تغییر بیان ژن های HSP A1A و MnSOD در تخمک MII موش سوری پس از انجماد شیشه ای با روش Cryotop

بررسی انجماد شیشه ای تخمکIIM; IIegatS esahpateM)) موش سوری با دو پروتکل مختلف و ارزیابی تاثیر آن بر تغییر بیان ژن های A1APSH و DOSnM

تخمک های IIM موش سوری بدون کمپلکس کومولوس در گروه های 51 تایی جمع آوری شده و به ترتیب در دو غلظت متفاوت از محلول های انجمادی اتیلن گلیکول 01 درصد، دی متیل سولفوکسید (OSMD; edixohpuslyhtemiD) 01درصد، سوکروز 5 مولار در گروه A (ISV; 1noituloS noitacifirtiV)، پروپاندیول 5/41 درصد، دی متیل سولفوکسید 5/41 درصد و سوکروز 5 مولار در گروه B (2SV; 2noituloS noitacifirtiV) منجمد شدند. تخمک ها پس از انجماد با قرار گرفتن در محلول حاوی سوکروز 1 مولار به مدت یک دقیقه و سپس دو محلول رقیق شده هر کدام به مدت 3 دقیقه ذوب شدند. سپس تخمک ها مورد لقاح قرار گرفته و در محیط کشت تا مرحله پرونوکلئوس پیش برده شدند. درصد زنده ماندن تخمک های منجمد و ذوب شده و درصد لقاح آنها ارزیابی و تغییر بیان ژن های (nitca β dna DODnM، A1A PSH) با روش واکنش زنجیره ای پلی مراز ترانس کریپتاز معکوس بررسی شد.

درصد زنده ماندن تخمک های موش پس از ذوب در هر گروه به طور جداگانه با گروه کنترل مقایسه شد. نتایج این مقایسه نشان می دهد که تفاوت معنی داری بین دو گروه انجمادی و کنترل وجود دارد (100/0≥p). درصد زنده ماندن در گروه ISV (7/1 ± 2/19) نسبت به گروه IISV (5/1 ± 2/98) افزایش یافت؛ اما تفاوت قابل ملاحظه ای بین دو گروه مشاهده نشد. درصد لقاح آزمایشگاهی در دو گروه انجمادی (8/5 ± 93 درصد: ISV، 7/5 ± 43 درصد: IISV) کاهش قابل ملاحظه ای نسبت به گروه کنترل (5/1 ± 2/98) (3/2 ± 63/88 درصد) داشت. تغییر بیان ژن های A1A PSH و DOSnM بررسی شد. به طور کلی میزان فراوانی ANRm در تخمک های انجمادی در طی انجماد شیشه ای کاهش یافته؛ اما بیان ژن DOSnM در مقایسه با گروه کنترل افزایش یافت. ژن A1A PSH تنها در گروه های کنترل و ISV شناسایی شد.

در نتیجه انجماد شیشه ای تخمک با روش کرایوتاپ potoyrC درصد زنده ماندن افزایش یافت. احتمالا کاهش توانایی تکامل و درصد لقاح در تخمک های منجمد و ذوب شده را می توان تغییر بیان ژن های مهم پس از ذوب دانست.