infecting Solanaceae plants, such as potato, tobacco and tomato. The best way to reduce damage this virus, is breeding resistant or tolerance cultivars to this virus. DNA markers Linked with resistance genes and have high polymorphism Like SSR markers can be helpful in breeding programs on resistant cultivars. This study was performed to evaluation of tobacco relative resistance to Potato Virus Y using Microsatellite markers (SSR). The implementation of this research, the VAM variety (resistant to PVY) was crossed with susceptible cultivar K326. F1 seeds were planted and F2 seeds were obtained in 2011. F2 seeds were transplanted in 2011 in Tirtash tobacco research farm. These plants were inoculated with pure isolates PVY strain O. Leaf samples were prepared based on field symptoms from 10 tolerant and 10 susceptible plants. All the samples tested with ELISA and resistant and susceptible genotypes were identified. Genomic DNA of resistant susceptible genotypes to PVY, were extracted separately to Dellaporta method. Then, 100 SSR markers were tested on two parental DNA. Results showed that among 100 pairs of primers used in this study, 28 primer pairs were able to show different model between the resistant and susceptible parents. In the next stage of the 28 markers were tested on sensitive and resistant bulk to identifying marker genes associated with resistance. It was found that three SSR markers PT30002, PT20165, PT20357 have the highest polymorphism and can be considered as genetic markers for screening resistance to PVY in tobacco.Keywords: Tobacco, Polymorphism, SSR markers, PVY, Pair primers
-
ویروس وای سیبزمینی (Potato virus Y, PVY) به عنوان یکی از بیماریهای مهم توتون (Nicotiana tabacum L.) باعث کاهش شدید عملکرد و کیفیت برگ آن می شود. استفاده از ژنوتیپهای مقاوم به عنوان یک روش بسیار موثر، مقرون به صرفه و ایمن برای کاهش خسارت ویروس در نظر گرفته میشود. در این مطالعه پاسخ 90 ژنوتیپ توتون شرقی و نیمه شرقی در مقابل ویروس وای سیبزمینی در قالب طرح بلوکهای کامل تصادفی با 3 تکرار در شرایط کنترل شده ارزیابی گردید. هر تکرار شامل 6 گیاهچه بود. برگ-های هر ژنوتیپ در مرحله 4-6 برگی به طریقه مکانیکی با عصاره ویروس مایهزنی شدند. 4 هفته بعد از مایهزنی، شدت علایم ناشی از PVY در ژنوتیپ های مورد مطالعه متفاوت بود. آزمون الایزا روی گیاهان مایهزنی شده با ویروس به صورت غیرمستقیم و با استفاده از آنتیبادی چندهمسانهای اختصاصی ویروس انجام گرفت. مقدار چگالی نوری هر نمونه آلوده شده در طول موج 405 نانومتر بااستفاده از دستگاه ELISA reader قرایت گردید. تجزیه واریانس دادههای الایزا تفاوت معنی داری را بین ژنوتیپها از لحاظ غلظت PVY نشان داد. نتایج نشان داد که ژنوتیپ 'Erzeogovina' با 0.68881OD= حاوی بالاترین غلظت ویروس بود در حالی که ژنوتیپ 'KB101' حاوی پایینترین غلظت ویروس با 0.0005OD= بود. در مطالعه حاضر، پاسخ متفاوت ژنوتیپ ها به ویروس وای سیبزمینی، بهنژادگران توتون را برای کاهش دادن آسیب این ویروس از طریق استفاده از منابع مقاومت امیدوار میسازد.
کلید واژگان: ویروس وای سیب زمینی, توتون, الایزاPotato virus Y (PVY) as one of the serious diseases on tobacco (Nicotiana tabacum L.), reduces leaf yield and its quality. Use of resistant genotypes is being considered as the most effective, economical and a safe way to reduce damages of the virus. In the present study, the response of 90 oriental and semioriental tobacco genotypes was evaluated against PVY using randomized complete block design with three replications under controlled conditions. Each replicate consisted of 6 seedlings. The leaves of each genotype were inoculated mechanically via rubbing method at 4-6 leaf stage with PVY. Four weeks following inoculation, the studied genotypes showed different severity symptoms associated with PVY. ELISA assay were applied on the inoculated plants by the indirect method using the polyc lonal antibody specific to PVY. Optical density value of each infected sample was read at 405 nm using an ELISA reader. Analysis of variance on ELISA data showed significant differences among genotypes for concentration of PVY. Results revealed that 'Erzeogovina' genotype with OD=0.68881 contained the highest virus concentration whereas the 'KB101' genotype with OD=0.0005 contained the lowest virus concentration. The differed reactions of genotypes to PVY virus encourage the use of resistance genetic resource for the reduction of disease damages.
Keywords: ELISA, Nicotiana tabacum L., PVY -
توتون، یکی از گیاهان مهم زراعی و صنعتی است که در اقتصاد و درآمد کشورهای تولید کننده نقش بسیارمهمی دارد. بیماری ویروس Y سیب زمینی (PVY) یکی از مهمترین بیماری های ویروسی خسارت زا بر روی توتون می باشد و سبب کاهش کمیت و کیفیت محصول توتون می شود. بهترین و اقتصادی ترین روش کنترل بیماری PVY، تولید ارقام مقاوم است. اصلاح برای مقاومت به این بیماری از طریق روش های کلاسیک، مشکل و مستلزم صرف هزینه های زیادی است. نشانگرهای DNA پیوسته با ژن های مقاومت و دارای چندشکلی زیاد (مانند نشانگرهای SSR) می توانند در تسریع برنامه های اصلاح ارقام مقاوم مفید باشند. این مطالعه به منظور بررسی امکان دستیابی به گزینش به کمک نشانگر (MAS) برای صفت مقاومت به بیماری PVY در توتون با استفاده از نشانگر های SSR اجرا شد. بدین منظور در فروردین ماه 1389 کاشت بذور والدین، یعنی رقم VAM به عنوان والد مقاوم به PVY و رقم K326 به عنوان والد حساس به PVY، صورت گرفت. DNA والد مقاوم و والد حساس به بیماری PVY به طور جداگانه استخراج شد و 100 جفت آغازگر SSR بر روی DNA والد مقاوم و والد حساس به طور جداگانه آزمون شدند و بعد از انجام الکتروفورز عمودی و رنگ آمیزی ژل با نیترات نقره، از بین آنها 28 نشانگر که دارای بیشترین چندشکلی بر روی والدین بودند، انتخاب و غربال شدند، سپس این 28 نشانگر بر روی بالک مقاوم و بالک حساس به بیماری PVY مورد آزمون قرار گرفتند. نتایج نشان داد که 3 نشانگر SSR به نام های (PT20357)، (PT20165)، (PT30002) دارای بیشترین چندشکلی بر روی بالک های مقاوم و حساس به PVY بودند. این نشانگرها می توانند در امر گزینش به کمک نشانگر (MAS) در مقاومت به بیماری PVY در توتون مدنظر قرار گرفته و مفید باشند.
کلید واژگان: بالک, توتون, نشانگرهای SSR, MAS, PVYTobacco is one of the agricultural and industrial plants which plays important role in economy and revenus of producer contries.Potato Virus Y (PVY) is one of the most Dangerous Viral diseases on tobacco plants and reduces the quality and quantity of tobacco crops. The best and most industrial method for PVY disease is production of resistant varieties. Improvement for resistance to this disease from classic methods is difficult and need many expancess.DNA markers Linked to resistance gene and have high polymorphism(Like SSR Markers) can be useful in acceleration of resistant varieties Breeding programs. This research has been done for studying the probability accesses to Marker-assisted Selection (MAS) for resistance trait to PVY disease in tobacco with SSR markers. For this aim,in Farvardin 1389, cultivation of parental seeds(VAM Variety) which resistant to PVY and (K326 Variety) as a susceptible parent to PVY were done.DNA of resistant and susceptible parents Leaves, were extracted, Separately.,and after of performance polyacrylamid electrophoresis and Gel staining by silver nitrate solution, among of them,28 pair primers have the most polymorphisms on parents,were selected and screened. Then,this 28 SSR markers were tested on resistant and susceptible Bulks to PVY disease. The final results showed that 3 SSR markers (PT20357),(PT30002),(PT20165) have the good polymorphism on resistant and susceptible Bulks to PVY.These markers can be useful to MAS for resistance or Tolerance to PVY in tobacco.Keywords: Tobacco, SSR markers, MAS, Bulk, PVY
- نتایج بر اساس تاریخ انتشار مرتب شدهاند.
- کلیدواژه مورد نظر شما تنها در فیلد کلیدواژگان مقالات جستجو شدهاست. به منظور حذف نتایج غیر مرتبط، جستجو تنها در مقالات مجلاتی انجام شده که با مجله ماخذ هم موضوع هستند.
- در صورتی که میخواهید جستجو را در همه موضوعات و با شرایط دیگر تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مجلات مراجعه کنید.