بررسی اثر افزایش cAMP بر فسفوریلاسیون پروتئین BAD در رده ی سلولی لوسمی لنفوبلاستیک حاد پیش ساز (B- (NALM-6 تیمارشده با دوکسوروبیسین

پروتئین (BAD (Bcl-2-associated death promoter عامل پروآپوپتوتیک بوده که در حالت فسفریله، عملکرد آپوپتوزی آن خاموش و در حالت غیرفسفریله از طریق اتصال و مهار پروتئین BCL-XL باعث پیشروی آپوپتوز در سلول ها می شود. ترکیبات افزایشدهنده ی cAMP، آپوپتوز القاشده توسط دوکسوروبیسین که نوعی داروی ضدتوموری است را کاهش می دهند. هدف از این مطالعه بررسی اثرات عوامل افزایش دهنده cAMP داخل سلولی فورسکولین و IBMX بر فسفریلاسیون پروتئین BAD در سلول های لوسمی لنفوبلاستیک حاد بود.
سلول های رده ی لوسمی لنفوبلاستیک حاد پیش ساز B با عوامل افزایش دهنده ی cAMP به همراه داروی دوکسوروبیسین 250 و 500 نانو مولار به مدت 24 ساعت مجاور شدند. برای بررسی مرگ سلولی از رنگ آمیزی تریپان بلو و برای ارزیابی میزان آپوپتوز از رنگ آمیزی Annexin V-FITC با فلوسایتومتری استفاده شد. از تکنیک وسترن بلات برای بررسی بیان پروتئین BAD و تغییرات فسفوریلاسیون استفاده گردید. بررسی داده ها با آزمونPaired T- Test انجام شد.
بررسی فلوسایتومتری کاهش معنادار آپوپتوز را در نمونه های تیمار شده با عوامل افزایش دهنده ی cAMP و دوکسوروبیسین در مقایسه با سلول های تیمار شده با دوکسوروبیسین به تنهایی نشان داد. نتایج وسترن بلات نشان داد که عوامل افزایش دهنده ی cAMP سبب فسفوریلاسیون پروتئین BAD گردد، همچنین داروی دوکسوروبیسین به تنهایی قادر به تغییراتی در فسفوریلاسیون پروتئین BAD نیست.
یافته های این مطالعه نشان داد که عوامل افزایش دهنده ی cAMP آپوپتوز القاشده با دوکسوروبیسین را از طریق فسفوریلاسیون پروتئین BAD در رده سلولی NAMLM-6 کاهش می دهد.