محبوبه ساریجلو
-
سابقه و هدففلج شل حاد (Acute Flaccid Paralysis) توسط عوامل مختلفی ایجاد می شود که مهم ترین عامل آن پولیو ویروس می باشد. هدف از پژوهش ارزیابی عوامل غیر پولیویی ایجاد کننده فلج در ایران می باشد.مواد و روش هادر این تحقیق به منظور بهبود در قدرت جداسازی انتروویروس های احتمالی موجود در مدفوع کودکان مبتلا به فلج شل حاد، تمام نمونه های مدفوع این کودکان، به پنج رده سلولی L20B، RD، Hep-2، Vero و GMK تلقیح شدند و با روش میکرونوترالیزاسیون مورد ارزیابی قرار گرفت.یافته هابا تلقیح دو نمونه از هر یک از 458 مورد بیمار زیر 15 سال مبتلا به فلج شل حاد به پنج رده سلولی ذکر شده، در کل 34 مورد انتروویروس از گونه ها و سروتایپ های مختلف جداسازی گردید. 1/7% از کل موارد مبتلا به AFP از نظر کشت سلولی و جداسازی انتروویروس ها مثبت بودند. جنسیت نقش موثری در جداسازی انتروویروس ها نداشت. اکثر موارد جداسازی ویروس ها مربوط به گروه سنی 5-0 سال بود و با افزایش سن، از تعداد موارد جداسازی این ویروس کاسته شد. بیشترین ویروس های جدا شده مربوط به پولیوویروس ها (12مورد) و اکوویروس ها (12 مورد) بود. در این پژوهش نشان داده شد که موارد شناخته شده فلج باقیمانده (Residual Paralysis=RP) بیشتر توسط اکوویروس ها ایجاد می شوند. همچنین اختلاف معنی داری در تعداد موارد جداسازی پولیوویروس واکسن در افراد مبتلا به RP و افراد غیرمبتلا وجود نداشت. از این رو نشان داده شد واکسن هایOPV مورد استفاده در کشور از ایمنی کافی برخوردار است. موارد جداسازی کوکساکی ویروس ها در نمونه های بالینی نیز بین افراد مبتلا به RP و افراد غیرمبتلا اختلاف معنی داری نداشت.نتیجه گیریبه دلیل معنی دار بودن اختلاف جداسازی انتروویروس های غیرپولیویی بین دو گروه دارای فلج باقیمانده مثبت و منفی، نقش این ویروس ها در ایجاد فلج باقیمانده ثابت می شود.
کلید واژگان: فلج شل حاد, انتروویروس هایغیرپولیویی, کشت سلولیBackground And ObjectivesAFP (Acute flaccid paralysis) is a suddenly weakness of any organs ofbody that its symptoms reach to peak after 4-5 day, but it dont progress. AFP has much etiology that Poliovirus is more important than others. At currently, Poliovirus has been eradicated in most countries, and then we must analysis role of nonpolio agent in this disease.Material And MethodsIn this work, all of stool specimens of AFP patient (2003) inoculate to five cell line (L20B, RD, Hep-2, Vero and GMK). And have evaluted with micronutrilization tests.ResultsWe inoculate two specimens from any 460 case fewer than 15 years AFP patient to these five lines. Ultimately, we isolated 34 different species and serotypes of Entroviruses. Upon this result, 7.1% of all cases were positive for cell culture and isolation of Entroviruses. Sexuality doesnt have an effective role in isolation of Entroviruses. Most of these viruses isolated from less than 0-5 year's children and it decline by increase in age. Echoviruses (12 cases) and Polioviruses (12 cases) have been isolated more than others.ConclusionWe showed a meaningful difference between RP (Residual Paralysis) positive and RP negative cases. Upon this result, we showed nonpolioEntrovirusescan cause RP. It doesnt have meaningful difference isolation of Vaccine Poliovirus between RP positive and RP negative patient. Then we showed OPV vaccines used in Iran, have enough safety. The difference in isolation of Coxsacievirus between RP positive and RP negative is not meaningful. We demonstrate Echoviruses can cause AFP in patient fewer 5 years, because the difference in isolation of Echoviruses between RP positive and RP negative patient is meaningful. -
در بعضی از کشورهای دنیا با وجود عدم جداسازی ویروس پولیوی وحشی از نمونه های بالینی، گردش خفته ویروس در نمونه های فاضلاب گزارش شده است. به همین دلیل سازمان جهانی بهداشت جهت تایید نهایی ریشه کنی ویروس فلج اطفال، پایش محیطی نمونه های فاضلاب و آب های سطحی را پیشنهاد نموده است. در این پژوهش با توجه به چرخش ویروس پولیوی وحشی در دو کشور افعانستان و پاکستان و همچنین احتمال ورود این ویروس به ایران، جهت اطمینان از ریشه کنی ویروس پولیوی وحشی، پایش محیطی در شهر تهران انجام شده است.روش کاردر این پژوهش63 نمونه از 6 سیستم تصفیه فاضلاب اصلی شهر تهران با روش Grab sample در مدت یک سال تهیه شد و با روش های مستقیم و دو روش تغلیظ رسوبی و دوفاز، ویروس پولیو در رده های سلولی حساس شناسایی گردید. سپس ویروس های پولیوی جدا شده با روش میکرونوترالیزاسیون تعیین تیپ و با روش های الایزا و پروب هیبریدیزاسیون افتراق داخل تیپی انجام شد.یافته هااز مجموع کل نمونه ها، تنها از 14 مورد (22/22٪) ویروس پولیو جداسازی گردیدکه خوشبختانه هیچ کدام ویروس وحشی نبودند. از این تعداد 6 (52/9٪)، 13 (63/20٪) و14 (22/22٪) ویروس پولیو به ترتیب با روش مستقیم، تغلیظ رسوبی و دوفاز جداسازی شد. بیشترین فراوانی ویروس های جدا شده مربوط به پولیوی تیپ یک و دو (هر کدام با فراوانی 28/14٪) و پولیوی تیپ سه (با فراوانی 43/71٪) بود.نتیجه گیرینتایج نشان دهنده سطح مناسب پوشش ایمن سازی در ایران و همچنین موید پایش مناسب انجام شده در سال های اخیر در کشور است. گل واژگان: پایش محیطی، ویروس پولیو، فاضلاب، تهران.
کلید واژگان: پایش محیطی, ویروس پولیو, فاضلاب, تهرانIntroductionIn some countries, wild polioviruses have been isolated from environment without being recovered from clinical cases. Therefore, to confirm polio eradication, WHO has recommended environmental surveillance using sewage specimens and surface water. Due to wild Poliovirus circulation in Afghanistan and Pakistan and the probability of wild virus entrance to Iran, and also to assure wild poliovirus eradication, Tehran was chosen as the target area.MethodsIn this study, 63 sewage samples were obtained from 6 main sewage disposals in Tehran by grab sampling and direct, pellet, two-phase method in sensitive cell lines. The isolated viruses were serotyped by microneutralization method and differentiated intratypically by ELISA and probe hybridization techniques.ResultsFrom all specimens, only 14 (22.22%) were identified as poliovirus, none of which were wild type. From these polioviruses, 6(9.52%), 13(20.63%) and 14(22.22%) were isolated from direct, pellet and two-phase concentrated specimens, respectively. The most frequent viruses were Polio1 and Polio2 (14.28%) and Polio 3(71.43%).ConclusionResults have revealed the efficacy of immunization coverage and surveillance programs in Iran. -
زمینه و هدف
درکشور ایران از آذرماه 1379 (دسامبر 2000 میلادی) تا کنون موردی از پولیوی وحشی مشاهده نشده واز سال 2000 نیز ایران بعنوان کشوری عاری از پولیوی وحشی (Polio free) توسط WHO معرفی شده است. اما به رغم حذف پولیوی وحشی، بدلیل بالا بودن حساسیت نظام مراقبت، سالانه تعداد زیادی از موارد Acute Flaccid Paralysis (AFP) ردیابی شده است، بطوریکه در سال 1382 تعداد موارد AFP(شامل سندرم گیلن باره) ردیابی شده، 450 مورد بوده است. در این سال در استان آذربایجان غربی (که در حدود 1100000 کودک زیر 15 سال دارد و طبق انتظار باید در هر سال حدود 11 مورد بیمار مبتلا به AFP در این استان مشاهده شود) موارد مشاهده شده به بیش از 6 برابر موارد مورد انتظار یعنی 70 نفر رسیده است. تعداد موارد AFP در کشور بعنوان یکی از مهمترین شاخص های ارزشیابی نظام مراقبت از پولیواهمیت زیادی دارد که میزان مورد انتظار قابل قبول توسط WHO یک مورد به ازای هر یکصد هزار نفر جمعیت زیر 15 سال در نظر گرفته می شود. در این بررسی سعی شده است که عوامل انتروویروسی غیر پولیویی که در ایجاد موارد AFP در استان آذربایجان غربی نقش داشته اند مورد بررسی وردیابی قرار گیرد، لذا یکی از اهداف این پژوهش شناسایی هرچه بیشتر انتروویروس های غیر پولیویی در گردش، در این استان با استفاده از سه رده سلولی RDوHep2وL20 و تکنیک مولکولی واکنش زنجیره ای پلی مراز_ رونویسی معکوس (Reverse Transcription-Polymerase Chain Reaction) بوده است.
روش کارتمام نمونه های مدفوع بیماران مبتلا به AFP آماده سازی شده و به 3 رده سلولی RD،L20،Hep2 تزریق شدند. سروتیپ ویروس ها با روش تست خنثی سازی (Neutralization Test) مشخص گردید. در صورت جداسازی ویروس های پولیو، تشخیص افتراقی داخل تیپی (سوش واکسن و وحشی) با استفاده از تست های هیبریدیزاسیون و الیزا صورت گرفت و بالاخره در تمام نمونه ها تست RT-PCR با استفاده از پرایمر Pan-Ev انجام شد.
نتایجکشت سلولی توانست 10 ویروس را جداسازی نماید که 9 ویروس توسط رده سلولی RD جدا شد و لذا بعنوان حساسترین رده سلولی شناخته شد. تست مولکولی RT-PCR نیز 16 مورد ویروس را ردیابی کرد که 7 مورد مربوط به نمونه هایی بودند که بر روی RD جدا نشده بودند.RT-PCR توانست به میزان 10% ردیابی ویروس را افزایش دهد که این امر نشان دهنده حساسیت بالای این روش می باشد. اگر چه استفاده از ترکیب دو روش کشت سلولی و RT-PCR جهت ردیابی و شناسایی انتروویروس های غیر پولیویی که در ایجاد AFP نقش دارند بسیار ارزشمند می باشد، اما بیش از 75% از بیماران مبتلا بهAFP از لحاظ ابتلا به انتروویروس ها منفی بودند.
نتیجه گیریباید این بیماران از نظر عوامل دیگر ویروسی (فلاوی ویروس ها) و غیر ویروسی (کمپیلو باکتر ژژونی) مورد بررسی قرار گیرند
کلید واژگان: انتروویروس, فلج شل حاد, کشت سلولی, واکنش زنجیره ای پلی مراز, رونویسی معکوس -
سابقه و هدفمصرف واکسن خوراکی پولیو موجب کاهش چشمگیر موارد پولیومیلیت در سرتاسر جهان گردیده است ولی مانند هر ویروس RNA دار ژنوم آن در طی همانندسازی در بدن فرد گیرنده یا موارد تماس آنها دستخوش تغییرات شده و به ندرت منجر به برگشت بیماری زایی ویروس می گردد. فلج مربوط به واکسن (APP. Vaccine– associated paralytic poliomyelitis) در گذشته به تغییراتی در نوکلئوتیدهای مهم ناحیه غیر کد کننده 5 و در سال های اخیر به نوکلئوتیدهای در نواحی ژن های ساختمانی مانند VPI نسبت داده می شود. بنابراین پولیو ویروس های جدا شده از موارد فلج شل حاد از نظر وجود جهش در این ناحیه مورد بررسی قرار می گیرند. در ایران از سال 1373 برنامه های ریشه کنی پولیو میلیت در حال اجراست و در راستای آن تمامی موارد فلج شل حاد تحت نظارت و پیگیری بالینی و آزمایشگاهی قرار می گیرند.روش کاردرسال های 81-1380، 5 مورد از بیماران فلج شل حاد مبتلا به فلج باقیمانده شناسایی و از مدفوع آنان در آزمایشات میکرونوتولایزاسیون و افتراق درون تایپی (الایزا، جفت شردن پروب، RT– PCR) به ترتیب 3 (شماره های 4, 3, 1) و 2 (شماره های 5, 2) پولیوویروس مشابه واکسن تایپ 1 و 2 جدا گردید و از نظر تغییرات در ناحیه VPI توالی یابی مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفت.یافته هاتجزیه و تحلیل توالی ها نشان داد که 3 پولیوویروس تایپ 1 جدا شده از بیماران (شماره های 4, 3, 1) بترتیب 1, 4, 2 جانشینی نوکلئوتیدی در ناحیه VP1 در مقایسه با ویروس سابین تایپ 1 مرجع داشتند ودر نمونه های 2 و 5 مقایسه با ویروس سابین تایپ 2 مرجع به ترتیب 1 و 2 جانشینی نوکلئوتیدی در ناحیه VP1 مشاهده گردید.نتیجه گیریبا پیشرفت بسوی ریشه کن شدن پولیوویروس های وحشی در جهان، بررسی جهش های رخ داده در استرین های سابین در شناخت پاتوژنز مولکولی این ویروس ها از اهمیت فراوان برخوردار می باشد.
کلید واژگان: APP, Vaccine - associated paralytic poliomyelitis OPV: oral polio vaccine, poliomyelitis, VDPV: vaccine - derived polio viruses -
سابقه و هدفسرطان غیر ملانومائی پوست فراوان ترین بدخیمی در بین سفید پوستان درسراسر جهان است. تحقیقاتی که تا کنون برای یافتن یک عامل ویروسی در این نوع سرطان انجام شده محققین را بسوی پاپیلوماویروس انسانی راهنمایی کرده است. تا کنون بیش از 100 تایپ پاپیلوماویروس انسانی شناخته شده و ارتباط تایپ های معینی از این ویروس با سرطان گردن رحم به اثبات رسیده است ولی تا کنون ارتباطی قطعی بین تایپ خاصی از ویرس و سرطان پوست یافت نشده است. هدف از این مطالعه بررسی فراوانی ژتوتایپ های مختلف پاپیلوماویروس انسانی در ضایعات سرطان غیر ملانومایی پوست و نیز ضایعات پوستی غیر سرطانی در شمال ایران بوده است.مواد و روش هادر این تحقیق مورد شاهدی 136 نمونه بلوک بافت پارافینه سرطان غیر ملانومائی پوست و 139 نمونه بلوک بافت پارافینه پوست غیر سرطانی از آزمایشگاه های پاتولوژی منطقه شمالی ایران جمع آوری گردید. با استفاده از جفت پرایمر FAP59.64 PCR انجام گردید و نمونه های مثبت با استفاده از تعیین توالی نوکلئوتیدی (Direct Sequencing) و مقایسه با توالی های موجود در GeneBank تعیین تایپ شدند. یافته ها با استفاده از آزمون مربع کای تجزیه و تحلیل شدند.یافته هادر %26.5 از نمونه های سرطانی و %9.4 از نمونه های غیر سرطانی HPV-DNA شناسایی شد.. ژنوتایپ های یافت شده عبارت بودند از: 4، 5، 16، 18، 19، 20، 21، 23، 36، 48 و 56. ارتباط آماری معنی داری بین تایپ های مخاطی 16 و 18 و سرطان غیر ملانومائی پوست به دست آمده {P<0.001، OR=29.4 (3.4-245.9)}.نتیجه گیریتایپ های مخاطی پاپیلوماویروس انسانی که در ایجاد سرطان گردن رحم تایپ پر خطر در نظر گرفته می شوند ممکن است در ایجاد سرطان غیر ملانومائی پوست نیز نقش داشته باشد.
کلید واژگان: پاپیلوماویروس انسانی, سرطان پوست, سرطان غیر ملانومائی -
زمینه
در بعضی از کشورهای دنیا، با وجود عدم جداسازی ویروس پولیوی وحشی از نمونه های کلینیکی، گردش خفته ویروس در سیستم فاضلاب گزارش شده است. از طرفی به توصیه سازمان بهداشت جهانی در مواردی ک احتمال ورود ویروس وحشی از کشورهای اندمیک وجود دارد، پایش محیطی جهت تکمیل پایش موارد فلج شل حاد (پایش AFP) پیشنهاد می شود.
مواد و روش هادر این پژوهش به صورت همزمان پایش AFP و محیطی در استان سیستان و بلوچستان به منظور تایید ریشه کنی ویروس فلج اطفال انجام شد. جهت پایش موارد فلج شل حاد، 21 نمونه مدفوع از بیماران مشکوک به این بیماری در مدت یک سال جمع آوری و در رده های سلولی Hep-2، RD، L20B مورد ارزیابی قرار گرفتند. جهت پایش محیطی، 86 نمونه از سیستم های تصفیه فاضلاب شهری و بیمارستانی تهیه و به صورت مستقیم، و با استفاده از روش های تغلیظ، تغلیظ رسوبی (Pellet) و روش تغییر یافته Two- phase، وجود انتروویروس ها در رده های مذکور بررسی شد.
یافته هااز 53.49 درصد نمونه های فاضلاب، انتروویروس غیر پولیوی و از 20.93 درصد ویروس پولیوی واکسن جدا شد. همچنین 9.52 درصد نمونه های مدفوع دارای ویروس پولیو واکسن و 14.28 درصد دارای انتروویروس غیر پولیوی بودند. از نمونه های مدفوع ویروس پولیوی تیپ 2 و از نمونه های فاضلاب ویروس پولیوی تیپ 1 جداسازی نشد.
نتیجه گیرینتایج این پژوهش تاییدی بر صحت پایش محیطی ویروس پولیو و ریشه کنی ویروس فلج اطفال در استان سیستان و بلوچستان می باشد.
کلید واژگان: فلج شل حاد, انتروویروس, ویروس پولیو, انتروویروس غیر پولیوییBackgroundIn some countries, though wild poliovirus isolation from clinical specimens has not been done, evidences of silent circulation of wild virus in sewage system have been reported. On the other hand, based on WHO recommendations, if there is any probability of wild virus entrance from endemic countries, environmental surveillance is advised as a completion to Acute Flaccid Paralysis (AFP) surveillance.
MethodsAFP and environmental surveillance were performed simultaneously in Sistan and Balouchestan province to confirm wild poliovirus eradication. To perform AFP surveillance, 21 stool specimens of AFP suspected cases were collected in a one year period and evaluated using L20B, RD and Hep-2 cell lines. To perform environmental surveillance, 86 samples from urban and hospital sewage disposal systems were collected. Using direct, Pellet and Two-phase methods for virus concentration, Enterovirus existence was investigated in above-mentioned cell lines.
ResultsNon-polio enteroviruses and polioviruses were isolated from 53.49% and 20.93% of sewage specimens, respectively. Sabin-Like polioviruses were isolated from 9.52% of AFP cases, and non-polio enteroviruses from 14.28% of them. Poliovirus type 2 was not isolated form stool specimens and there was no Poliovirus type 1 isolation from sewage specimens, either.
ConclusionThe environmental surveillance as a completion to AFP in Sistan and Balouchestan Province in Iran confirms poliovirus eradication.
Keywords: Acute Flaccid Paralysis, enterovirus, polioviruses, non, polio enteroviruses -
سابقه و هدف
انتروویروس ها یکی از شاخصهای حساس گردش ویروس در اجتماع محسوب می گردند. یکی از روش های عمده تشخیص انتروویرس ها استفاده از کشتهای سلولی حساس است. اما اخیرا با توجه به زمان بر بودن و همچنین نیاز به انجام تستهای تاییدی، استفاده از روش های مستقیم مولکولی جهت تشخیص انترویروس ها مورد توجه قرار گرفته است. این پژوهش به منظور ارزیابی روش های مختلف حذف بازدارنده های آلی موجود در فاضلاب به منظور تشخیص انتروویروس ها به وسیله RT-PCR انجام گرفت.
روش بررسیدر این پژوهش مقطعی 63 نمونه فاضلاب شهر تهران با روش Grab sample تهیه و با روش های Pellet و Two-Phase تغلیظ و در رده های سلولی RD و Hep-2 کشت داده شد. در مرحله بعد با 12 روش مختلف حذف بازدارنده های آلی موجود در فاضلاب با روش RT-PCR مورد ارزیابی قرار گرفت.
یافته هااز روش های مورد بررسی تنها با استفاده از روش ICC-RT-PCR موفق به جداسازی تمام ویروس های مورد انتظار شدیم.
نتیجه گیریبا توجه به حساسیت 0.01TCID50 روش ICC-RT-PCR، انجام مطالعات گسترده تر در سطح کشور به منظور استفاده از این روش به عنوان یک روش حساس و سریع برای تشخیص انتروویروس های عفونی، نمونه های محیطی دارای غلظت کم ویروس و دارای ترکیبات بازدارنده پیشنهاد می گردد.
کلید واژگان: انتروویروس ها, بازدارنده های آلی فاضلاب, RT-PCRMedical Science Journal of Islamic Azad Univesity Tehran Medical Branch, Volume:16 Issue: 2, 2006, PP 69 -77BackgroundEnteroviruses in sewage are considered among the most sensitive indicators for virus circulation in society. These are mainly detected by sensitive cell cultures, however, since it is time consuming, molecular direct methods have also been considered as sensitive techniques. This study accomplished to assess different methods of removing organic inhibitors of sewage in order to detect Enteroviruses with RT-PCR.
Materials and methodsFor this cross sectional study, 63 sewage specimens of Tehran were prepared with Grab sample method and concentrated with Pellet and Two-Phase methods and cultured in RD and Hep-2 cells. Then, with 12 different methods, removing organic inhibitors in sewage with RT-PCR method was assessed.
ResultsOf investigated methods, we succeeded to isolate all of expected viruses only with the use of ICC-RT-PCR method.
ConclusionWith respect to 0.01 TCID50 sensitivity of ICC-RT-PCR method, further studies are strongly recommended in order to confirm the utility of this method as one of the most sensitive methods of detecting Enteroviruses.
Keywords: Enteroviruses, Sewage, Organic inhibitors, RT-PCR -
سابقه و هدفانتروویروس ها از جمله پاتوژن های مهم انسانی خانواده پیکورناویریده هستند که بر اساس بیماری زایی به گروه های پولیوویروس، کوکساکی A و B، اکوویروس و انتروویروس های جدید طبقه بندی شده اند. این ویروس ها پس از تکثیر در دستگاه گوارش یا تنفسی و ورود به سیستم گردش خون می توانند عفونت سیستمیک را ایجاد کنند. هدف از این پژوهش ارزیابی مستقیم نمونه های فاضلاب تغلیظ شده با استفاده از روش تلفیقی کشت سلولی و RT-PCR جهت بررسی انتروویروس ها در فاضلاب شهر تهران می باشد.مواد و روش هادر این مطالعه توصیفی 63 نمونه تهیه شده از 6 سیستم تصفیه فاضلاب شهر تهران پس از تغلیظ با روش Two-Phase مورد ارزیابی قرار گرفت. سپس تمامی نمونه ها به کشت های سلولی حساس RD و Hep-2 تلقیح و پس از 24 ساعت گرمخانه گذاری در حرارت 36 درجه با استفاده از پرایمرهای Pan E.V و سپس با استفاده از پرایمرهای Pan P.V و پرایمرهای اختصاصی Sabin بر روی نمونه های کشت سلولی تست RT-PCR انجام شد.یافته هااز 63 نمونه مورد بررسی، از 4 نمونه)فراوانی (%65.07 انتروویروس جداسازی گردید. در انتها نیز با انجام تست RT-PCR اختصاصی، فراوانی ویروس پولیو %9.52 تشخیص داده شد.نتیجه گیریحساسیت روش ICC-RT-PCR برای تشخیص انتروویروس ها کمتر از 0.01 TCID50 ارزیابی گردید. این مساله می تواند نشان دهنده قابل قبول بودن و حساسیت قابل توجه این روش برای تشخیص انتروویروس های موجود در نمونه های فاضلاب باشد.
کلید واژگان: انتروویروس ها, فاضلاب, ICC, RT, PCR -
سابقه و هدفانتروویروس ها از مهمترین ویروس های روده ای هستند و طیف وسیعی از بیماری ها مانند مننژیت فلج شل حاد (AFP) میوکاردیت ورم ملتحمه عفونت نوزادان و گاهی دیابت را در انسان ایجاد می کنند. چرخش انتروویروس های غیرپولیویی در جمعیت به سهولت از طریق فاضلاب صورت می گیرد. بعد از ریشه کنی فلج اطفال این ویروس ها شاخص مناسبی جهت پایش محیطی و ارزیابی موفقیت آمیز بودن روش جداسازی و تغلیظ ویروس از نمونه های آب و فاضلاب می باشند. هدف از این پژوهش جداسازی و تعیین تیپ انتروویروس های غیرپولیویی از نمونه های فاضلاب و تعیین توزیع و چرخش محیطی آنها در استان سیستان و بلوچستان می باشد.مواد و روش ها86 نمونه از 8 محل در استان سیستان و بلوچستان به روش Grab sample در چهار فصل تهیه و به صورت مستقیم و با دو روش تغلیظ: Two-phase و Pellet، انتروویروس های غیرپولیویی در رده های سلولی RD و Hep-2جداسازی و سپس ویروس های جدا شده با روش میکرونوترالیزاسیون شناسایی گردید.یافته هااز مجموع نمونه های مورد بررسی با روش مستقیم Pellet و Two-phase به ترتیب: 12.79%، 36.05% و 51.16% انتروویروس غیرپولیویی جداسازی شد. بیشترین فراوانی انتروویروس های غیرپولیویی جدا شده مربوط به E4 (20%) کوکساکی B (16.36%) و E11 (14.55%) بود.نتیجه گیرینتایج این پژوهش تاییدی بر کفایت روش پیشنهاد شده Pellet و صحت پایش محیطی ویروس پولیو در استان سیستان و بلوچستان می باشد. در پایان، بررسی ارتباط بیماری های ناشی از انتروویروس های غیرپولیویی با چرخش محیطی این ویروس ها در نقاط مختلف کشور پیشنهاد می گردد.
کلید واژگان: پایش محیطی, انتروویروس غیرپولیویی (NPEV), سیستان و بلوچستان, فاضلاب -
مقدمه تصمیم گیری در مورد زنان حامله ای که دچار راش شده اند یا در تماس با بیمار دارای راش های سرخجه فرم می باشند، ضرورت و اهمیت تشخیص افتراقی عفونت اولیه سرخجه را از عفونت مجدد روشن می سازد. در گذشته، برای تشخیص عفونت اولیه اثبات حضور IgM اختصاصی سرخجه در سرم کافی می نمود اما گاهی حضور IgM دلایلی غیر از عفونت اولیه سرخجه دارد. در این پژوهش با توجه به این حقیقت که اویدیتی IgG در عفونت اولیه پایین تر از اویدیتی آن در عفونت مجدد می باشد، کاربرد یک روش سرولوژیک برای سنجش اویدیتی IgG اختصاصی سرخجه بعنوان هدف در نظر گرفته شد.
روش کاربه این منظور یک مجموعه سرم (panel) 72 تایی از افراد دارای راش که سرخک منفی بودند انتخاب گردید. نمونه ها با در نظر گرفتن سن و معیارهای سرولوژیک)نتایج آزمون HI و ردیابی (IgM در دو گروه A)40 نمونه(و B)32 نمونه(قرار گرفتند که برای گروه A وجود IgG با اویدیتی پایین و برای گروه B وجود IgG با اویدیتی بالا مورد انتظار بود. بر روی نمونه های فوق IgG avidity assay (EIA format) با استفاده از کیت تجاری Radim و اوره 6 مولار (دناتوره کننده ضعیف پروتئین) با روش Elution انجام شد و اندکس اویدیتی بدست آمد.نتایج به کمک نرم افزار Splus با روش CART مرز بین IgG دارای اویدیتی بالا و IgG دارای اویدیتی پایین 47.5 درصد بدست آمد، بر این اساس به کمک منحنی Roc در نرم افزار SPSS حساسیت و ویژگی این آزمون بترتیب 0.969 و 0.975 محاسبه گردید.بحث در نهایت نتایج بدست آمده نشان می دهد این روش برای تشخیص افتراقی عفونت اولیه سرخجه از عفونت مجدد مناسب می باشد.
کلید واژگان: عفونت اولیه سرخجه, عفونت مجدد سرخجه, اویدیتی IgGIntroductionIt is essential for the management of the pregnant patients with a recent rash or in contact with a rubelliform illness that differential diagnosis of primary rubella infection from reinfection could be accomplished. The presence of rubella specific IgM has been taken in the past as a reliable indicator of primary infection, but in some cases the presence of IgM can be due to other causes. In this study, considering the fact that IgG avidity in primary rubella is much lower than in reinfection, the main objective was to use a convenient serological method for rubella IgG Avidity assay.
MethodFor this purpose 72 serum samples from measles negative exanthematous patients were investigated. These samples were divided in two categories of A and B according to the serological markers (HI test results and IgM detection) and also the age of patients, presence of low avidity IgG for group A and high avidity IgG for group B was expected. An avidity IgG ELISA test was performed by elution method for each group using Radim commercial kit and 6M urea (a mild protein denaturant) and avidity index was calculated.
ResultsUsing Splus software CART method (classification and regression tree), the borderline achieved for separation the high avidity IgG from low avidity one was 47.5% and using Roc curve in SPSS software specificity and sensitivity of the test were calculated.
ConclusionThe results show that, this method is suitable for differential diagnosis of primary rubella infection from reinfection.
-
سابقه و هدفدر بعضی از کشورهای دنیا با وجود عدم جداسازی ویروس پولیوی وحشی از نمونه های کلینیکی، گردش خفته ویروس در نمونه های فاضلاب گزارش شده است. به همین دلیل سازمان بهداشت جهانی جهت تایید نهایی ریشه کنی ویروس فلج اطفال، پایش محیطی نمونه های فاضلاب و آبهای سطحی را پیشنهاد نموده است. در این پژوهش جهت اطمینان از ریشه کنی ویروس پولیوی وحشی، پایش محیطی استان سیستان و بلوچستان انجام شده است.روش بررسیاز فروردین تا اسفند ماه سال1383، 86 نمونه از دو مرکز تصفیه فاضلاب، 5 بیمارستان و آبهای سطحی چندین روستا با روش Grab sample جمع آوری و به صورت مستقیم و دو روش تغلیظPellet و Two-phase وجود ویروس پولیو مورد بررسی قرار گرفت. سپس ویروسهای پولیوی جدا شده با روش میکرونوترالیزاسیون تعیین تیپ و با روش های الایزا و پروب هیبریدیزاسیون افتراق داخل تیپی انجام شد.یافته هااز مجموع کل نمونه ها، در 18 مورد (9/20%) ویروس پولیو جداسازی شد که خوشبختانه هیچ کدام ویروس وحشی نبودند. از این تعداد 2 مورد (3/2%)، 8 (%9/3) و 13 مورد (1/15%) به ترتیب با روش مستقیم، Pellet و Two-phase جداسازی شدند. بیشترین فراوانی ویروسهای جدا شده مربوط به پولیوی تیپ دو (با فراوانی 2/72%) و پولیوی تیپ سه (با فراوانی 8/27%) بود.نتیجه گیرینتایج نشان دهنده سطح مناسب پوشش ایمن سازی در ایران به ویژه در منطقه پرخطر مورد بررسی و همچنین موید پایش مناسب موارد کلینیکی AFP در کشور بود.
کلید واژگان: پایش محیطی, ویروس فلج اطفال, فاضلابMedical Science Journal of Islamic Azad Univesity Tehran Medical Branch, Volume:15 Issue: 2, 2005, P 51BackgroundIn some countries, wild polioviruses have been isolated from environment despite the absence of viruses being recovered from clinical cases, therefore to confirm of final Polio eradication, WHO has recommended environmental surveillance using sewage specimens and surface water. During the present study, in order to assure the polio eradication in Iran, Sistan-Balouchestan province was chosen as the target area.Materials And MethodsDuring a 12-month period, 86 specimens from 2 sewage disposal systems and 5 hospitals, as well as surface water from several rural areas were collected by Grab Sampling and tested for polioviruses using direct and concentrated specimens with 2 concentrationMethodsPellet and Two-phase. Then the isolated viruses were serotyped by microneutralization method and differentiated intratypically by ELISA and probe hybridization techniques.ResultsOf all studied specimens, 18 (20.9%) were identified as poliovirus, none of which were wild virus fortunately. Among these, 2 (2.3%), 8 (9.3%) and 13 (15.1%) were isolated from direct specimens, Pellet and Two-phase concentrated specimens, respectively. The most frequent viruses were Polio 2 (72.2%) and Polio 3 (27.8%).ConclusionResults have revealed the efficacy of immunization coverage in Iran. Meanwhile, sufficient surveillance programs have been observed during the recent years.
- در این صفحه نام مورد نظر در اسامی نویسندگان مقالات جستجو می‌شود. ممکن است نتایج شامل مطالب نویسندگان هم نام و حتی در رشته‌های مختلف باشد.
- همه مقالات ترجمه فارسی یا انگلیسی ندارند پس ممکن است مقالاتی باشند که نام نویسنده مورد نظر شما به صورت معادل فارسی یا انگلیسی آن درج شده باشد. در صفحه جستجوی پیشرفته می‌توانید همزمان نام فارسی و انگلیسی نویسنده را درج نمایید.
- در صورتی که می‌خواهید جستجو را با شرایط متفاوت تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مطالب نشریات مراجعه کنید.
©2000-2025 magiran.com All Rights Reserved.