بررسی ایمنی زایی آنتی ژن های STxB و STxB-IpaD به صورت نازال در رت های آزمایشگاهی
نویسنده:
چکیده:
سابقه و هدف
باکتری های شیگلا و ایشرشیا کلی شایع ترین عامل اسهال است و واکسن موثری علیه آن ها تولید نشده است. پروتئین IpaD نقش مهمی در تهاجم، بیماری زایی و ایجاد عفونت توسط شیگلاها دارد. یکی دیگر از فاکتورهای بیماری زای اصلی در شیگلا دیسانتری تیپ 1 و E. coli O157:H7 انتروتوکسین شیگلا یا (STxB) می باشد. با ممزوج پروتئین IpaD با STxB می توان کاندیدای واکسن مناسب تهیه نمود. در این مطالعه تیتر آنتی بادی پروتئین های نوترکیب STxB-IpaD ممزوجی و STxB نازالی و ایمنی زایی آن ها در رت با یک دیگر مقایسه شده است.مواد و روش ها
در این مطالعه تجربی، وکتورهای (pET28-stxB)، (pET28-ipaD-stxB) از مرکز زیست شناسی دانشگاه امام حسین (ع)تهیه گردید. با ترانسفورم این وکتورها به درون باکتریcoli BL21 DE3.E، به وسیله PCR و برش آنزیمی تایید شدند. پروتئین های نوترکیب تولید شده به وسیله SDS-PAGE و لکه گذاری وسترن مورد تایید قرار گرفتند. بیان ژن های STxB-IpaD ممزوجی و STxB تحت القای IPTG انجام و بعد از تخلیص پروتئین با استفاده از کروماتوگرافی تمایلی، آنتی ژن های حاصل در چهار نوبت متوالی به صورت نازال به رت ها در گروه پنج تایی تجویز شدند. آنتی بادی پلی کلونال تولید شده در سرم رت ها اندازه گیری گردید.یافته ها
نتایج الایزا نشان داد که آنتی بادی علیه آنتی ژن STxB در رت ها تولید شده و با ممزوج شدن IpaD به STxB میزان تیتر آنتی بادی نسبت به تیتر آنتی بادی علیه آنتی ژن STxB افزایش یافته است. رت های ایمن شده با آنتی ژن STxB توانستند تا 6 برابر LD50 و رت های ایمن شده با آنتی ژن STxB-IpaD تا 10 برابر LD50 شیگا توکسین E. coli O157:H7 را تحمل نمایند.نتیجه گیری
پروتئین حاصل از امتزاج ژن های IpaD و STxB، می تواند اثر ایمنی زایی آنتی ژن STxB را افزایش دهد. پروتئین های ممزوجی با پروتئین نوترکیب STxB را به صورت نازالی و بدون ادجوانت شیمیایی به عنوان کاندید مناسب برای تولید واکسن نوترکیب علیه انواع شیگلا و ایشرشیا کلی می توان توصیه نمود.کلیدواژگان:
زبان:
فارسی
صفحات:
397 تا 403
لینک کوتاه:
magiran.com/p1383970
دانلود و مطالعه متن این مقاله با یکی از روشهای زیر امکان پذیر است:
اشتراک شخصی
با عضویت و پرداخت آنلاین حق اشتراک یکساله به مبلغ 1,390,000ريال میتوانید 70 عنوان مطلب دانلود کنید!
اشتراک سازمانی
به کتابخانه دانشگاه یا محل کار خود پیشنهاد کنید تا اشتراک سازمانی این پایگاه را برای دسترسی نامحدود همه کاربران به متن مطالب تهیه نمایند!
توجه!
- حق عضویت دریافتی صرف حمایت از نشریات عضو و نگهداری، تکمیل و توسعه مگیران میشود.
- پرداخت حق اشتراک و دانلود مقالات اجازه بازنشر آن در سایر رسانههای چاپی و دیجیتال را به کاربر نمیدهد.
In order to view content subscription is required
Personal subscription
Subscribe magiran.com for 70 € euros via PayPal and download 70 articles during a year.
Organization subscription
Please contact us to subscribe your university or library for unlimited access!