فعالیت ضد قارچی اسموتین توتون بیان شده در Escherichia coli علیه برخی قارچ های بیماری زای گیاهی

هدف از این تحقیق ارزیابی فعالیت ضدقارچی اسموتین در برابر چندین بیمارگر قارچی مهم گیاهی شامل میشد. به منظور انجام این مطالعه، ژن اسموتین از گیاه تنباکو) (Nicotiana tabacumدر باکتری) Escherichia coli (Rosetta DE3همسانهسازی و بیان گردید. به منظور بهینهسازی شرایط بیان پروتئین، از آزمون تاگوچی استفاده شد. آزمون وسترن بلات بیان پروتئین نوترکیب را مورد تایید قرار داد. بررسیها نشان داد پروتئین نوترکیب بیان شده عمدتا به شکل نامحلول اینکلوژن بادی در سلول انباشته میشود؛ لذا پس از محلول ساختن این توده ها با کمک مواد احیا کننده شرایط ایجاد ساختمان طبیعی تامین شد. اثر اسموتین نوترکیب بر قارچهای Rhizoctonia Alternaria brassicola وVerticillium dahleae ،Fusarium oxysporum ،Sclerotinia sclerotiorum ،Botrytis cinerea ،solani مورد بررسی قرار گرفته و فعالیت پروتئین خالص شده از طریق سه آزمون ضدقارچی متفاوت Disk Diffusion ،Radial Diffusionو Spore Germinationارزیابی و مشاهده شد که این پروتئین رشد قارچهای فوق را مهار میکند. همچنین آزمون همولیتیک خونی نشان داد که این پروتئین برای سلولهای پستانداران فاقد سمیت میباشد. یافته های فوق نشان میدهد که ژن اسموتین گیاه تنباکو دارای توانایی قابل توجهی در مهار رشد قارچ های بیماریزا گیاهی میباشد. همچنین این ژن میتواند درتولید گیاهان تراریخته مقاوم به قارچهای بیماریزا مورد استفاده قرار گیرد.