امیرهوشنگ الوندی
-
زمینه و اهداف
عفونت های دهان بین افراد در هر سنی معمول است و می تواند التهاب سیستمیک را فعال کند. میکروبیوتا از انواع میکروارگانیسم ها تشکیل شده است که نقش مهمی در متابولیسم، عملکرد سیستم ایمنی و هموستاز دارند. میکروبیوتای دهان در پلاک های آترواسکلروتیک انسان با تکنیک های مختلف شناسایی شده است. بنابراین، تمرکز مطالعه تعیین همبستگی بین پارامترهای متابولیک و ترکیب میکروبیوتای دهان در بیماران مبتلا به آترواسکلروز با روش های الکتروفورز ژل گرادیان دناتوره کننده (DGGE) بود.
مواد و روش کاردر این مطالعه مورد-شاهدی، 139 بزاق از بیماران مبتلا به تصلب شرایین و افراد سالم از بیمارستان قلب و عروق امام علی (ع) کرمانشاه جمع آوری شد. پس از استخراج DNA، محصولات PCR با استفاده از سنجش DGGE مورد بررسی و ارزیابی قرار گرفتند.
یافته هادر این مطالعه 89 نفر (36%) دارای سابقه تصلب شرایین و 50 نفر (36%) سالم بودند. بین میانگین کلسترول تام، لیپوپروتئین با چگالی کم (LDL)، قند خون ناشتا (FBS) و نیتروژن اوره خون (BUN) در دو گروه رابطه معناداری وجود داشت. همچنین تفاوت معنی داری در میانگین لیپوپروتئین با چگالی بالا (HDL) و تری گلیسیرید بین گروه های مورد مطالعه مشاهده نشد.
نتیجه گیریمطالعه ما وجود برخی جهش های مرتبط با Omicron را قبل از ظهور این واریانت در استان خوزستان ایران نشان داد. علاوه بر این، احتمال ورود انواع تایید نشده مانند اپسیلون به ایران را تقویت کرد. همچنین مرجعی برای مطالعاتی که نیاز به آگاهی از انواع در گردش در ایران دارند، ارائه کرد.
کلید واژگان: پارامترهای متابولیک, آترواسکلروز, میکروبیوتای دهان, الکتروفورز ژل گرادیان دناتوره کنندهBackground and AimOral infections are common among people of any age and can trigger systemic inflammation. The microbiota is a diverse group of microorganisms that play important roles in metabolism, immune function, and homeostasis. Oral microbiota in human atherosclerotic plaques has been identified using various techniques. Therefore, the focus of this study was to determine the correlation between metabolic parameters and oral microbiota composition in patients with atherosclerosis using Denaturing Gradient Gel Electrophoresis (DGGE) assays.
Materials and MethodsIn this case-control study, saliva samples were collected from 139 patients with atherosclerosis and healthy individuals from Imam Ali Cardiovascular Hospital, Kermanshah, Iran. After DNA extraction, PCR products were examined and evaluated using DGGE assays.
ResultsThe study included 89 (36%) patients with a history of atherosclerosis and 50 (36%) healthy individuals. There was a significant relationship between the mean total cholesterol, Low-Density Lipoprotein (LDL), Fasting Blood Sugar (FBS), and Blood Urea Nitrogen (BUN) in the two groups. However, there was no significant difference in the mean high-density lipoprotein (HDL) and Triglyceride levels between the study groups.
ConclusionOur results showed a relationship between metabolic parameters and oral microbiota composition in patients with atherosclerosis. Additionally, our results indicated that the DGGE assay is a useful method for diagnosing and comparing the oral microbiota of people with atherosclerosis and healthy individuals. Therefore, further examination of the oral microbiota is necessary to determine its potential as a biomarker for atherosclerosis.
Keywords: Metabolic Parameters, Atherosclerosis, Oral microbiota, Denaturing Gradient Gel Electrophoresis -
زمینه و اهداف
عفونت های بیمارستانی ناشی از باکتری های مقاوم به آنتی بیوتیک و همچنین گسترش سریع آن ها به عنوان یکی از تهدیدات سلامت عمومی محسوب می شود. هدف این مطالعه تعیین فراوانی ژن های کدکننده بتالاکتاماز طیف گسترده (ESBL)در باکتری های گرم منفی بود.
مواد و روش کارشناسایی و الگوی حساسیت آنتی بیوتیکی 165 ایزوله به ترتیب با روش بیوشیمیایی و دیسک دیفیوژن انجام شد. علاوه بر این، غربالگری و تایید حضور ژن های ESBL به روش تست ترکیبی دوتایی (DDCT) انجام شد. وجود ژن های کدکننده ESBL در هر ایزوله با روش واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) شناسایی شد.
یافته هااز 165 ایزوله، 83 سویه به تمام آنتی بیوتیک ها مقاوم بودند. کمترین فراوانی مقاومت در مقابل جنتامایسین و همچنین بیشترین فراوانی مقاومت در سفوتاکسیم و سفازولین مشاهده شد. از بین تمامی سویه های مورد تجزیه و تحلیل، 50 (30/30%) و 80 (48/48%) ایزوله به ترتیب از نظر فنوتیپی و ژنوتیپی ESBL مثبت بودند. شایع ترین ژن های کد کننده ESBL به ترتیب SHVOS و SHV-1 با فراوانی 34 (61/20 %) و 36 (82/21%) بودند.
نتیجه گیریفراوانی تولید ESBL و شیوع بالای ژن های blaSHV و blaCTX-M در کلبسیلا پنومونیه و اشریشیا کلی در ایزوله های باکتریایی ذکر شده در کرمانشاه رو به افزایش است. اما برخلاف برخی گزارش های قبلی از کرمانشاه، شیوع ژن های کدکننده ESBL در سودوموناس آئروژینوزا کم بود و ژن blaVEB یافت نشد.
کلید واژگان: مقاومت آنتی بیوتیکی, ژن های کد کنندهESBL, انتروباکتریاسه تولید کنندهESBL, فراوانیBackground and AimNosocomial infections caused by antibiotic-resistant bacteria and their rapid spread threaten public health. This study aimed to determine the frequency of genes encoding Extended-Spectrum Beta-Lactamase (ESBL) in gram-negative bacteria in Kermanshah city, west of Iran.
Materials and MethodsIdentification and antibiotic susceptibility pattern of 165 isolates were performed by biochemical and disk diffusion methods, respectively. Screening and confirming the presence of ESBL genes were performed according to the double disk combination test (DDCT) method. The presence of genes encoding ESBL in each isolate was identified by Polymerase Chain Reaction (PCR) method.
ResultsOut of 165 isolates, 83 strains were resistant to all antibiotics. The lowest frequency of resistance was observed for Gentamicin, while the highest frequency was observed for Cefotaxime and Cefazolin. Among all strains, 50 (30.30 %) and 80 (48.48%) isolates were phenotypically and genotypically ESBL-positive, respectively. The most prevalent genes encoding ESBL were SHVOS and SHV-1, with a frequency of 20.61 % and 21.82 %, respectively.
ConclusionThe frequency of producing ESBL bacteria and the prevalence of blaSHV and blaCTX-M genes in our studied Klebsiella pneumoniae and Escherichia coli isolates were high. However, unlike some previous reports from Kermanshah, the prevalence of ESBL-encoding genes in Pseudomonas aeruginosa was low, and the blaVEB gene was not found.
Keywords: Antibiotic resistance, ESBL-encoding genes, ESBL-producing Enterobacteriaceae, Frequency -
زمینه و اهداف
عفونت های بیمارستانی ناشی از باکتری های گرم منفی از مهم ترین چالش های تهدیدکننده سلامت قرن حاضر به ویژه پس از ظهور و گسترش سویه های مقاوم به آنتی بیوتیک هستند. بتالاکتاماز های طیف گسترده (ESBL)، یکی از مهم ترین مکانیسم های مقاومت آنتی بیوتیکی، در حال گسترش در سراسر جهان است. نظارت و جمع آوری داده ها در مورد شیوع مقاومت آنتی بیوتیکی و ژن های کدکننده مرتبط با آن ها می تواند به انتخاب استراتژی ها و سیاست های درمانی کمک کند. این مرور سیستماتیک و متاآنالیز به منظور بررسی شیوع باکتری های ESBL مثبت و ژن های مقاومت آن ها در مراکز درمانی شهر کرمانشاه، غرب ایران طراحی شد.
مواد و روش کارتمام مطالعات منتشر شده به عنوان مقالات اصیل با جستجو در پایگاه های اطلاعاتیEMBASE ، Scopus، PubMed/Medline، Google Scholar و پایگاه های فارسی SID و Magiran با استفاده از کلمات کلیدی مناسب بدون محدودیت زمانی تا 30 مارس 2022 وارد شدند. برای تجزیه و تحلیل داده ها از نرم افزار جامع متاآنالیز استفاده شد.
یافته هاشیوع باکتری های ESBL مثبت و مقاومت دارویی چندگانه (MDR) در مراکز درمانی کرمانشاه به ترتیب 34/8% و 56/1% بود. بیشترین و کمترین شیوع باکتری ESBL مثبت به ترتیب برای انتروباکتر کلوآکه (59/14%) و سودوموناس آیروژینوزا (4/55%) مشاهده شد. بیشترین و کمترین شیوع ژن های مقاومت به ترتیب برای blaOXA-51 (99/3%) و blaKPC (0/6%) مشاهده شد. بیشترین مقاومت به آنتی بیوتیک مزولوسیلین (92/2%) برآورد شد.
نتیجه گیری:
این مطالعه نشان داد که شیوع باکتری های ESBL مثبت و MDR در مراکز درمانی کرمانشاه بالا است و اطلاعات قابل توجهی را در اختیار سیاست گذاران سلامت قرار می دهد تا راه کارهای مناسب برای کاهش شیوع باکتری های مقاوم را اجرا کنند.
کلید واژگان: بتالاکتاماز طیف گسترده, باکتری های گرم منفی, مقاومت آنتی بیوتیکی, شیوع, متاآنالیزBackground and AimNosocomial infections caused by gram-negative bacteria are among the most important health-threatening challenges of the current century, particularly following the emergence and spreading of antibiotic-resistance strains. Extended-spectrum beta-lactamase (ESBL), one of the most important antibiotic resistance mechanisms, is spreading worldwide. Surveillance and gathering data on the prevalence of antibiotic resistance and their associated encoding genes could assist in selecting treatment strategies and policies. This systematic review and meta-analysis was designed to assess the prevalence of ESBL-positive bacteria and their resistance genes in medical centers of Kermanshah city, west of Iran.
Materials and MethodsAll studies published as original articles were retrieved by searching in EMBASE, Scopus, PubMed/Medline, Google Scholar, and Persian databases of SID and Magiran, using appropriate keywords All published studies in the field were included without time restriction until 30-Mar-2022. Comprehensive Meta-Analysis software was used to analyze the data.
ResultsThe prevalence of ESBL-positive and multidrug resistance (MDR) bacteria in Kermanshah medical centers were 34.8% and 56.1%, respectively. The highest and lowest prevalence of ESBL-positive bacteria was observed for Enterobacter cloacae (59.14%) and Pseudomonas aeruginosa (4.55%), respectively. The highest and lowest prevalence of the resistance genes were observed for blaOXA-51 (99.3%) and blaKPC (0.6%), respectively. The highest resistance was estimated to mezlocillin antibiotic (92.2%).
ConclusionThis study showed that the prevalence of ESBL-positive and MDR bacteria is high in Kermanshah medical centers, and it provides significant information to health policymakers to implement appropriate strategies to reduce the prevalence of resistant bacteria.
Keywords: Extended-spectrum-beta-lactamase, Gram-negative bacteria, Antibiotic resistance, Prevalence, Meta-analysis -
مقدمه
پنومونی وابسته به ونتیلاتور، شایع ترین عفونت اکتسابی بیمارستانی است که مسوول افزایش مرگ و میر بیماران بستری در بخش مراقبت های ویژه است. مطالعه ی حاضر، با هدف بررسی فراوانی ژن های MBL و ESBL و تعیین الگوهای مقاومت آنتی بیوتیکی در باسیل های گرم منفی جدا شده از ونتیلاتور در بخش (Intensive care unit) ICU بیمارستان امام رضا(ع) شهر کرمانشاه طراحی شد.
روش هاپس از جمع آوری نمونه ها و تعیین هویت باکتری ها به وسیله ی روش های استاندارد بیوشیمیایی و کشت میکروبی، 152 ایزوله ی باکتریایی شناسایی شد. شناسایی ژن های ESBL و MBL با روش فنوتیپی DDCT و روش مولکولی PCR با استفاده از پرایمرهای اختصاصی انجام شد.
یافته هاشایع ترین میکروارگانیسم جداسازی شده از بیماران (Ventilator-associated pneumonia) VAP، کلبسیلا پنومونیه (56/2 درصد) بود. در مجموع، فراوانی ژن های ESBL و MBL (74/34 درصد) 113 و (5/26 درصد) 8 بود. الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی نشان داد که 53/36 درصد ایزوله ها به سفتازیدیم، سفوتاکسیم و ایمی پنم مقاوم هستند. ژن blaSHVOS با فراوانی (49/34 درصد) 75، بیشترین فراوانی ژنوتیپی را داشت. ژن blaVIM در هیچ کدام از ایزوله ها یافت نشد.
نتیجه گیریمقاومت بالای ایزوله های اسینتوباکتر بومانی و کلبسیلا پنومونیه نسبت به آنتی بیوتیک های مذکور و شیوع بالای ژن های مولد ESBL در ایزوله های کلبسیلا پنومونیه، زنگ هشدار قابل توجهی در ICU بخش های مختلف بیمارستان امام رضا(ع) است. ظهور ژن blaPER-1 در بیماران مبتلا به VAP نگرانی دیگری در بیماران مبتلا به VAP در بخش مراقبت های ویژه ایجاد کرده است.
کلید واژگان: پنومونی وابسته به ونتیلاتور, ESBL, MBL, بخش مراقبت های ویژهBackgroundVentilator-associated pneumonia is the most common nosocomial infection that is responsible for increasing the mortality of patients admitted to the intensive care unit. The aim of this study was to evaluate the frequency of MBL and ESBL genes and to determine the patterns of antibiotic resistance in gram-negative bacilli isolated from ventilators in the ICU of Imam Reza Hospital in Kermanshah.
MethodsAfter collecting samples and identifying the bacteria by standard biochemical and microbial culture methods, 152 bacterial isolates were identified. ESBL and MBL genes were identified by phenotypic DDCT method and molecular PCR method using specific primers.
FindingsThe most common microorganism isolated from ventilator-associated pneumonia (VAP) patients was Klebsiella pneumoniae (2.56%). In total, the frequency of ESBL and MBL genes was 113 (74.34%) and 8 (5.26%). The antibiotic resistance pattern showed that 36.53% of the isolates were resistant to ceftazidime, cefotaxime and imipenem. The blaSHVOS gene with a frequency of 75 (49.34%) had the highest genotypic frequency. The blaVIM gene was not found in any of the isolates.
ConclusionThe high resistance of Acinetobacter baumannii and Klebsiella pneumoniae isolates to the mentioned antibiotics and the high prevalence of ESBL-producing genes in Klebsiella pneumoniae isolates is a significant alarm in the ICU of different wards of Imam Reza Hospital. The emergence of the blaPER-1 gene in patients with VAP has raised another worry in patients with VAP in the intensive care unit.
Keywords: Ventilator-associated pneumonia, Extended Spectrum Beta-Lactamase, Metallo-beta-lactamase, Intensive Care Unit -
زمینه و اهداف
خوراکی های تخمیری مانند ماست، پنیر، شیر تخمیری، کره شیر، کشک، کره دوغ و روغن محلی به عنوان یکی از اجزای اصلی رژیم غذایی در شهر های غرب ایران مثل کرمانشاه مصرف می شود. روغن محلی کرمانشاهی به صورت سنتی از کره دوغ به دست می آید. مروری بر متون منتشرشده نشان داد که تا به حال مطالعه ای برای جداسازی باکتری های پروبیوتیک از مراحل آماده سازی روغن محلی کرمانشاهی انجام نشده است. بنابراین هدف از انجام این مطالعه جداسازی و تعیین هویت باکتری ها با تمرکز روی باکتری های تولیدکننده اسید لاکتیک با استفاده از روش های کشت و توالی یابی بود.
مواد و روش کار15 نمونه از هر یک از محصولات ماست، کره سنتی و روغن محلی کرمانشاهی از استان کرمانشاه جمع آوری شد. هر نمونه رقیق سازی و هموژن شد و سپس روی محیط های انتخابی برای رشد باکتری های اسید لاکتیک رشد داده شد. توالی یابی بر پایه ژن 16SrRNA برای تایید نهایی هر یک از ایزوله ها استفاده گردید.
یافته هاپس از کشت روی محیط های MRS و M17 تحت شرایط هوازی و بی هوازی، 78 سویه مختلف باکتریایی جداسازی شد و به وسیله تست های بیوشیمیایی رایج تعیین هویت گردید. فراوانی باکتری های جداشده از همه نمونه ها شامل 48/71% لاکتوباسیلوس، 33/33% استرپتوکوکوس، 6/41% انتروکوکوس و 6/41% باسیلوس بود. جنس های لاکتوباسیلوس، انتروکوکوس و باسیلوس به ترتیب از 84/44%، 57/78%، 11/11% و 56/15% هر سه نوع نمونه جداسازی شد.
نتیجه گیریبر اساس یافته های ما باکتری های اسید لاکتیک و سایر میکرارگانیسم هایی که پتانسیل پروبیوتیک دارند در روغن محلی کرمانشاهی یافت می شوند. خصوصیات پروبیوتیکی این ایزوله ها و اثرات مصرف روغن محلی کرمانشاهی حاوی این ارگانیسم ها بر سلامت انسان نیاز به مطالعات و آنالیزهای بیشتری دارد. با اثبات حضور این باکتری ها ممکن است روغن محلی کرمانشاهی را در دسته مواد غذایی فراسودمند قرار گیرد.
کلید واژگان: پروبیوتیک, اسید لاکتیک باکتری ها, لبنیات, روغن محلی کرمانشاهی, توالی یابیBackground and ObjectiveDairy fermented foods such as yogurt, cheese, fermented milk, butter milk, curd, butter and ghee are used as major diet ingredients in west of IRAN, such as Kermanshah province. Ghee (Kermanshahi traditional oil or roghan-e heiwâni) is traditionally produced from butter milk of yoghurt after fermentation. Review of the literature yielded no study on isolating probiotics from Kermanshahi traditional oil preparation stages. Therefore, purpose of this study was just to focus on isolating and identifying lactic acid bacteria in these products using culture and PCR-sequencing methods.
Materials and MethodsFifteen samples from each dairy products including yogurt, butter and Kermanshahi traditional oil were collected in Kermanshah province, Iran. Each sample was diluted, homogenized, and cultured on selective medium for growing of lactic acid bacteria. 16SrRNA gene sequences analysis was carried out for final confirmation of these isolates.
ResultsAfter culturing of samples on MRS and M17 under aerobic and anaerobic condition, a total of 78 strains of bacteria were isolated and identified by conventional biochemical tests. The frequency of bacteria in all samples were 48.71% for Lactobacillus, 33.33% for Streptococcus, 6.41% for Enterococcus and 6.41% for Bacillus. Lactobacillus, Streptococcus, Enterococcus, and Bacillus genus, were isolated from 84.44%, 57.78%, 11.11% and 15.56% of all three kind of samples, respectively.
ConclusionBased on our findings, Lactic acid bacteria and other potentially probiotic microorganisms are present in Kermanshahi traditional oil. Of course the potential probiotic properties of these isolates and impact of consumption of Kermanshahi traditional oil containing those on human health need to be analyzed more. By proving the presence of probiotic bacteria in Kermanshahi oil, it may be falls in the category of functional foods.
Keywords: Dairy, Kermanshahi traditional oil, Lactic acid bacteria, PCR sequencing, Probiotics -
زمینه مطالعه
علی رغم وجود واکسن های کونژوگه ضد سویه های هموفیلوس عفونت های ناشی از هموفیلوس آنفلوانزا و هموفیلوس سومنوس چه در بعد انسانی و چه در صنعت دامپروری خسارت های اقتصادی بسیاری را به جوامع تحمیل می کند. کارا نبودن واکسن های موجود ضد همه سویه ها می تواند در گسترش عفونت ناشی از هموفیلوس موثر باشد. از نقاط ضعف این واکسن ها می توان به عدم پوشش اپی توپ های گوناگون از سویه های هموفیلوس در واکسن های موجود اشاره کرد. از این رو انتخاب یک مجموعه ای از پروتئین های حراست شده و مشترک در سویه های تهاجمی هموفیلوس آنفلوانزا و هموفیلوس سومنوس جهت پیشگویی اپی توپ ها و طراحی واکسن ضروری است.
هدفاین مطالعه با هدف طراحی واکسن پلی اپی توپی موثر بر ضد سویه های بیماریزای هموفیلوس آنفلوانزا و هموفیلوس سومنوس با بهره گیری از رهیافت های in silico انجام شد.
روش کار:
ابتدا توالی های پروتئین های مورد نظر از پایگاه های داده بازیابی شدند و به منظور به دست آوردن مناطق حراست شده با نرم افزار Clustal omega همردیف گردیدند. سپس پیشگویی اپی توپ های سلول های B و T برای 6 پروتئین ایمونوژن شامل پروتئین غشای خارجی (Outer Membrane protein, OMP6)، پروتئین پوشش سلولی (Opacity Associated Protein A, OapA)، پروتئین باند شونده به ترانسفرین (Transfern Binding Protein A, TbpA)، پروتئین D (PD) و D15 با استفاده از سرورهای مختلف ایمونوانفورماتیک صورت گرفت. اپی توپ های مشترک دارای امتیاز بالاتر با لینکرهای مناسب به یکدیگر متصل گردیدند. ویژگی های فیزیکوشیمیایی و ساختاری مدل نهایی با سرورهای مربوطه مورد بررسی قرار گرفت.
نتایج6 اپی توپ سلولCD4+ T و 3 اپی توپ سلول B از 6 پروتئین ایمونوژن برای طراحی سازه نهایی انتخاب شدند. ارزیابی های ایمونوانفورماتیک نشان داد که پپتید پلی اپی توپی طراحی شده یک پادگن بی خطر، محلول، هیدروفیل و پایدار در دماهای مختلف است که می تواند یک واکسن بالقوه باشد.
نتیجه گیری نهایی:
سازه پلی اپی توپی طراحی شده با ابزارهای ایمونوانفورماتیک می تواند به عنوان کاندید واکسن ضد هموفیلوس مورد توجه قرار گیرد.
کلید واژگان: هموفیلوس آنفلوانزا, هموفیلوس سومنوس, پلی اپی توپی, ایمونوانفورماتیک, واکسنBACKGROUNDDespite the availability of effective conjugate vaccines, Haemophilus influenza (HI) and Haemophilus somnus (HS) still result in enormous global morbidity in both human and cattle. Vaccines failure to protect against different strains can lead to the spread of Hemophilus infections. The absence of various epitopes from Haemophilus strains in existing vaccines is one of their weaknesses. Therefore, selection of a conserved and common set of proteins in the invasive strains of HI and HS is essential for predicting epitopes as potential vaccine candidate.
OBJECTIVESThe aim of this study was to design an effective polyepitopic vaccine against invasive HI and HS strains using in silico approaches.
METHODSFirst, the protein sequences were retrieved from the databases and were aligned to determine the conserved areas with the Clustal omega software. Then, B and T cell epitopes identification was done for OapA, OMP6, PD, D15, IgA1 Protease and TbpA proteins using various immunoinformatic servers. The high ranked epitopes were selected from mentioned proteins. The selected epitopes were fused together by appropriate linkers. This designed construct was analyzed for physicochemical and structural characteristics using related servers.
RESULTS6 TCD4+ and 3 B cell epitopes were selected to design the final construct from 6 common proteins. The immunoinformatics analysis revealed that the designed polyepitopic peptide is a safe, soluble, hydrophilic and thermostable antigen that could be a potential vaccine.
CONCLUSIONSThe polyepitopic construct can be considered as a vaccine candidate against Haemophilus.
Keywords: Haemophilus influenza, Haemophilus somnus, Polyepitopic, Immunoinformatics, Vaccine -
زمینه و هدفمیزان مقاومت به آنتی بیوتیک های مختلف در اشرشیاکلی به ویژه نسبت به فلوروکینولون ها به سرعت در حال افزایش است. یکی از مکانیسم هایی که در مقاومت باکتری ها به آنتی بیوتیک ها نقش دارد، سیستم های افلاکس است. هدف از انجام این مطالعه، تعیین فنوتیپی و ژنوتیپی نقش پمپ های افلاکس در ایجاد مقاومت به فلوروکینولون ها در ایزوله- های اشرشیاکلی جدا شده از بیماران بستری در بیمارستان های کرمانشاه در سال 1392 بود.مواد و روش هادر این مطالعه مقطعی، 100 ایزوله اشرشیاکلی از بیماران بستری در بیمارستان های کرمانشاه جمع آوری شدند و توسط تست های بیوشیمیایی استاندارد تعیین هویت گردیدند. الگوی حساسیت آنتی بیوتیکی با استفاده از روش دیسک دیفیوژن مطابق با دستورالعمل CLSI تعیین گردید. حضور پمپ های افلاکس به وسیله روش واکنش زنجیره ای پلیمراز بررسی گردید.یافته هامقاومت ایزوله ها نسبت به سفتازیدیم، نالیدیکسیک اسید، سیپروفلوکساسین، نورفلوکساسین، افلوکساسین، جنتامایسین و تتراسیکلین به ترتیب برابر با 73، 67، 55، 54، 45، 38 و 24 درصد بود. براساس نتایج به دست آمده از آزمایش PCR، از بین 100 ایزوله اشرشیا کلی، 99 ایزوله (99 درصد) واجد ژن acrA بودند. هم چنین، برای ژن acrB 98 درصد، برای ژن acrE 95 درصد، برای ژن acrF98 درصد، برای ژن tolC 96 درصد، برای ژن mdfA 94 درصد و برای ژن norE 96 درصد مثبت گردید.نتیجه گیریدر سویه هایی که دارای ژن acrA،acrB ، acrE، acrF، tolC، mdfA،norE مثبت بودند، میزان مقاومت به آنتی بیوتیک در حضور مهار کننده پمپ افلاکس کاهش پیدا کرد. بنابراین پمپ افلاکس در مقاومت آنتی بیوتیکی دارای اهمیت می باشد.کلید واژگان: اشرشیاکلی, افلاکس پمپ, مقاومت چند دارویی, PCRBackgroundAntibiotic resistance rates in E. coli are rapidly rising, especially with regard to fluoroquinolones. One of the mechanisms that lead to antibiotic resistance is efflux pumps. The aim of this study was phonotypic and genotypic analysis of efflux pump role in fluoroquinolones resistance of E. coli strains isolated from hospitalized patients in Kermanshah 2013.Materials And MethodsIn this cross-sectional study, 100 isolates of E. coli were collected from hospitalized patients from Kermanshah. All isolates were identified by standard biochemical tests. The antimicrobial susceptibility patterns were determined by disk diffusion method according to CLSI guidelines. The presence of Efflux pump genes was determined by a PCR method.ResultsThe rates of resistance to Ceftazidime, Nalidixic Acid, Ciprofloxacin, Norfloxacin, Ofloxacin, Gentamicin, and Tetracycline were 73%, 67%, 55%, 54%, 45%, 38%, and 24%, respectively. According to the results of PCR test, of 100 E. coli isolates, 99% of isolates were positive for acrA, 98% for acrB, 95% for acrE, 98% for acrF, 94% for mdfA, 96% for norE, and 96% for tolC.ConclusionIn Strains with positive gene acrA, acrB, acrA, acrB, tolC, mdfA, norE, the presence of efflux pump inhibitor reduced the amount of resistance to antibiotics. So, efflux pumps are important in antibiotic resistance.Keywords: Efflux Pump, Escherichia coli, MDR, PCR
-
مقدمهانتقال ژن های مقاومت دارویی از طریق اینتگرون ها، شایع ترین راه گسترش مقاومت های آنتی بیوتیکی و به دنبال آن، پیدایش گونه های دارای مقاومت دارویی چندگانه (Multidrug resistance یا MDR) است. هدف از انجام مطالعه ی حاضر، تعیین فراوانی اینتگرون های کلاس I و II در میان ایزوله های اشرشیاکلی جدا شده از عفونت های دستگاه ادراری کودکان در کرمانشاه بود.روش هادر این پژوهش توصیفی- مقطعی، 89 ایزوله ی اشریشیاکلی جمع آوری شد. پس از تایید ایزوله ها با تست های اختصاصی بیوشیمیایی، حساسیت آنتی بیوتیکی آن ها با روش دیسک دیفیوژن مورد سنجش قرار گرفت. فراوانی اینتگرون های کلاس I و II با استفاده از پرایمرهای اختصاصی آن ها و روش Polymerase chain reaction (PCR) تعیین گردید.یافته هااز میان 89 نمونه ی مورد بررسی، 53 ایزوله (3/59 درصد) دارای MDR بود. بیشترین میزان مقاومت نسبت به آمپی سیلین (4/85 درصد) و کوتریموکسازول (5/68 درصد) و کمترین میزان مقاومت نسبت به ایمی پنم (4/12 درصد) و نیتروفورانتوئین (8/16 درصد) مشاهده شد. فراوانی اینتگرون های کلاس I و II به ترتیب 9/71 و 5/3 درصد بود. ارتباط معنی داری بین فراوانی اینتگرون ها و مقاومت به تتراسایکلین و جنتامایسین وجود داشت (050/0 > P).نتیجه گیریعلاوه بر فراوانی بالای ایزوله های دارای MDR، شیوع اینتگرون های کلاس I در ایزوله های جداسازی شده ی اشرشیاکلی بیشتر بود. در نتیجه، شناسایی فراوانی اینتگرون ها و ارتباط آن ها با الگوهای مقاومت دارویی در ایزوله های باکتریایی ضروری به نظر می رسد.کلید واژگان: اینتگرون, مقاومت آنتی بیوتیکی, اشرشیاکلیBackgroundOne of the most successful advances in bacteria is transmission of antibiotic resistance genes by integrons, which leads to the emergence of multiple drug resistant (MDR) species. The aim of this study was to determine the prevalence of class 1 and 2 integron among Escherichia coli (E. coli) isolated from children with urinary tract infection (UTI) in Imam Reza hospital, Kermanshah City, Iran, in 2016.MethodsIn this cross-sectional study, 89 Escherichia coli isolates were collected. After identification by biochemical tests, and evaluating antibiotic susceptibility tests using disk diffusion method, the frequency of class 1 and 2 integron were determined using specific primers and polymerase chain reaction (PCR) methods.
Findings: Of total of 89 studied samples, 53 (59.03%) isolates were multiple-drug resistant. The highest antibiotic resistance of isolates was to ampicillin (85.4%), and co-trimoxazole (68.5%), and the lowest was to imipenem (12.4%) and nitrofurantoin (16.8%). Frequency of class 1 and class 2 integron were 71.9% and 3.5%, respectively. There was significant relationship between the frequency of integrons and resistance to tetracycline and gentamicin (PConclusionThe results showed that, in addition to the high prevalence of multiple-drug resistant isolates, the frequency of class I integron was also high in Escherichia coli species. Therefore, identifying frequency of integrons and their relationship with drug resistance patterns in bacterial isolates seems to be necessary.Keywords: Integron, Antibiotic resistance, Escherichia coli -
مقدمهیکی از شایع ترین عفونت های بیماران در بخش مراقبت های ویژه با میزان مرگ و میر بالا، پنومونی وابسته به ونتیلاتور است. هدف از انجام این مطالعه، تعیین فراوانی بتالاکتامازهای طیف گسترده در ایزوله های Klebsiella pneumonia جدا شده از نمونه های پنومونی وابسته به ونتیلاتور در کرمانشاه بود.روش هااین مطالعه، بر روی نمونه های لوله ی تراشه ی بیماران بستری در بخش مراقبت های ویژه صورت گرفت. پس از جمع آوری نمونه ها، 57 ایزوله ی Klebsiella pneumonia با استفاده از روش های استاندارد باکتری شناسی و بیوشیمیایی تایید شدند. پس از سنجش حساسیت آنتی بیوتیکی به روش انتشار دیسک، وجود آنزیم های Extended spectrum beta-lactamases (ESBL) از نظر فنوتیپی به روش آزمایش دیسک ترکیبی مشخص شد. فراوانی ژن های ESBL با استفاده از پرایمرهای اختصاصی آن ها و روش Polymerase chain reaction (PCR) تعیین شد.یافته هااز مجموع 57 ایزوله ی Klebsiella pneumonia، 22 ایزوله (6/38 درصد) با استفاده از روش فنوتیپی مولد ESBL تشخیص داده شدند. آزمایش PCR نشان داد ژن SHV با 6/31 درصد بیشترین فراوانی ژنوتیپی را داشت. بیشترین میزان مقاومت در برابر سفتریاکسون، کوتریموکسازول (9/78 درصد) و همچنین، کمترین میزان مقاومت در برابر کولیستین (5/3 درصد) بود.نتیجه گیریبا توجه به مقاومت بالای ایزوله های Klebsiella pneumonia جدا شده از نمونه های بیماران مبتلا به پنومونی وابسته به ونتیلاتور نسبت به سفالوسپورین های نسل سوم و شیوع سویه های مولد ESBL در بین این دسته از بیماران، شناسایی سویه های مولد بتالاکتامازهای وسیع الطیف و انتخاب آنتی بیوتیک های مناسب جهت درمان این بیمارن امری ضرورری به نظر می رسد.کلید واژگان: پنومونی وابسته به ونتیلاتور, الگوی مقاومت باکتریایی, بخش مراقبت ویژهBackgroundOne of the most common infections in patients with high mortality rate is ventilator-dependent pneumonia. This study aimed to determine the frequency of extended spectrum beta-lactamase (ESBL) in Klebsiella pneumonia isolated from patients with ventilator-associated pneumonia in Kermanshah City, Iran.MethodsThis study performed on tracheal tube samples of patients admitted to the intensive care units. After collecting specimens, 57 Klebsiella pneumonia isolates were confirmed via standard bacteriological and biochemical tests. After antibiotic susceptibility testing by using disk diffusion method, the presence of ESBL phenotype was determined via combined disk test. The frequency of ESBL genes was determined by using their specific primers and polymerase chain reaction (PCR) method.
Findings: From 57 isolates of Klebsiella pneumonia, 22 (38.6%) were positive for ESBL, phenotypically. The highest genotype frequency was shv gene (31.6%) determined via PCR test. The highest resistance was to ceftriaxone and co-trimoxazole (78.9%), and the lowest resistance was to colistin (3.5%).ConclusionConsidering the high resistance of Klebsiella isolated from samples of patients with ventilator- associated pneumonia against third-generation cephalosporin and the prevalence of ESBL-producing strains among these patients, identification of isolates with ESBL and suitable antibiotic selection for the treatment of this patients seem to be necessary.Keywords: Ventilator-Associated Pneumonia, Antibacterial drug resistance, Intensive care unit -
سابقه و هدفسویه های اسینتوباکتر با مقاومت چندگانه در دهه اخیر شایع شده است که ممکن است در نتیجه فعالیت پمپ های ایفلاکس باشد. مطالعه حاضر به منظور بررسی فنوتیپ و ژنوتیپ پمپ های ایفلاکس در ایزوله های گونه های اسینتوباکتر جدا شده از بیماران بستری در بیمارستان های امام رضا و طالقانی کرمانشاه در سال 1392 انجام شده است.مواد و روش هادر یک مطالعه توصیفی-تحلیلی 100 ایزوله گونه های اسینتوباکتر از نمونه های بالینی مختلف از بیمارستان های امام رضا و طالقانی کرمانشاه جمع آوری و توسط تست های بیوشیمیایی استاندارد تعیین هویت شدند. الگوی حساسیت آنتی بیوتیکی شامل ایزوله ها با استفاده از روش دیسک دیفیوژن در حضور و بدون حضور مهارکننده پمپ ایفلاکس در ایزوله ها مطابق با دستورالعمل استاندارد تعیین گردید. ژن های پمپ ایفلاکس ایزوله ها adeABC نیز با استفاده از روشPCR شناسایی شدند.یافته هامقاومت ایزوله ها نسبت به ایمی پنم 58 درصد، آمپی سیلین 63 درصد، سفتازیدیم 94 درصد، اریترومایسین 55 درصد، کلاریترومایسین 36 درصد، آزیترومایسین 29 درصد، جنتامایسین 83 درصد، توبرامایسین 54 درصد و تتراسیکلین 50 درصد بود. بیش ترین و کم ترین میزان مقاومت به ترتیب نسبت به سفتازیدیم و آزیترومایسین بود. بر اساس نتایج به دست آمده از آزمایش PCR، از بین 100 ایزوله گونه های اسینتوباکتر، 68 درصد دارای ژن adeA، 88 درصد دارای ژن adeB و 86 درصد حامل ژن adeC بودند.استنتاجفراوانی مقاومت به وسیله پمپ ایفلاکس در سویه های حمل کننده ژن های adeA، adeB و adeC بیش تر بود. بیش ترین میزان مقاومت در اثر پمپ های ایفلاکس در آنتی بیوتیک های سفتازیدیم و تتراسایکیلین، به میزان به ترتیب 13 درصد و 12 درصد دیده شد.
کلید واژگان: گونه های اسینتوباکتر, پمپ ایفلاکس, انتشار در دیسکBackground andPurposeAcinetobacter spp. is a non-fermentative gram- negative bacterium involving in various nosocomial infections. During last decade increasing number of multidrug-resistant isolates of Acinetobacter spp. have been reported. This type of resistance is possibly related to efflux pumps. This research aimed at identifying the phonotypic and genotypic characteristics of efflux pump in resistance to antibiotics in Acinetobacter spp. isolated from hospitalized patients in Kermanshah, 2013.Materials And MethodsIn this descriptive-analytical study, 100 Acinetobacter spp strains were isolated from different clinical samples including blood, wound, and liquid specimens of hospitalized patients in Imam Reza and Taleghani hospitals in Kermanshah. All isolates were identified by standard biochemical tests. The antimicrobial susceptibility patterns were determined by disk diffusion according to CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) guidelines in presence and absence of CCCP (carbonyl cyanide m-chlorophenylhydrazone) as an efflux pump inhibitor. PCR was used to detect the adeABC efflux pump genes.ResultsThe rate of resistant to imipenem was 58%, ampicillin 63%, ceftazidime 94%, erythromycin 55%, clarithromycin 36%, azithromycin 29%, gentamicin 83%, tobramycin 54%, and tetracycline 50%. Highest and lowest levels of resistance were observed for ceftazidime and azithromycin, respectively. Among the Acinetobacter spp. 68% were positive for adeA gene, 88% for adeB gene, and 86% for adeC gene.ConclusionFrequency of resistance using efflux pump inhibitor was found to be higher in adeA, adeB, and adeC positive Acinetobacter spp. isolates. The highest rate of resistance by efflux pump was observed in ceftazidime (13%) and tetracycline (12%).Keywords: Acinetobacter spp., efflux pump, disk diffusion -
بررسی ارتباط فاکتور چسبنده babA2 با cagA و vacAs1 در بیماری های گاسترودئودنال ناشی از هلیکوباکتر پایلوریسابقه و هدفژن های cagA، vacAs1و babA2 در هلیکوباکتر پایلوری از مهم ترین فاکتورهای ویرولانس مرتبط با بیماری های گاسترودئودنال هستند. میزان فراوانی و ارتباط این ژن ها با انواع بیماری های گوارشی در مناطق جغرافیایی مختلف، متفاوت است.هدف از این مطالعه تعیین ارتباط ژن های cagA،vacAs1 و babA2 در هلیکوباکتر پایلوری با بیماری های گاسترودئودنال بوده است.مواد و روش هادر مطالعه توصیفی مقطعی حاضر 1500 بیمار مبتلا به بیماری های گاسترودئودنال مراجعه کننده به بیمارستان امام خمینی (ره)کرمانشاه در سال 1392 وارد مطالعه شدند. از ناحیه کورپوس و آنتروم معده نمونه بیوپسی گرفته شد. نمونه های بیوپسی در محیط انتخابی کشت و به مدت 3تا 5 روز انکوبه گردید. کلونی های مشکوک به هلیکوباکتر پایلوری از لحاظ مورفولوژی، تست های بیوشیمیایی و PCR ژن ureC مورد تایید و فراوانی ژن های cagA، vacAs1 و babA2 با استفاده از پرایمرهای اختصاصی به روش PCR مورد بررسی قرار گرفتند.یافته هافراوانی ژن های cagA، vacAs1 و babA2 در72 ایزوله هلیکوباکتر پایلوری مورد بررسی به ترتیب 89درصد، 58.3 درصد و 68 درصد بود. ارتباط معنی داری بین این ژنوتیپ ها و گاستریت و زخم پپتیک مشاهده نشد. فراوانی حضورترکیب سه تایی این ژن ها 3/ 40درصد بود و هم چنین babA2 با ژن های cagA، vacAs1 به ترتیب در 66 درصد و 43 درصد موارد حضور داشت.استنتاجحضور ترکیب سه تایی ژن های babA2، cagA و vacAs1 در ایزوله های هلیکوباکتر پایلوری از بیماران مبتلا به زخم پپتیک بسیار بیش تر از بیماران مبتلا به گاستریت است. هر چند این تفاوت از نظر آماری معنی دار نبود اما به منظور دست یافتن به یک نتیجه بدون تناقض نیاز به یک مطالعه گسترده تر وجود دارد.
کلید واژگان: هلیکوباکتر پایلوری, babA2, cagA, vacAs1, بیماری های گاسترودئودنالCorrelation of babA2 with cagA and vacAs1 in Helicobacter pylori Isolated from Cases of Gastroduodenal DisordersBackground andPurposecagA, vacAs1 and babA2 in Helicobacter pylori are important virulence factors associated with gastrointestinal diseases. The prevalence of these genes and their association with gastrointestinal disease is different around the world.Materials And MethodsIn a cross-sectional study, 1500 patients with gastroduodenal disorders were enrolled. They attended Imam Khomeini Hospital in Kermanshah 2013. Biopsy specimens were obtained from the antrum and corpus of stomach. The specimens were inoculated onto selective medium for 3-5 days. The suspected colonies of Helicobacter pylori were identified by morphology, biochemical tests and presence of ureC gene. The frequencies of cagA، vacAs1 and babA2 genes were surveyed using PCR.ResultsThe frequencies of cagA, vacAs1 and babA2 genes were 89%, 58. 3%, and 68%, respectively. There was no significant correlation between cagA, vacAs1 and babA2 with gastric and peptic ulcers. The frequency of triple-positive strains of cagA, vacAs1 and babA2 was 40. 3%. Also, babA2 with cagA and vacAs1a were found in 66% and 43%, respectively.ConclusionTriple-positive strains in H. pylori isolates were more frequent in patients with peptic ulcer compared to those of the gastritis but this difference was not significant. However, further investigations are required to clarify these results.Keywords: Helicobacter pylori, babA2, cagA, vacAs1, gastroduodenal diseases -
زمینه و هدفهلیکوباکتر پیلوری اولین باکتری سرطان زای شناخته شده و عامل بیماری های گاسترودئودنال متعددی است. هدف از این پژوهش ارزیابی محیط کشت غنی شده با تخم مرغ به منظور جداسازی هلیکوباکتر پیلوری از نمونه های بیوپسی گرفته شده از بیماران مبتلا به بیماری های گاسترودئودنال و مقایسه آن با تست اوره آز سریع بوده است.روش بررسیاین مطالعه مقطعی (توصیفی- تحلیلی) بر روی 192 بیمار مراجعه کننده به بخش آندوسکوپی بیمارستان امام خمینی کرمانشاه در سال1391 انجام شد. از هر بیمار دو نمونه بیوپسی از ناحیه آنتروم و دو نمونه بیوپسی از ناحیه کورپوس گرفته شد. نمونه های بیماران با استفاده از آزمون های تست اوره آز سریع و کشت در محیط انتخابی کلمبیا آگار غنی شده با تخم مرغ و حاوی آنتی بیوتیک مورد ارزیابی قرار گرفت. پس از کشت از رنگ آمیزی گرم و آزمایشات بیوشیمیایی به منظور تعیین هویت نهایی هلیکوباکتر پیلوری استفاده گردید. برای به دست آوردن حساسیت، ویژگی و کارآیی از نرم افزارهای kappa calculator و SPSS استفاده شد.یافته هااز مجموع 192 نمونه بیوپسی گرفته شده 98 نمونه (51/10 درصد) در آزمون اوره آز سریع مثبت و 87 نمونه (45/31 درصد) به وسیله کشت مثبت شدند. حساسیت، ویژگی، ارزش اخباری مثبت و منفی روش کشت به ترتیب 76/5، 87/2، 86/2و 78/0 درصد و کارایی این روش 81/0 درصد می باشد.نتیجه گیریاین مطالعه نشان می دهد که محیط کلمبیا آگار غنی شده با تخم مرغ به عنوان محیط کشت اختصاصی مناسب برای جداسازی هلیکوباکتر پیلوری می باشد. این محیط کشت دارای حساسیت، ویژگی و کارآیی بالایی است و از لحاظ هزینه مقرون به صرفه بوده و نیز از جهت تهیه کردن به راحتی در دسترس می باشد.
کلید واژگان: هلیکوباکتر پیلوری, کشت, کلمبیا آگار تخم مرغ دار, تست اوره آز سریعBackground And AimsHelicobacter pylori is the first known carcinogenic bacterium and cause of several gastroduodenal disorders. Therefore, detection and treatment of H. pylori infection is very important. The aim of this study was to evaluate egg yolk enriched columbia agar for isolation of H. pylori from gastric biopsy specimens of patients suffering from gastroduodenal disorders referring to Imam Khomeini Hospital, Kermanshah and comparison with rapid urease test.MethodsThe study was an analytic descriptive cross-sectional survey that was carried out on 192 patients referred to Imam Khomeini Hospital in Kermanshah in 2013. Two gastric antrum biopsies and two corpus biopsies were taken from each patient and H. pylori infection was detected using rapid urease test and culture on egg yolk enriched columbia agar supplemented with antibiotics. After culture gram staining method and biochemical tests were used to detect identification of H. pylori. Data were analyzed using kappa calculator and SPSS software to calculate sensitivity and specificity.ResultsThe rates of diagnosis of H. pylori infection in 192 biopsy specimens taken from patients with gastroduodenal diseases by rapid urease test and culture were 51.10% and 45.31% respectively. The sensitivity, specificity, and positive and negative predictive values of the culture were 76.5%, 87.2%, 86.2, and 78.0% respectively. The results showed that the test accuracy (effectiveness) of the method was 81%.ConclusionThis study indicates that egg yolk enriched columbia agar is an appropriate medium with high sensitivity, specificity and efficiency for isolation of H. pylori that is a low-cost and available culture medium.Keywords: Helicobacter pylori, Culture, Egg yolk enriched Columbia, Rapid urease test -
زمینه و هدفاکثر تست های موجود برای تشخیص پنومونی لژیونلایی، با مشکلات زیادی از جمله حساسیت و ویژگی پائین و عدم توانایی در فراهم نمودن نتیجه در یک زمان کلینیکی مناسب مواجه هستند. از آنجایی که لیپوپروتئین مرتبط با پپتیدوگلیکان (PAL) لژیونلا پنوموفیلا در درون ادرار ترشح شده و به عنوان یک آنتی ژن در تمام سویه های آن وجود دارد. لذا برای تشخیص بیماری لژیونر از طریق ادرار مورد توجه قرار گرفته است. هدف از این مطالعه بهینه سازی بیان و تخلیص پروتئین نوترکیب PAL باکتری لژیونلا پنوموفیلا بوده است.روش بررسیدر این مطالعه تجربی آزمایشگاهی بیان پروتئین PAL با تغییر در پارامترهای دانسیته سلولی، مدت زمان القاء، دمای رشد، غلظت ایزوپروپیل بتا دی تیوگالاکتوپیرانوزید (IPTG) و نوع محیط کشت مورد بررسی قرار گرفت. پس از کلونینگ، عصاره پری پلاسمی تهیه و پروتئین نوترکیب PAL با استفاده از ستون رزین نیکل نیتروتری استیک اسید (NTA) تخلیص گردید. در نهایت پروتئین نوترکیب PAL با آزمایش وسترن بلاتینگ بررسی شد.یافته هابا استفاده از محیط کشت Terrific Broth، شروع القاء در جذب نوری 6/0 (طول موج 600 نانومتر)، غلظت یک میلی مولار ماده القاء کننده IPTG، دمای رشد 25 درجه سانتیگراد و مدت زمان 15 ساعت پس از القاء، بهترین بیان پروتئین PAL بدست آمد. پروتئین پری پلاسمی نوترکیب PAL با استفاده از ستون رزین NTA با خلوص بیش از 80% تخلیص گردید. نتایج آزمایش وسترن بلاتینگ نیز نشان داد که پروتئین نوترکیب PAL تخلیص شده به طور اختصاصی با آنتی بادی anti-His6-peroxidase شناسایی گردید.نتیجه گیریبا تخلیص پروتئین PAL به میزان بیش از 80% می توان به منظور بررسی پتانسیل آن در تشخیص بیماری لژیونر و تهیه کیت تشخیصی بر اساس الایزا از آن استفاده نمود.
کلید واژگان: بهینه سازی, بیان, تخلیص, لیپوپروتئین مرتبط با پپتیدوگلیکان, لژیونلا پنوموفیلاBackground And AimsThere are many problems with most of the available diagnostic tests used to diagnose Legionella pneumonia, including inadequate sensitivity and specificity, and inability to provide a result in a clinically useful time period. Legionella pneumophila PAL protein has been considred as a target for detecting of Legionella infection from urine specimen, because it is conserved sequence and is secreted into the urine. The aim of this study was to optimize expression and purification of L. pneumophila PAL protein.MethodsIn this experimental study, optimizing of 5 parameters (cell density, induction time, growth temperature, IPTG concentration and type of medium) was performed. After expression, periplasmic extract was prepared and recombinant PAL protein purified using Ni2+-charged resin column. Finally, recombinant PAL protein was verified by Western blotting.ResultsIn terrific broth medium, the optimum condition of r-PAL protein induction was occurred at an OD600 of 0.6, 1mM IPTG concentration and 15 hours incubation at 25ºC Recombinant periplasmic PAL protein was highly purified (>80%) using Ni-NTA column. Western blotting analysis showed that recombinant PAL protein was also specifically recognized by anti-His6-peroxidase antibody.ConclusionBy purification of recombinant PAL protein in purity greater than 80% it can be used to evaluate its capacity in diagnosis of Legionella infection and preparation of diagnostic kit.Keywords: Optimization, Expression, Purification, Peptidoglycan associated lipoproteinLegionella pneumophila -
هدفعفونت با هلیکوباکتر پیلوری در سطح جهان گسترده است و بیشترین عامل بیماری زایی در عفونت های سوء هاضمه التهاب معده (گاسترودئودنال) است. گاهی شیوع آن تا 80 درصد بعضی از جمعیت ها را در بر می گیرد اما تنها 10 تا 20 درصد از این افراد به بیماری های مرتبط با این باکتری مبتلا می شوند. همچنین عفونت های حاصل از هلیکوباکتر پیلوری مانند زخم گوارشی، التهاب معده، التهاب دوازدهه و سوء هضم است و تفاوت در بیماری زایی هلیکوباکتر پیلوری به عوامل میزبان و بیماری زایی باکتری وابسته است. هلیکوباکتر پیلوری براساس ژن های vacA و cagA به سویه (تیپ)های متعددی تقسیم بندی می شود که بیماری زایی متفاوتی دارند. وجود این ژن ها در سویه های هلیکوباکتر پیلوری ممکن است برای تشخیص نوع باکتری بیماری زا و غیر بیماری زا به کار برده شود. هدف این تحقیق بررسی فراوانی ژن تولیدکننده سیتوتوکسین واکوئلی (vacA) در ژنوتیپ سویه های هلیکوباکتر پیلوری است که از میان بیماران مراجعه کننده به مجتمع آموزشی، پژوهشی و درمانی حضرت رسول اکرم (ص)، پذیرفته شده در بخش داخلی همراه با عفونت های زخم گوارشی، التهاب معده، التهاب دوازدهه و سوء هاضمه انجام گرفت.مواد و روش هادر این مطالعه نمونه بیوپسی ناحیه آنتروم معده از180 بیماران مراجعه کننده به بخش داخلی مجتمع آموزشی، پژوهشی و درمانی حضرت رسول اکرم (ص)، وابسته به دانشگاه علوم پزشکی ایران در تهران که به طور معمول تحت آندوسکوپی گوارشی- معدی قرار گرفته اند، جمع آوری شد. پس از کشت و جداسازی سویه های مثبت هلیکوباکتر پیلوری با آزمایش های استاندارد و استخراج DNA باکتری، حضور ژن vacA و نیز تیپ های مختلف آن با استفاده از روش PCR تعیین شد.نتایجدر این مطالعه از نمونه های 180 بیمار بیوپسی 92 سویه هلیکوباکتر پیلوری جدا (51 درصد) و توسط روش های بیوشیمیایی تعیین هویت شد. نمونه ها از زخم گوارشی (79 درصد)، التهاب معده (60 درصد)، التهاب دوازدهه (90 درصد) و سوء هاضمه (30 درصد) بود که 87 سویه هلیکوباکتری پیلوری (94 درصد) دارای ژن vacA هستند و بیشتر ژنوتیپ ها هم در ژن vacA است. همچنین 59 نمونه سویه ها (64 درصد) ژنوتیپ m2/s1 را نشان داده است. 57 (62 درصد) سویه از این 92 سویه هلیکوباکتر پیلوری متعلق به تیپI بوده و 31 (33 درصد) سویه ها در تیپIV و 3 (26/3 درصد) نمونه در تیپ II و 2 (17/2 درصد) نمونه در تیپ IIIقرار گرفتند.نتیجه گیرینتایج این مطالعه، تفاوت بین فراوانی تیپ I وIV، نشان دهنده بیماری زایی بیشتر سویه های تیپ I (62 درصد) است و در بیماران مبتلا به زخم گوارشی درمقایسه با سایر عفونت ها، به طور معنی داری اختلاف دارد (01/0P≤).
کلید واژگان: PCR, هلیکوباکتر پیلوری, vacA cytotoxinObjectiveHelicobacter pylori is a major etiological agent in gastro-duodenal disorders, and has spread in the world. The prevalence of infection with H. pylori is more than 80% in some populations, but only 10% to 20% of them are infected with this organism. Also infection with this pathogen is associated with peptic ulcer disease (PUD), Gastritis (G), Duodenitis (Du), and non-ulcer dyspepsia (NUD). The development of diseases depends on the virulence of the infecting H. pylori strain and the susceptibility of the host. The vacuolating cytotoxin and the cytotoxin associated protein, encoded by vacA and cagA genes are important virulence determinants of H. pylori which are divided into different pathogenic types, to cause varities of infections. This may be used as a marker of infection and could be used to distinguish between pathogenic and nonpathogenic strains of H. pylori in Iran. The aim of this study was to assess the prevalence of vacA genotype of H. pylori and its development of PUD, G, Du, and NUD from Iranian patients who were admitted to Hazrat Rasoul Akram (peace upon him) as an educational and research society, affiliated to Iran University of Medical Sciences and Health Services (IUMS) in Tehran, Iran.Materials And MethodsDuring this study specimen biopsies were collected from 180 patients who underwent routine gastrointestinal endoscopies to the internal medicine ward, Hazrat Rasoul Akram Hospital, IUMS, Tehran, Iran. Positive H. pylori strains were identified by cultured isolates, standard biochemical methods, and molecular typing was performed by PCR technique to detect vacA gene and its alleles.ResultIn this study out of 180 samples of 92 H. pylori strains were isolated and identified by -
مقدمهعفونت با هلیکوباکتر پیلوری عموما با التهاب معده همراه است؛ اما تنها در برخی مواقع منجر به ایجاد بیماری های دارای اهمیت بالینی مانند زخم دوازدهه و زخم معده می شود. توسعه بیماری به بیماریزایی سویه هلیکوباکتر پیلوری عفونی کننده فرد، حساسیت میزبان و عوامل کمکی محیطی بستگی دارد. پروتئین وابسته به سیتوتوکسین (cytotoxin associated gene protein) که توسط ژن cagA کد می شود، عامل بیماریزایی مهمی است که تنها توسط دسته ای از سویه های هلیکو باکتر پیلوری کد می شود و در بعضی از جمعیتها به صورت مارکر بیماریزایی سویه های هلیکوباکتر پیلوری استفاده شده است. هدف از این مطالعه، بررسی شیوع CagA در میان سویه های هلیکوباکترپیلوری جداشده از بیماران مبتلا به بیماری های دستگاه گوارش فوقانی و بررسی ارتباط حضور این ژن و شدت بیماری در بیماران ایرانی است.مواد و روش هادر این تحقیق از 180 بیمار، نمونه بیوپسی از ناحیه آنتروم معده گرفته شد. پس از جداسازی سویه های هلیکوباکترپیلوری از نمونه بیوپسی بیماران، DNA بآکتری به روش استاندارد استخراج گردید و حضور ژن CagA با استفاده از روش PCR مورد بررسی قرار گرفت.نتایجاز مجموع 180 بیمار 92 سویه هلیکوباکتر پیلوری جدا شد و توسط واکنش های بیوشیمیایی تعیین هویت گردید. 70% سویه های دارای ژن CagA بودند. تمام 19 بیمار با زخم دوازدهه و عفونت هلیکوباکتر (100%) در حالی که 24 بیمار از 72 بیمار با سوهاضمه و عفونت هلیکو باکتر(CagA (61% مثبت داشتند (p<0.01).نتیجه گیریتفاوت معنادار بین فراوانی ژن CagA می تواند نشان دهنده افزایش خطر ابتلا به زخم های گوارشی در افراد عفونی با سویه های هلیکوباکترپیلوری دارای این ژن باشد.
کلید واژگان: هلیکوباکتر پیلوری, زخم گوارشی, cagAIntroduction andAimsHelicobacter pylori commonly is associated with gastritis: but only sometimes it causes clinically significant diseases such as gastric and duodenal ulcer. The development of disease depends on the virulence of the infecting H. pylori strain, the susceptibility of the host, and environment co-factors. The cytotoxin associated protein encoded by cagA gene is an important virulence factor that is produced by some H. pylori strains, and has been used as virulence marker in some populations. The aim of the study was to examine the prevalence of cagA gene in the isolated strains of H. pylori from patients with dyspeptic disease and to investigate the association of cagA gene and the severity of H. pylori related diseases in Iran.Materials And MethodsIn this study, biopsy specimens were obtained from the antrum of 180 patients. After isolation of H. pylori and its DNA by standard methods, polymerase chain reaction (PCR) technique was used for detection of cagA bacterial gene.Results92 out of the 180 patients had H. pylori strains. 70% were cagA gene positive. All patients with peptic ulcer (100%) and 44 out of 72 (61%) patients with non-ulcer dyspepsia were cagA positive (p<0.01).ConclusionsThere was significant difference in frequency of cagA gene in peptic ulcer disease and non-ulcer dyspepsia (p‹0.01). It showed that the risk of PUD in patients with cagA+ H. pylori infection may be higher than in those with cagA- H. pylori infection.Keywords: Helicobacter pylori, PUD, CagA
- در این صفحه نام مورد نظر در اسامی نویسندگان مقالات جستجو میشود. ممکن است نتایج شامل مطالب نویسندگان هم نام و حتی در رشتههای مختلف باشد.
- همه مقالات ترجمه فارسی یا انگلیسی ندارند پس ممکن است مقالاتی باشند که نام نویسنده مورد نظر شما به صورت معادل فارسی یا انگلیسی آن درج شده باشد. در صفحه جستجوی پیشرفته میتوانید همزمان نام فارسی و انگلیسی نویسنده را درج نمایید.
- در صورتی که میخواهید جستجو را با شرایط متفاوت تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مطالب نشریات مراجعه کنید.