سلیمه آهنگران

Mycoplasma pneumoniae is one of the major species of mycoplasmas which could contaminate cell cultures. Identification of
M. pneuminae is significant because Mycoplasmas could contaminate and have unsuitable effect on the cell cultures. Rapid detection of these contaminations is so important and it could be significant role in preventing and controlling of contamination in cell cultures. The aim of this study is isolation and detection of
M .pneumoniae by culture and PCR. 82 cell cultures collected and cultured in PPLO broth media supplemented for M. pnemoniae isolation.

The bacteria DNAs were extracted by phenol/chloroform method and the PCR assay amplifying the conserved region of 16S rRNA gene was applied for the detection of Mycoplasma genus in 163bp fragment and M. pnemoniae in 543bp fragment by using of MPF and MPR primers which obtained from P1 adhesin gen.

Of the 82 samples 48(58.5%) yielded one of the potentially pathogenic Mycoplasmas evaluated for using Mycoplasma genus PCR as diagnostic method, and from 48 samples which were positive in genus of Mycoplasma, M. pneumoniae did not detect  from those sample by using those primers and there is not any M. pnemoniae detected in this study.

Also results of this study indicate that PCR could be an alternative method instead of the culture because according to the results of this study, PCR has high accuracy and speed for detecting M. pneumoniae.

La maladie agalactie est lune des maladies les plus infectieuses chez les moutons et les boucs. Cette maladie est dans la catégorie des infections à mycoplasme et est habituellement endémique. Mycoplasma agalactiae est la principale cause de cette maladie chez les boucs. Le but de cette étude était lisolement et lidentification du Mycoplasma agalactiae à partir du sperme de bouc. Au total, 39 échantillons de sperme de boucs ont été prélevés. Une culture cellulaire a été effectuée sur tous les échantillons dans un milieu de culture adapté et spécifique (PPLO Broth) au Mycoplasma agalactiae. Après extraction de lADN des bactéries, des tests PCR ont été menés sur tous les échantillons en utilisant des amorces spécifiques à une séquences du gène 16S rRNA de 163 pb de longueur pour l’identification du genre Mycoplasma et une deuxième de 375 pb composant une partie du gène d’une lipoprotéine spécifique à l’espèces Mycoplasma agalactiae. Sur un total de 39 échantillons analysés, 29 échantillon (74.3%) étaient positifs dans le mileu de culture PPLO. Nos analyses par PCR spécifique au genre Mycoplasma ont révélé que 38 des 39 échantillons (97.4%) étaient positifs parmi lesquels 6 (15.3%) étaient également positifs au test PCR spécifique à l’espèce Mycoplasma agalactiae. Ce travail représente la première étude sur lisolement et lidentification du Mycoplasma agalactiae présent dans le sperme des boucs en Iran. Les résultats de cette étude ont montré que le sperme pourrait être un endroit approprié pour la présence de cet agent pathogène et sa transmission à la femelle. Par conséquent, ce facteur peut être considéré comme lune des causes potentielles dinfertilité chez les chèvres.