بیان فاکتور محرکه کلنی گرانولوسیت انسانی (hG-CSF) در کاهوی ترانس پلاستوم (Lactuca Sativa)

فاکتور محرکه کلونی گرانولوسیتی انسان بعنوان یک محصول دارویی ارزشمند در درمان سرطان خون شناخته شده است. در چند سال گذشته گیاهان ترانسپلاستوم برای تولید انواع داروهای نوترکیب و واکسن ها مورد استفاده قرار گرفته اند و در مقایسه با گیاهان تراریخت بدلیل تولید بالای پروتئین نوترکیب و مسائل ایمنی زیستی برتری هایی را نشان می دهند.
ژن hG-CSF بر روی وکتور pCL تحت پروموتر prnn 16S و خاتمه دهنده TspA کلون گردید. وکتور حاوی ژن مورد نظر با نانو ذرات طلا پوشش داده شد و با استفاده از روش تفنگ ژنی به ژنوم کلروپلاست منتقل گردید. باززایی نمونه های بمباران شده در محیط موراشینگ و اسکوگ حاوی هورمون 6-benzylaminopurine and 1-naphthaleneacetic acid انجام گرفت.
برای تایید صحت وکتور بیانی ابتدا وکتور حاوی ژن نشانگر بتاگلوکرونیداز در کلروپلاست بیان گردید و سپس ژن hG-CSF با همان پروتوکل انتقال یافت. درج هدفمند ژن مورد نظر در ژنوم کلروپلاست لاین های تراریخت با پرایمر های اختصاصی که از روی ژنوم طراحی شده بود مورد تایید قرار گرفت. برای بررسی بیان ژن در سطح پروتئین آزمایش وسترن بلات انجام شد که بیان پروتئین نوترکیب 20 کیلودالتونی را در گیاهان تراریخت و عدم بیان آن در گیاهان شاهد مورد تایید قرار داد.
این مطالعه برای اولین بار بیان فاکتور محرکه کلنی گرانولوسیتی انسان را در کلروپلاست گیاه مورد بررسی قرار داده است. امید است که پلت فرم مناسبی برای تحقیقات دارویی و بیان پروتئین های نوترکیب باشد.