القای کالوس و تولید ویتانولیدها از طریق کشت سوسپانسیون سلولی گیاه دارویی پنیرباد

گیاه پنیرباد (Withania coagulans (Stocks) Dunal) به دلیل خصوصیات درمانی فراوان، یک گیاه دارویی شناخته شده است.

در این مطالعه، القای کالوس نرم و ایجاد کشت سوسپانسیون سلولی گیاه به منظور تولید ویتانولیدهای مهم ویتافرین A و ویتانولید A انجام شد.

القای کالوس در گیاه با استفاده از ریزنمونه های برگ و میانگره بر روی محیط کشت موراشیگ و اسکوگ (ام اس) دارای غلظت های مختلف (صفر، 1 ،1/5 ،2 ،و 2/5 میلی گرم بر لیتر) اکسین های توفوردی، نفتالن استیک اسید و ایندول استیک اسید به تنهایی یا در ترکیب با هورمون بنزیل آمینو پورین (صفر، 0/5 و 1 میلی گرم بر لیتر) در قالب آزمایش فاکتوریل بر پایه کاملا تصادفی با پنج تکرار انجام شد. سپس ایجاد کشت سوسپانسیون سلولی به منظور تولید ویتانولیدها انجام شد.

درصد کالوسزایی در ریزنمونه برگ (25 تا 96%) بیشتر از ریزنمونه میانگره (23/2 تا 85/4%) بود. درصد بالایی از کالوس نرم از ریزنمونه برگ کشت شده بر روی محیط کشت MS همراه با 0/5 میلی گرم توفوردی و 0/5 میلی گرم بنزیل آمینو پورین بدست آمد. کشت سوسپانسیون سلولی از کالوس های نرم روی محیط کشت MS همراه با 1/5 میلی گرم بر لیتر ایندول استیک اسید و 0/5 میلی گرم بر لیتر بنزیل آمینو پورین ایجاد گردید. بیشترین تجمع زیست توده (172 گرم بر لیتر وزن تر و 15 گرم بر لیتر وزن خشک) و تولید هر دو ویتانولید در هفته چهارم کشت مشاهده شد. سلول های گیاه در این زمان، به ترتیب 0/08 و 21 میکروگرم بر لیتر ویتافرین A و ویتانولید A تولید کردند.

نتایج این مقاله می تواند برای تحقیقات بیشتر بر روی مسیرهای بیوسنتز ویتانولیدها و تولید آنها در بیوراکتور مورد استفاده قرار گیرد.