ارزیابی بیان مارکرهای پرتوانی در کلونی های سلول هایES-like حاصل از اسپرماتوگونی و سلول های بنیادی جنینی

اخیرا ماهیت پرتوانی سلول های بنیادی اسپرماتوگونی (Spermatogonial Stem Cells، SSCs) در محیط کشت مورد توجه قرار گرفته است. هدف از تحقیق حاضر تولید سلولهای شبه بنیادی جنینی ES-like cells) (Embryonic Stem like cells، از SSCs و بررسی تغییرات مورفولوژیک و ژنتیکی در این سلول ها نسبت به سلول های بنیادی جنینی ESCs) (Embryonic stem cells، است.
سلول های اسپرماتوگونی از بیضه موش نوزاد با استفاده از یک روش هضم مکانیکی و آنزیمی دو مرحله ای استخراج شده ودر محیط حاوی DMEM و FBS 15 درصد کشت داده شدند. به طوری که در پاساژ پنجم کلونی هایES-like cells حاصل شد. بیان ژن های اختصاصی اسپرماتوگونی Stra8،،DAZLPlzfو ژن های پرتوانی Nanog، SOX2، Klf4 به روش RT-PCR، فعالیت آنزیم آلکالین فسفاتاز و نشانگر پرتوانی Oct4 به روش ایمونوسیتوشیمی در سلول هایES-like cells بررسی و با سلول های ESCs مقایسه شد.
ماهیتسلول های ES-like cells حاصله توسط معیارهای نظیر مورفولوژی، میزان بالای فعالیت آلکالین فسفاتاز و نشانگر پرتوانی Oct4 مورد تایید قرار گرفت. طی تبدیل سلول های اسپرماتوگونی به سلول های ES-like cells بیان ژن های اختصاصی نظیر Stra8،،DAZLPlzfکاهش و بیان ژن های پرتوانی نظیر Nanog، SOX2، Klf4 افزایش می یابد.
کشت سلول های اسپرماتوگونی منجر به تولید کلونی های ES-like cellsمی شود این فرآیند همراه با تغییرات ژنتیکی گسترده ای در بیان ژن های اختصاصی اسپرماتوگونی و ژن های پرتوانی در سلول های ES-like cells می باشد. در مجموع سلول های اسپرماتوگونی می تواند دریچه ای به سمت دستیابی به سلول های پرتوان مورد استفاده قرار گیرد.