تولید کلون ابزار کننده ژن گلیکوپروتئین B ر(gB) ویروس هرپس سیمپلکس تیپ 1 (HSV-1) به منظور بیان پروتئین در یاخته های پستانداران

گلیکوپروتئین B ویروس HSV-1 یکی از گلیکوپروتئین های غشایی ویروس است که در عفونت زایی ویروس نقش عمده ای ایفا می کند و از اهداف سیستم ایمنی محسوب می شود. به منظور دستیابی به وکتوری که قادر به بیان پروتئین در سلول های پستانداران باشد، پژوهش حاضر انجام گرفت.
ژن گلیکو پروتئین B، استرین KOS، از داخل پلاسمبد pAc-gB خارج و به وکتور 3 pcDNA انتقال داده شد و تحت کنترل پروموتور با بررسی الگوی هضم آنزیمی وکتورهای حاصل انجام گرفت و سپس بیان پروتئین در سیستم یوکاریوت مورد بررسی قرار گرفت.
به منظور بررسی توانایی بیان ژن در سلول های پستانداران، وکتور با استفاده از لیپوزوم به درون سلول های COS-7 ترانس فکت شد و بیان پروتئین پس از 72 ساعت به وسیله روش ایمنوفلورسانس غیر مستقیم و با استفاده از آنتی بادی اختصاص HSV-1 تایید شد.
کارایی ترانس فکشن سلول های COS-7 در این پژوهش نماینگر کارآیی وکتور تهیه شده در تولید پروتئین gB بود. همچنین واکنش پروتئین های بیان شده در سطح سلول با آنتی بادی اختصاصی HSV-1 نشان دهنده ساختار آنتی ژنیک مناسب پروتئین می باشد و می توان از آن در مطالعات ایمنی زایی استفاده نمود.