جداسازی باکتری های تجزیه کننده لیپید از پساب های صنعتی و شناسایی مولکولی آنها

لیپازهای میکروبی، گروه مهمی از آنزیم های باارزش بیوتکنولوژی محسوب می شوند. در تحقیق حاضر تلاش شد تا سویه های میکروبی تولیدکننده لیپاز ازنمونه های پساب های صنعتی جداسازی و شناسایی شوند. پس ازنمونه برداری از فاضلاب و پساب محل های مختلف، 16 کلونی از این نمونه ها جداسازی شد. جدایه ها برای بررسی توانایی تولید آنزیم لیپاز، همراه با یک سویه اکتینومیست به عنوان کنترل مثبت، در محیط کشت اختصاصی حاوی تویین80، کشت داده شدند. فعالیت آنزیمی براساس نمودار استاندارد لیپاز، بررسی شد. به منظور تشخیص مولکولی جدایه ها ریبوتایپینگ انجام شد. بدین منظور، DNA جدایه ها با کمک کیت، استخراج شدند و با الکتروفورز و دستگاه نانودراپ ارزیابی گردید. سپس PCR با کمک پرایمرهای ژن 16SrRNA صورت گرفته و محصول PCR تعیین توالی شده و با استفاده از بلاست توالی ها در پایگاه داده NCBI، سویه ها شناسایی شدند. از مجموع 6 جدایه، ده سویه (62/5 درصد) قادر به تولید آنزیم لیپاز و در نتیجه ایجاد هاله شفاف در محیط کشت حاوی لیپید بودند. از این میان، دو جدایه با میزان تشکیل هاله و منبع جداسازی مشابه که بیشترین رشد و فعالیت را در 144 ساعت پس از کشت نشان داده بودند، انتخاب شدند. مقادیر فعالیت آنزیمی برای باکتری جداشده از پساب کشتارگاه و پساب مکانیکی به ترتیب در بازه بین 2/99 تا 22/65 و 3/73 تا39/2 واحد بر میلی لیتر بود. باکتری های آیروموناس ورونی و کوپریاویدوس متالیدورانس به دلیل فعالیت لیپازی بسیار بالا نسبت به سویه های معرفی شده در سایر تحقیقات، به عنوان سویه های بسیارمناسب و کارآمد جهت تصفیه زیستی پساب ها پیشنهاد می گردد.