جستجوی مقالات مرتبط با کلیدواژه "تفنگ ژنی" در نشریات گروه "پزشکی"
جستجوی تفنگ ژنی در مقالات مجلات علمی
-
سابقهفاکتور محرکه کلونی گرانولوسیتی انسان بعنوان یک محصول دارویی ارزشمند در درمان سرطان خون شناخته شده است. در چند سال گذشته گیاهان ترانسپلاستوم برای تولید انواع داروهای نوترکیب و واکسن ها مورد استفاده قرار گرفته اند و در مقایسه با گیاهان تراریخت بدلیل تولید بالای پروتئین نوترکیب و مسائل ایمنی زیستی برتری هایی را نشان می دهند.روش هاژن hG-CSF بر روی وکتور pCL تحت پروموتر prnn 16S و خاتمه دهنده TspA کلون گردید. وکتور حاوی ژن مورد نظر با نانو ذرات طلا پوشش داده شد و با استفاده از روش تفنگ ژنی به ژنوم کلروپلاست منتقل گردید. باززایی نمونه های بمباران شده در محیط موراشینگ و اسکوگ حاوی هورمون 6-benzylaminopurine and 1-naphthaleneacetic acid انجام گرفت.نتایجبرای تایید صحت وکتور بیانی ابتدا وکتور حاوی ژن نشانگر بتاگلوکرونیداز در کلروپلاست بیان گردید و سپس ژن hG-CSF با همان پروتوکل انتقال یافت. درج هدفمند ژن مورد نظر در ژنوم کلروپلاست لاین های تراریخت با پرایمر های اختصاصی که از روی ژنوم طراحی شده بود مورد تایید قرار گرفت. برای بررسی بیان ژن در سطح پروتئین آزمایش وسترن بلات انجام شد که بیان پروتئین نوترکیب 20 کیلودالتونی را در گیاهان تراریخت و عدم بیان آن در گیاهان شاهد مورد تایید قرار داد.نتیجه گیریاین مطالعه برای اولین بار بیان فاکتور محرکه کلنی گرانولوسیتی انسان را در کلروپلاست گیاه مورد بررسی قرار داده است. امید است که پلت فرم مناسبی برای تحقیقات دارویی و بیان پروتئین های نوترکیب باشد.
کلید واژگان: پلاستید, G, CSF انسانی, تفنگ ژنی, انتقال هدفمندBackgroundHuman granulocyte colony-stimulating factor (hG-CSF) can serve as valuable biopharmaceutical for research and treatment of the human blood cancer. Transplastomic plants have been emerged as a new and high potential candidate for production of recombinant biopharmaceutical proteins in comparison with transgenic plants due to extremely high level expression، biosafety and many other advantages.MethodshG-CSF gene was cloned into pCL vector between prrn16S promoter and TpsbA terminator. The recombinant vector was coated on nanogold particles and transformed to lettuce chloroplasts through biolistic method. Callogenesis and regeneration of cotyledonary explants were obtained by Murashige and Skoog media containing 6-benzylaminopurine and 1-naphthaleneacetic acid hormones. The presence of hG-CSF gene in plastome was studied with four specific PCR primers and expression by Western immunoblotting.ResultshG-CSF gene cloning was confirmed by digestion and sequencing. Transplastomic lettuce lines were regenerated and subjected to molecular analysis. The presence of hG-CSF in plastome was confirmed by PCR using specific primers designed from the plastid genome. Western immunoblotting of extracted protein from transplastomic plants showed a 20-kDa band، which verified the expression of recombinant protein in lettuce chloroplasts.ConclusionsThis study is the first report that successfully express hG-CSF gene in lettuce chloroplast. The lettuce plastome can provide a cheap and safe expression platform for producing valuable biopharmaceuticals for research and treatment.Keywords: Plastid, Human granulocyte colony, stimulating factor (hG, CSF), Biolistics, Gene targeting
نکته
- نتایج بر اساس تاریخ انتشار مرتب شدهاند.
- کلیدواژه مورد نظر شما تنها در فیلد کلیدواژگان مقالات جستجو شدهاست. به منظور حذف نتایج غیر مرتبط، جستجو تنها در مقالات مجلاتی انجام شده که با مجله ماخذ هم موضوع هستند.
- در صورتی که میخواهید جستجو را در همه موضوعات و با شرایط دیگر تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مجلات مراجعه کنید.