جستجوی مقالات مرتبط با کلیدواژه « smpA » در نشریات گروه « پزشکی »
-
همسانه سازی و توالی یابی ژن های ویرولانسompA و smpAاسنیتوباکتربامانی جدا شده از نمونه-های بیمارستانیاسنیتوباکتربامانی یک پاتوژن نوظهور و مهم در بروز عفونت های مختلف بیمارستانی از قبیل، عفونت دستگاه ادراری، بیمارستانی، مننژیت و دستگاه تنفسی می باشد. این میکروارگانیسم حدود سه دهه است که شیوع گسترده ای پیدا کرده و به کلاس های مختلف آنتی بیوتیک مقاوم شده اند. هدف از این مطالعه جداسازی، کلونینگ و توالی یابی دو ژن ویرولانس کاندیدای تهیه واکسن بر علیه اسنیتوباکتربامانی می باشد.مواد و روش هاتعداد 30 نمونه عفونت های مختلف بیمارستانی(عفونت زخم، خون و عفونت های ادراری) از بیمارستان های امام علی(ع) و آیت الله کاشانی شهرکرد تهیه شد. نمونه ها بر روی محیط های بلاد آگار و مک کانکی آگار کشت داده شدند. جداسازی و تشخیص به روش های میکروسکوپی، کشت میکروبی و بیوشیمیایی انجام شد. دو ژن ompA و smpA با تکنیک PCR جداسازی و درون وکتور پلاسمیدی pTZ57R/T کلون شدند. صحت سازواره نوترکیب به دو روش PCR و هضم آنزیمی دوگانه انجام شد. دو ژن ompA و smpA کلون شده در پلاسمید pTZ57R/T توالی یابی شدند.نتایجاز 30 نمونه جمع آوری شده، 10 ایزوله اسنیتوباکتربامانی(33/33%)تشخیص داده شد. الکتروفورز محصولات PCR دو باند 1150 و 411 جفت بازی بدست آمد که به ترتیب مربوط به ژنهای ompA و smpA بود. پلاسمید pTZ57R/T دارای بازده بالا و صحت همسانه سازی به دو روش PCR و هضم آنزیمی دوگانه دو باند 1150 و 411 جفت بازی را نشان داد. نتایج توالی یابی تشابه 95-90 درصدی دو ژن ompA و smpA با توالی رفرنس در ncbi را تایید کرد.نتیجه گیرینتایج بدست آمده نشان داد که پلاسمید pTZ57R/T برای کلون سازی قطعات بزرگDNA مناسب می باشد و با توجه به حفاظت شدگی بالای دو ژن ompA و smpA برای ساخت واکسن می توان از آنها استفاده نمود.کلید واژگان: اسنیتوباکتربامانی, همسانه سازی, ompA, smpA}Armaghane-danesh, Volume:21 Issue: 12, 2017, PP 1207 -1217BackgroundAcinetobacterbaumannii has emerged as a medically important pathogen because of the increasing number of infections produced by this organism over the preceding three decades and the global spread of strains with resistance to multiple antibiotic classes. So, aim of this research, amplification, cloning and sequencing two virulence factor genes Acinetobacterbaumannii isolated from patients.Materials And MethodsCollecting samples of Acinetobacterbaumannii taken from different clinical cases of wounds, septicemia, and urinary tract infections. That was accomplished by taking (30) samples from Imam Ali and Kashani hospitals Shahrekord Township. Samples were cultured on solid media (McConkey and blood agars), and according to microscopical, cultural, and biochemical were identified. The coding sequence of AcinetobacterbaumanniiompA and smpA genes was isolated by PCR method. The ompA and smpA genes was inserted into pTZ57R/T as T/A cloningvector. Transformation was confirmed with plasmid extraction, followed by double digestion and PCR methods.ResultA. baumannii isolates were identified in 10 different patients. All isolates (33.33%) were recovered from patients in the intensive care unit (ICU). As a result of PCR and double digestion two band 1150 and 411bp ompA and smpA genes respectively were observed. The sequences was found to be 90-95% similar to that ref sequences obtained in GenBank. The sequence of ompA and smpA genes amplified by the specific primer is closely matched (90 and 95% respectively) with aA. baumannii strains.ConclusionTransformation experiments revealed that these plasmids were capable to transform E. coli NB, an observation which indicates the ability of these plasmids to easy carrier large sequence into host. The ompA and smpA genes had perfect match (similarity, 90 and 95% respectively) with sequences of their corresponding gene (ompA and smpA genes) from GenBank as determined by using BLAST. So of this genes can used to construct DNA vaccine against Acinetobacterbaumannii.Keywords: Acinetobacter baumannii, cloning, ompA, smpA}
نکته
- نتایج بر اساس تاریخ انتشار مرتب شدهاند.
- کلیدواژه مورد نظر شما تنها در فیلد کلیدواژگان مقالات جستجو شدهاست. به منظور حذف نتایج غیر مرتبط، جستجو تنها در مقالات مجلاتی انجام شده که با مجله ماخذ هم موضوع هستند.
- در صورتی که میخواهید جستجو را در همه موضوعات و با شرایط دیگر تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مجلات مراجعه کنید.