به جمع مشترکان مگیران بپیوندید!

تنها با پرداخت 70 هزارتومان حق اشتراک سالانه به متن مقالات دسترسی داشته باشید و 100 مقاله را بدون هزینه دیگری دریافت کنید.

برای پرداخت حق اشتراک اگر عضو هستید وارد شوید در غیر این صورت حساب کاربری جدید ایجاد کنید

عضویت
فهرست مطالب نویسنده:

عبدالحمید شوشتری

  • علیرضا آبتین، عبدالحمید شوشتری*، سید علی پوربخش، محمدحسین فلاح مهرابادی، هادی پورتقی

    ویروس آنفلوانزا پرندگان تحت تیپ H4 یکی از شایع ترین و مسری ترین ویروس های آلوده کننده پرندگان آبزی بومی محسوب می شوند.  اردک های بومی یکی از مخازن تحت گونه های مختلف ویروس آنفلوانزای پرندگان بوده و می توانند در اشاعه این بیماری نقش مهمی داشته باشند.  بازارهای فروش پرندگان زنده مکان مناسبی برای انتشار و انتقال ویروس آنفلوانزا در بین پرندگان محسوب می شوند.  هدف از این مطالعه شناسایی و آنالیز فیلوژنتیک ژن های HA و NA ویروس آنفلوانزای پرندگان تحت تیپ H4N2، جدا شده از اردک های بومی از بازارهای فروش پرندگان زنده استان های شمالی ایران بود.  از 962 سواب کلواک جمع آوری شده از اردک های بومی دو جدایه H4N2 شناسایی و ژن HA و NA آن ها مورد تعیین توالی و تجزیه و تحلیل فیلوژنتیک قرار گرفت.  جدایه های این مطالعه از نوع ویروس آنفلوانزا با حدت پایین LPAI بودند.  آنالیز فیلوژنتیک ژن HA دو جدایه این مطالعه همسانی بالایی (97 درصد) با ویروس آنفلوانزا تحت تیپ H4N6 جدا شده از اردک های بومی در گرجستان را نشان داد.  جایگاه کلیواژ ژن HA در هر دو جدایه این مطالعه “PEKASR/ GLF” و درجایگاه 348 -338 واقع شده بود.  ژن NA دو جدایه این مطالعه شباهت (98-95 درصد) با ژن های N2 ویروس های آنفلوانزا داشت.  در این مطالعه ویروس آنفلوانزا تحت تیپ H4 برای اولین بار از اردک های بومی در ایران شناسایی و مورد آنالیز فیلوژنتیک قرار گرفت.  با توجه به یافته های این مطالعه، پایش مداوم پرندگان عرضه شده در بازارها از نظر ویروس های آنفلوانزا به منظور آگاهی و شناسایی ویروس های آنفلوانزای در گردش و تغییرات ایجاد شده در ویروس ها و اتخاذ تصمیمات پیش گیرانه مناسب به خصوص در فصل های پرخطر به منظور کنترل بیماری در بازار های کشور ضروری است.

    کلید واژگان: ویروس آنفلوانزا پرندگان, تحت تیپ H4N2, اردک های بومی, آنالیز فیلوژنتیک, بازار فروش پرندگان زنده
    Alireza Abtin, Abdelhamid Shoushtari *, Seyed Ali Pourbakhsh, MohammadHossein Fallah Mehrabadi, Hadi Pourtaghi

    Waterfowls are one of the hosts for Avian influenza virus (AIV) H4 subtypes. In fact, the importance of domestic ducks as reservoirs in the distribution of this virus has been previously proven. Also, the live poultry market could be a significant place in spreading and transmission of influenza virus among the birds and animals. Identification and molecular determination of HA and NA genes of the H4N2 avian influenza virus was isolated from this group of birds in live bird markets of Iran. From 962 cloacal samples, collected from domestic ducks and geese, the NA and HA genes sequences revealed the emergence of this virus in Iran for the first time. Phylogenetic analyses of the HA gene showed high homology to the Eurasian lineage of H4N6. On the other hand, the cleavage site of the HA genes showed a PEKQTR/GLF motif, an indicator of LPAI. Also, the NA gene showed high homology to those belonging to AIV N2 subtype. This is the first study regarding the detection and identification of AIV H4 subtypes from domestic ducks in Iran. It recommends a continuous monitoring of the avian influenza viruses in Iran in order to study the evolution and identify new strains with pandemic potential because such information will be helpful in controlling of the disease.

    Keywords: Avian influenza virus, H4 subtype, domestic ducks, phylogenetic analysis, live poultry market
  • مینو مطهر، هادی کیوانفر*، عبدالحمید شوشتری، محمدحسین فلاح مهر آبادی، غلامرضا نیکبخت بروجنی

    طی دو دهه گذشته، ویروس آنفلوآنزای فوق حاد طیور سویه H5 به دلیل ماهیت زیونوتیک بودن و ایجاد جهش فراوان مورد توجه بسیاری قرار گرفته است. هدف از مطالعه پیش رو بررسی خصوصیات فیلوژنتیک و مولکولی ژن هماگلوتینین (HA) سویه H5N8 وارد شده به ایران در سال 1395 در تالاب میقان شهرستان اراک استان مرکزی بود. بدین منظور نمونه های مربوطه به تخم مرغ های 14 -10 روزه تلقیح شده و پس از استخراج مایع آلانتوییک و استخراج RNA و انجام PCR و تعیین توالی ژن ها، درخت های فیلوژنتیک توسط برنامه Mega7 رسم شده و خصوصیات مولکول شامل محل شکست Site) (Cleavage محل اتصال به گیرنده (Receptor binding Site)، محل گلیکوزیله (Glycosylation Site)، محل آنتی ژنیک (Antigenic Site) و جهش های مرتبط با ژن HA بررسی گردید. بر اساس آنالیز توالی اسید آمینه ژن HA، شامل محل شکست موتیف اسید آمینه پلی بازیک PLREKRRKR/GLF، که مشخصه ویروس های آنفلوآنزای فوق حاد بوده و جهش های T156A، S123P، S133A مرتبط با افزایش اتصال به اسید سیالیک پستانداران بود تجزیه و تحلیل فیلوژنیک ژن HA، بیانگر طبقه بندی این ویروس در کلد (Clade) b2.3.4.4 بوده و به نظر می رسد که ورود این سویه به ایران احتمالا از طریق مسیر پروازی پرندگان وحشی مهاجر، از غرب آسیا به شرق آفریقا افتاده است.

    کلید واژگان: آنفلوآنزای پرندگان, ایران, فوق حاد
    Minoo Motahhar, Hadi Keyvanfar *, Abdolhamid Shoushtari, MohammadHossein Fallah Mehrabadi, Gholamreza Nikbakht Brujeni

    During the past two decades, the highly pathogenic avian influenza H5N1 virus has received considerable attention due to its zoonotic and mutative features. Purpose of the leading study is molecular and phylogenetic characteristics of hemagglutinin (HA) gene of H5N8 strain identified in Meighan wetland of Arak city, Markazi province were investigated. For this purpose, samples were inoculated with embryonic eggs of 14-10 days and after extraction of allantoic fluid and RNA extraction and PCR and sequencing of genes, phylogenetic trees were drawn by Mega7 program and molecular properties including Cleavage site, Glycosylation site, Antigenic site, Receptor Binding site and HA gene-related mutations were investigated. Based on the analysis of the amino acid sequence of the HA genes, the cleavage site of the gene includes the PLREKRRKR / GLF polybasic amino acid motif, which is a characteristic of highly pathogenic influenza viruses. The HA gene of two viruses had T156A, S123P, S133A mutations associated with the increased mammalian sialic acid binding. Phylogenetic analysis of the HA gene of the virus studied in this study indicated the classification of this virus in the 2.3.4.4 b Clade. It seems that the introduction of these H5N8 HPAI strains in Iran probably occurred through the West Asia-East African flyway by wild migratory aquatic birds.

    Keywords: Avian Influenza, Highly pathogenic, Iran
  • حمزه نبوی، منصور میاحی*، عبدالحمید شوشتری، زهرا برومند
    هدف مطالعه، ارزیابی واکسن های پنوموتروپ و ویسروتروپ بر میزان تکثیر و دفع یک جدایه ی ویروس حاد بیماری نیوکاسل در جوجه های گوشتی است.  یکصد و چهل جوجه ی یک روزه ی گوشتی سویه ی راس خریداری و در روز اول جهت تعیین زمان واکسیناسیون از 20 قطعه خون گیری و بقیه به طور تصادفی به 6 گروه مساوی 20 قطعه ای تقسیم شدند.  جوجه های گروه اول، دوم، سوم و چهارم در سن 8 روزگی به ترتیب با واکسن های B1، کلون، ویتاپست و اوینیو به روش قطره چشمی واکسینه شدند، جوجه های گروه پنجم و ششم نیز به عنوان کنترل مثبت و منفی با آب مقطر استریل تلقیح شدند.  در سن 35 روزگی، جوجه های گروه های 1 تا 5 با یک دهم میلی لیتر از مایع آلانتوییک حاوی EID50105 ویروس حاد نیوکاسل به روش چشمی- بینی و جوجه های گروه ششم با PBS استریل تلقیح شدند و روزانه 2 بار جهت نشانه های درمانگاهی مشاهده شدند.  در روزهای 2، 5، 10 و 15 پس از تلقیح، 3 جوجه از همه ی گروه ها به روش تصادفی انتخاب و پس از تهیه ی سوآب استریل از کلواک و نای به روش انسانی کشتار و نمونه های بافتی از نای، ریه، کلیه، کبد و طحال و مغز جمع آوری شد و آزمایش Real time PCR انجام شد.  نتایج نشان داد در روزهای 2 و 5 بعد از چالش ویروس در سواب نای و کلواک و  بافت های نای، ریه، کلیه، کبد و طحال تمام گروه های واکسینه به میزان معنی داری کمتر از گروه کنترل مثبت بود.  مطالعه ی حاضر نشان داد واکسن های پنوموتروپ و ویسروتروپ بیماری نیوکاسل پادتن محافظت کننده در ماکیان ایجاد می نمایند و هر دو نوع واکسن گله گوشتی را به خوبی در مقابل بروز نشانه های بالینی و تلفات در برابر ویروس حاد بیماری نیوکاسل محافظت می کنند و میزان دفع ویروس را از دستگاه تنفس و دستگاه گوارش به مقدار زیادی کاهش می دهند.
    کلید واژگان: ویروس بیماری نیوکاسل, پلی مراز زمان حقیقی, تکثیر, دفع, واکسن, پنوموتروپیک, ویسروتروپیک
    Hamzeh Nabavi, Mansour Mayahi *, Abdolhamid Shoshtary, Zahra Boroomand
    Vaccination are the most important way to prevent viral diseases in the poultry industry.  The aim of study was to evaluate pneumotropic and viscerotropic Newcastle disease vaccines against replication and shedding of Newcastle disease virus (vNDV) in broiler chickens. One hundred forty day-old Ross broiler chickens were purchased and after bleeding from 20 chicks remaining randomly divided into six equal groups, and groups 1,2,3 and 4 vaccinated by B1, colone, vitapest, avinew vaccines respectively via eye drop at 8 days of age and groups 5 and 6 were kept as positive and negatives control groups and inoculated same way by distelled water. All groups except group 6 were challenged via intra nasal-ocular route on day 35 with 0.1 mililiter allantoic suspension containing 105 EID50/ml vNDV. Group 6 were inoculated same way by PBS. All groups were observed two times daily and blood samples was collected from all groups on days 1,8,15,35,42 and 49 for determining antibody titers against Newcastle vaccines by hemagglutination inhibition test (HI). On days 2, 5, 10 and 15 after inoculation, 3 chicks were randomly selected from each groups and cloaca and trachea swabs samples were collected from each bird. Then the chicks were euthanized, and trachea, lungs, spleen, kidney, and liver tissues samples were collected for Real time PCR. Results showed virus was detected in the trachea and cloaca swab and tracheal, lungs, kidneys, spleen   and   liver   tissues all vaccinated groups at 2 and 5 days after vaccination was significantly less than unvaccinated challenged control group. It was concluded that pneumotropic and viscerotropic Newcastle disease vaccines produce protective antibody in vaccinated broiler and both vaccines protect broiler flock against clinical signs and mortality and reduce large amount virus shedding from respiratory and intestine tract.
    Keywords: Newcastle disease virus, Real Time PCR, Replication, Shedding, Pneumotropic, Viscerotropic, Vaccines
  • کامران میرزایی، عبدالحمید شوشتری، سعید بکایی*، محمدحسین فلاح مهرآبادی، سید مصطفی پیغمبری
    مقدمه و اهداف

    تحت تیپ H9N2 ویروس آنفلوانزای طیور در ایران بومی بوده و گردش این ویروس در مقیاس وسیع در طیور صنعتی اثرات مخربی را در کشور ایجاد می نماید. هدف از انجام این مطالعه، تعیین موثرترین مولفه ها بر بروز آلودگی در مزارع گوشتی است.

    روش کار

    در این راستا یک مطالعه کوهورت از تیرماه سال 1395 تا آذرماه سال 1396 در مزارع پرورش طیور گوشتی در استان قزوین به انجام رسید و طی آن از 34 مزرعه طیور گوشتی استان قزوین به صورت تصادفی نمونه گیری به عمل آمد و یافته های مربوطه مورد تجزیه وتحلیل های آماری قرار گرفتند

    یافته ها: 

    از بین 34 مزرعه واردشده در این مطالعه، نمونه های اخذشده از 16 مزرعه در آزمایش واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR) مثبت بودند. در تحلیل های تک متغیره، اثر متغیرهای کیفی "نوع حصار اطراف واحد"، "امنیت زیستی" و "وضعیت سیستم خنک کننده" و همچنین متغیرهای کمی "میانگین تیتر آنتی بادی مادری"، "ارتفاع"، "نزدیکی به مسیرهای تردد عمومی" و " تعداد واحد در شعاع 1 کیلومتری" در بروز عفونت معنی دار شدند (P<0.05). اما در مدل چند متغیره، تنها اثر متغیرهای "امنیت زیستی" و "وضعیت سیستم خنک کننده" در بروز عفونت معنی دار بودند (p<0.05).

    نتیجه گیری: 

    با توجه به یافته های این مطالعه، به منظور کاهش انتشار عفونت و خسارات ناشی از آن، لازم است تاکید بیشتری بر رعایت اصول امنیت زیستی در مزارع گوشتی استان قزوین و همچنین در سراسر کشور صورت پذیرد.

    کلید واژگان: مولفه های آلودگی به آنفلوانزا, H9N2, PCR, فارم های گوشتی, قزوین
    K. Mirzaie, AH .Shushtari, S. Bokaie*, MH .Fallah Mehrabadi, SM.Peighambari
    Background and Objectives

    Avian influenza (AI) is one of the most important respiratory diseases in the poultry industry that causes huge economic impacts and plays an important role in public health. H9N2 Avian Influenza Virus (H9N2 AIV) has a broad circulation and causes endemic infections in the poultry industry of the country.

    Methods

    A cohort study was conducted from July 2016 to November 2017 in broiler chicken farms of Qazvin Province, Iran to detect H9N2 AIV infection determinants in broiler chicken farms.

    Results

    Sixteen out of 34 units that were included in the study had positive PCR results. Some variables such as “type of fence around the unit”, “biosecurity”, “cooling system status”, “mean maternal antibody titers”, “location height”, “proximity to public traffic lanes” and “number of units within a radius of 1 km” had significant effects on the infection occurrence in poultry units according to univariate statistical analyses (P<0.05). However, only two of them (“biosecurity” and “cooling system status”) were statistically significant in multi-variable analyses (P<0.05).

    Conclusion

    Biosecurity measures should be implemented more seriously and strictly in broiler farms to reduce the impact of H9N2 AIV infection.

    Keywords: Influenza a virus, H9N2 subtype, Polymerase chain reaction, Broiler farms, Qazvin
  • محمد ابراهیمی، ساموئل گریگوریان، محمدحسین فلاح مهرابادی، عبدالحمید شوشتری*

    آنفلوآنزای پرندگان بیماری ویروسی واگیردار و مشترک بین انسان و دام می باشد و عامل آن ویروسی از خانواده ارتومیکسوویریده می باشد. امروزه ویروس آنفلوانزا تحت تیپ H9N2 یکی از معضلات اصلی و مهم صنعت طیور کشور ما می باشد. این مطالعه که با هدف بررسی وضعیت آلودگی طیور بومی استان های شمالی به آنفلوانزای H9N2 و از 1393 تا 1394 انجام گرفت. بر روی نمونه های سرمی آزمایش ممانعت از هماگلوتیناسیون (HI) جهت ردیابی ویروس آنفلوانزای H9 انجام گرفت. برای جدا سازی ویروس ها نمونه های سواب، پس از آماده سازی به تخم مرغ تلقیح شدند. جهت آنالیز مولکولی ویروس جدا شده پس از استخراج RNA، واکنش RT- PCR به صورت یک مرحله ای جهت تکثیر ژن های HA و NA انجام شد. با استفاده از دو جفت پرایمر کلی هافمن تمام open reading frame هر دو ژن HA و NA سکانس و در خت فیلوژنیک برای هر دو ژن رسم شد. در مجموع در سه استان از 70 روستا (استان مازندران 20 روستا، استان گیلان 20 روستا و استان گلستان 30 روستا) و 993 پرنده (استان مازندران 276 پرنده، استان گلستان 370 پرنده و استان گیلان 347 پرنده) نمونه برداری شد. در مجموع سه استان از مجموع 70 روستای نمونه برداری شده تعداد 67 روستا (96%) و از مجموع 993 پرنده تعداد 557 پرنده (56%) سرم مثبت بودند. نتایج مطالعه جاری نشاندهنده شیوع بالای ویروس آنفلوانزای H9N2 در طیور بومی در استان های شمالی کشور می باشد.

    کلید واژگان: آنفلوانزا, H9N2, استان های شمالی, طیور بومی, بررسی سرمی
    M. Ebrahimi, S. Grigorian, M. H. Fallah Mehrabadi, A. Shoushtari *

    Avian Influenza is an acute and contagious disease of humans and animals, an agent of Orthomyxoviridae family. H9N2 subtype of avian influenza virus (AIVs) is one of the main problems of poultry industry in Iran. The aim of study was to investigate the status of domestic poultry contamination and identifying the hemagglutinin gene of H9N2 isolates in northern providences of Iran.This cross-sectional study was carried out in rural population of Gilan, Mazandaran and Golestan provinces from 1393 to 1394.The sera and cloacal swabs were sampled and tested, using a haemagglutination inhibition test and reverse transcriptase polymerase chain reaction respectively. The RNA was extracted, HA and NA genes was proliferated, using; two pairs of full-open-reading frame universal primer pairs, Titan one step tube RT-PCR system (Roche). A total of 70 villages and 993 birds; (Mazandaran province, 20 villages with 276 birds , Gilan province, 20 villages, with 347 birds and Golestan province, 30 villages with , 370 birds) were sampled. The sera sample of 67 villages (96%) out of 70 and 557 birds (56%) out of 993 were positive. The only H9N2 subtype was isolated of swab sample named A / chicken / Iran / RZ18 / 2014.Both HA and NA genes were common close to Iran / Markazi / 2014 and Iran / MMV9- 2013 isolate. The results reveal a high level of circulation of H9N2 influenza viruses in domestic poultry in the northern provinces of Iran.

    Keywords: Influenza, H9N2, Northern provinces, Backyard poultry, Sero-servey
  • محمدحسین فلاح مهرآبادی*، عبدالحمید شوشتری، فرشاد تهرانی، نجمه معتمد، بهرام حائریان، آرش قلیان چی لنگرودی، سید علی غفوری، سعید امیرحاجلو
    زمینه مطالعه

    آنفلوانزای پرندگان یکی از مهم ترین بیماری ها از نظر اقتصادی و بهداشت عمومی است. ویروس آنفلوانزای پرندگان تحت تیپ H9N2 شایع ترین ویروس آنفلوانزا با بیماریزایی کم در بین طیور در سراسر دنیا می باشد.

    هدف

    بررسی شیوع سرمی و مولکولی AI-H9N2 در بازارهای فروش پرندگان زنده، باغ های پرندگان و پارک های کشور بود.

    روش ‎کار:

     مطالعه مقطعی از مرداد تا آخر آذرماه سال 1395 انجام گرفت. در هر واحد از 40 پرنده از گونه های مختلف خون گیری و از 60 پرنده آبزی (اردک و غاز) نمونه سواب کلواک اخذ گردید. نمونه های سرمی با تست HI برای شناسایی تحت تیپ H9N2 آزمایش شدند. پرندگانی که دارای عیار سرمی 4 به بالا بوده و واحدهایی که دارای حداقل یک پرنده مثبت بودند، مثبت در نظر گرفته شدند. نمونه های سواب به روش RT-PCR با استفاده از دو جفت پرایمر M و H9 آزمایش شدند.

    نتایج

    از تعداد 2638 پرنده در 127 بازار، باغ وحش، پارک پرنده در 22 استان کشور، نمونه سرم و از 3001 پرنده در 122 واحد سواب کلواک اخذ شد. تعداد 73 واحد از 127 واحد نمونه برداری شده (48/57 درصد و فاصله اطمینان 95 درصد برابر 2/66 - 4/48 درصد) و تعداد720 پرنده از 2638 پرنده نمونه برداری شده (29/27 درصد و فاصله اطمینان 95 درصد برابر 6/29 - 6/25 درصد) از نظر سرمی مثبت بودند. در بین گونه های پرنده نیز بالاترین درصد سرم مثبت مربوط به بوقلمون و مرغ به ترتیب با 6/47 درصد و 3/45 درصد و کمترین درصد سرم مثبت نیز مربوط به اردک و غاز به ترتیب با 8/13 درصد و 3/16 درصد بود. همچنین تعداد 39 سواب تجمیع شده از 18 واحد (75/14 درصد) مثبت بود.

    نتیجه گیری نهایی: 

    نتیجه مطالعه نشان دهنده شیوع بالای آنفلوانزای H9N2 و گردش آن در طیور بازارهاست. ساماندهی بازارها از طریق ارتقاء سطح بهداشتی و امنیت زیستی بازارها، آموزش مردم و پایش مداوم پرندگان عرضه شده در بازارها جهت کنترل بیماری در بازارهای کشور ضروری می باشد.

    کلید واژگان: آنفلوانزا, H9N2, بازار, شیوع, بررسی
    MohammadHossein Fallah Mehrabadi *, Abdolhamid Shoushtari, Farshad Tehrani, Najmeh Motamed, Bahram Haerian, Arash Ghalyanchilangeroudi, Seyed Ali Ghafouri, Saeed Amirhajloo
    BACKGROUND

    Avian influenza is one of the most important diseases both economically and from a public health viewpoint.

    OBJECTIVES

    To investigate the serological and molecular prevalence of AI-H9N2 in live bird markets, bird gardens, parks and zoos.

    METHODS

    This cross-sectional study was conducted from August to December 2016.  In each unit, 40 blood samples from different bird species and 60 cloacal samples from waterfowl (ducks and geese) were taken. All sera samples were tested by HI for detection of antibodies against H9N2 virus. The birds with sera titer =>4 (log2) and units with at least one positive bird were considered as positive. Swab samples were tested by RT-PCR method using two pairs of primers to detect M and H9 gene of H9N2 virus.

    RESULTS

    2638 sera samples from birds in 127 units in 22 provinces and 3001 swab samples from duck and goose were taken. 73 units out of 127 (57.48 %; 95 % confidence interval, 66.2 % - 48.4 %) and 720 birds from a total of 2638 birds (27.29 %: 95 % confidence interval, 29.6 % - 25.6 %) were sero-positive. Among the bird species, the highest seroprevalence was 47.6 % and 45.3 % in turkey and chicken, respectively and the lowest seroprevalence was 13.8 % and 16.3 % for ducks and geese, respectively. 39 pooled samples from 18 units (14.75 %) were positive.

    CONCLUSIONS

    The results of this study showed high prevalence and circulation of avian influenza H9N2 viruses among poultry in these markets. Organizing the markets by improving the health and biosecurity of the markets, and it is necessary to educate the people and continuously surveillance the birds that offered in the markets to control the disease.

    Keywords: influenza, H9N2, Prevalence, markets, survey
  • زهرا کیوانلو*، عبدالحمید شوشتری
    ویروس آنفلوانزا H9N2 با توجه به دامنه میزبانی بسیار وسیع و به علت بازآرایی ژن اهمیت بالایی دارد که احتمال رد شدن از سد بین گونه ای را تسهیل می کند. این مطالعه اطلاعات مفیدی را در رابطه با همگن بودن ژن H9N2 ویروس آنفلوانزای پرندگان ایران با دیگر ویروس های آنفلوآنزا پرندگان کشورهای پاکستان و اسراییل در سال های متوالی نشان می دهد که تاکید کننده ضرورت نظارت مستمر بر ژن های ویروس آنفلوانزا و بررسی تکامل سویه های آن در منطقه می باشد. مطالعه حاضر روی سکانس ژن NS 10 جدایه ویروس آنفلوآنزا تحت تیپ H9N2 از سال 2016-2007 انجام شد و پس از تکثیر با روش RT-PCR و استخراج ژنوم، ژن ها بطور کامل توالی یابی (با همان پرایمری که برای تکثیر ژن ها استفاده شده بود، انجام شد) و پس ازآن مورد آنالیز فیلوژنیک قرار گرفت. تمامی این10 جدایه در الل A و در تحت دودمان Korean با موتیف اسید آمینه در لیگاند PDZ KSEI قرار گرفتند که این مساله قرابت ژن های ویروس های پاکستانی را به جدایه های ایران نشان می دهد. ویروس های H9N2 از نظر ایجاد بیماری زایی فوق حاد نیستند اما با انتقال به گونه های پستاندار مثل انسان بیماری خفیفی را ایجاد می کنند. این ویروس ها علاوه بر اتصال به گیرنده های اختصاصی طیور، این توانایی را دارند که با تغییراتی در اسیدآمینه، به گیرنده هایی شبیه به استرین نوع انسانی اتصال یابند.
    کلید واژگان: ویروس آنفلوآنزا, بازآرایی, ژن NS, RT-PCR, آنالیز فیلوژنیک
    Zahra Keyvanlou *, Abdul Hamid Shoushtari
    The H9N2 influenza virus is of great importance due to the wide range of hosts due to gene rearrangement, which facilitates the possibility across of the Inter-species barrier. This study demonstrates useful information on the homogeneity of the H9N2 strain of avian influenza virus in Iran with other influenza viruses in Pakistani and Israeli birds for years to come, which emphasizes the need for continuous surveillance of the influenza virus genes and the evolution of strains of the strains in the region. The present study was conducted on the 10 isolates NS gene sequence of the H9N2 influenza virus strain from 2007-2016. After amplification by RT-PCR and genome extraction, the genes were completely Sequencing (it was carried out with the same primer used for gene amplification) and then phylogenetic analysis. All of these 10 isolates were included in allele A under the Korean lineage with amino acid motif KSEI in the PDZ ligand, which shows the similarity of Pakistani virus genes to C of Iran. H9N2 viruses are not highly pathogenic, But by transferring to mammalian species like humans, they cause mild illness .These viruses, in addition to connecting to poultry receptors, have the ability to connect to receptors similar to human type strains with changes in amino acids.
    Keywords: Influenza Virus, Rearrangement, NS gene, RT-PCR, Phylogenetic Analyze
  • عباس عالمیان، سید علی پوربخش، عبدالحمید شوشتری*، هادی کیوانفر

    پرورش طیور بومی در بین استانهای شمالی در بیشتر روستاها رونق دارد. طیور بومی نیز مانند طیور صنعتی در معرض بیشتر بیماریهای عفونی قرار داشته و با افزایش تراکم و گسترش پرورش طیور، احتمال رخداد بیماریها نیز افزایش یافته است. از جمله مهمترین این بیماریها، بیماری نیوکاسل میباشد. این بیماری در کشور ما بومی است و هر ساله موجب بروز خسارتهای زیادی در بین طیور صنعتی و بومی کشور میگردد. این مطالعه با هدف بررسی وضعیت شیوع و گردش ویروس در بین طیور بومی استانهای شمالی انجام گرفت. در این مطالعه 70 روستا از سه استان شمالی کشور شامل (استان مازندران 20 روستا، استان گیلان 20 روستا و استان گلستان 30 روستا) و 1374 پرنده (استان مازندران 600 پرنده، استان گلستان 400 پرنده و استان گیلان 374 پرنده) خونگیری شده است. نتایج حاکی از این بودکه تعداد 67 روستا (96%) سرم مثبت بودنده اند، (استان گلستان; 28 روستا (3/93%)، استان مازندران; 19 روستا (95%) و استان گیلان 20 روستا (100%). همچنین از مجموع 1374 پرنده تعداد 616 (45%) نمونه سرم مثبت بودند(استان مازندران، 246 نمونه (41%)، استان گلستان، 159 نمونه (8/39%) و استان گیلان، 211 نمونه (56%). بر اساس نتایج این مطالعه، میزان شیوع سرمی هم در سطح روستاها و هم در سطح پرنده ها بسیار بالا میباشد. این میزان بالای شیوع سرمی نشان دهنده مواجهه متعدد طیور بومی این استانها با ویروس نیوکاسل و گردش بالای ویروس در این استانها میباشد و میتوانند باعث گسترش بیماری به مزارع صنعتی شوند. اجرای برنامه های مناسب مراقبت و کنترل بیماری از جمله واکسیناسیون طیور بومی جهت کاهش میزان شیوع ضروری است.

    کلید واژگان: آنتی بادی, بیماری نیوکاسل, ماکیان, استانهای شمالی, HI
    Abbas Alemian, Seyied Ali Pourbakhsh, Abdul Hamid Shoushtari *, Hadi Keyvanfar

    Rural poultry like commercial poultries are susceptible to most of infectious diseases. In addition, by increasing the density of poultry farming, the probability of disease occurrence has been increased. Among the most important diseases, Newcastle disease has most of importance. Newcastle disease is endemic in Iran, and causes incidence of outbreaks among commercial and rural poultries, every year. The present study is conducted with the objective of figuring out the prevalence status and virus circulation among rural poultries of Northern provinces of Iran. In the study, 70 villages in 3 provinces (20 villages in Mazandaran, 20 villages in Golestan and 30 villages in Gilan Province) and a total of 1374 birds (600 birds in Mazandaran, 400 birds in Golestan, 374 birds in Gilan province) were sampled. A village considered as epidemiological unit. In the study, birds of 67 villages (96%) were found positive ( presence of antibodies against NDV) including Golestan Province, 28 villages (93.3%), Mazandaran Province, 19 villages (95%) and 20 villages of Gilan province (100%) Moreover, out of 1374 birds, 616 (45%) of them were seropositive against NDV. According to the results of this study, the rate of titer is very high in both levels of villages and level of birds. Such high rate of titer is indicative of continuous exposures of rural poultry of the mentioned provinces to Newcastle virus and high virus circulation rate of these viruses in the studied provinces.

    Keywords: Antibody, Newcastle disease, poultry, Northern provinces, HI
  • آزاد رحیمی *، عبدالکریم زمانی مقدم، عبدالحمید شوشتری
    تکامل و ایجاد سروتیپهای جدید و مختلف ویروس برونشیت عفونی بطور مستمر در حال انجام است که این امر هر ساله ضررهای اقتصادی فراوانی به صنعت طیور وارد می کند، لذا تعیین سریع و صحیح سروتیپ ها جهت انتخاب و توسعه ی واکسنهای مناسب سویه های هر منطقه به عنوان یک اصل مهم و تعیین کننده در کنترل این بیماری است. در این مطالعه نمونه ها از نای، ریه و کلیه از گله هایی با علائم تنفسی، مشکوک به بیماری برونشیت عفونی از گله های پرورش مرغ گوشتی استان فارس و چهارمحال و بختیاری به تعداد 40 نمونه بصورت تجمیع از 40 گله جمع آوری شدند. نمونه پس از آماده سازی برای ردیابی ویروس برونشیت عفونی با آزمایش RT-PCR انتخاب شد، سپس محصول PCR خالص شده برای تعیین توالی قطعه ای به طول 464 جفت باز از ژن S1 به شرکت MWG آلمان ارسال شد. پاسخ توالی های اخذ شده بررسی و تصحیح شد. نتایج این مطالعه نشان داد سویه ی variant 2 تبدیل به سویه ی غالب در این دو منطقه شده است. بیشترین شیوع جدایه ها مربوط به سویه ی variant 2 بود که شامل 75% نمونه ها (9 نمونه) می گردید و پس از آن سویه ی ماساچوست قرار داشت که در این بین 6/16% نمونه ها (2 نمونه) و یک نمونه (8%) هم متعلق به سویه واکسن H120 بود. بنابراین با توجه به متفاوت بودن سویه های غالب در مناطق مورد مطالعه واکسنهای موجود در بازار نمی تواند محافظت ایمنی مناسبی ایجاد کند و نیازمند توسعه ی واکسنهای جدید است.
    کلید واژگان: برونشیت عفونی, سکانس S1, جدایه های variant 2, RT-PCR, برونشیت عفونی ایران
    Rahimi A. ¹*, Zamani, moghadam A. K.², Shoshtari A. H.³
    Evolution and formation of IBV’s new serotypes Bare continuously in processing that every year cause a lot of economic loses in poultry industries, so rapid and accurate determination test is critical in order to choose and develop suitable vaccines for controlling of this disease in every region as an important and determinative principle. Despite vaccination against IBD, this disease is one of the economical important disease in the poultry industry that every year cause a lot of economic loses and despite vaccination also it happens. Specimens of trachea and lungs were taken from 40 suspected flock with respiratory problems collected from chicken farms in Fars and Chaharmahal and Bakhtiari Provinces. Samples were tested by Chicken Red Blood Cell Hem-agglutination and negative samples selected for determining Infectious bronchitis viruses by RT-PCR test. Then PCR product was purred by "High pure PCR product purification Kit" Germany (Roche) company has been sent to sequencing a piece with 464 nucleotide base pair. Sequences checked and corrected by MEGA 7 program. Phylogenetic analysis was made by MEGA 7 program using sequencing and National Center for Biotechnology Information. This study results show the majority of flocks infected by variant 2 (75% samples), then mass type (16.6% samples) and finally (8% samples) were H120 vaccine- like isolates. So in according to difference in dominant serotypes in this study with market place vaccines could not create cross immune therefore need to develop new vaccines.
    Keywords: Infectious bronchitis, S1 sequencing, Infectious bronchitis isolates, RT-PCR, IranInfectious bronchitis, variant 2
  • محمدحسین فلاح مهرآبادی*، فرشاد تهرانی، علیرضا باهنر، عبدالحمید شوشتری، آرش قلیانچی لنگرودی
    مقدمه و اهداف
    آنفلوانزای فوق حاد پرندگان از جنبه های اقتصادی و بهداشت عمومی دارای اهمیت است. پرندگان مهاجر آبزی و کنار آبزی مخزن اصلی و عامل جابجایی ویروس های آنفلوانزا هستند. هدف از مطالعه ارزیابی خطر گسترش و انتقال ویروس های آنفلوانزای فوق حاد (H5) در کشور است.
    روش کار
    در این مطالعه کیفی از روش های مصاحبه ساختارمند (Structured Interview) و مباحثه گروهی (focus group discussion) برای ارزیابی خطر ورود و گسترش ویروس های آنفلوانزای فوق حاد به کشور در طی سال های 2015 تا 2018،  استفاده شده است.
    یافته ها
    بیش از 300  تالاب ها، دریاچه ها و آبگیر در کشور وجود دارد و 517 گونه پرنده شناسایی شده که قوها، غازها، اردک ها و چنگر معمولی بیشترین تعداد پرندگان مهاجر ورودی هستند. ضعف در شناسایی پنجره های ورود ویروس، ضعف در مراقبت غیرفعال در پرندگان مهاجر، نابسامانی و عدم نظارت موثر بر امر صید و شکار پرندگان مهاجر، انتقال بدون ضابطه پرندگان صیدشده به مراکز نگهداری، ناتوانی در نظارت بر عرضه پرندگان وحشی مهاجر در بازارهای محلی به دلایل فنی و غیرفنی، خلاءهای قانونی در برخورد با متخلفین، ضعف در آموزش در کلیه سطوح، وجود شرایط مناسب جهت تماس نزدیک پرندگان مهاجر با طیور روستایی و صنعتی و ضعف در تحقیقات آنفلوانزا در پرندگان مهاجر مهم ترین عوامل موثر در گسترش ویروس ها در کشور هستند.
    نتیجه گیری
    آنفلوانزای فوق حاد در سال های آتی نیز یکی از مهم ترین چالش های صنعت طیور خواهد بود. حل معضل آنفلوانزا نیازمند عزم ملی، نگاه فرابخشی، همکاری و همیاری عملی دستگاه های مرتبط و برنامه ریزی کوتاه مدت و بلندمدت بر اساس واقعیت های موجود است.
    کلید واژگان: آنفلوانزای فوق حاد, پرندگان مهاجر, گسترش, ارزیابی خطر, ایران
    MH Fallah Mehrabadi*, F Tehrani, A Bahonar, A Shoushtari, A Ghalyanchilangeroudi
    Background and Objectives
    HPAI has economic and public health importance. Aquatic and shore migratory birds are the main reservoirs and the cause of the spread of viruses across countries. The aim of study was risk assessment of the spread of the avian influenza H5 viruses.  
    Methods
    In this qualitative study, structured interviews and focus group discussions were used to assess the risk of the introduction and spread of highly pathogenic avian influenza viruses (H5-subtypes) into Iran.  
    Results
    Over 300 wetlands, natural and artificial lakes, ponds, and more than 517 bird species (swans, geese, ducks, and coots) are identified in Iran. Weakness in detecting virus entry windows, weakness in passive surveillance of migratory birds, inadequate supervision on hunting of migratory wild birds, movement of  hunted birds without any criteria without the control of the Veterinary Organization, inability to monitor the supply of migratory birds in the LBMs, law weaknesses in dealing with offenders, lack of training for people, presence of suitable conditions for close contacts between wild birds and backyard and industrial poultry, and weakness of research on AI in migratory birds were the most important factors influencing the spread of these viruses.  
    Conclusion
    HPAI will be one of the most important challenges for the poultry industry and public health.  Solving this challenge requires national determination, overhead organizational views, collaborative and practical cooperation of related organizations, and short and long-term planning based on the realities of the country.
    Keywords: Highly pathogenic avian influenza, Migratory birds, Spread, Risk assessment, Iran
  • محمدحسین فلاح *، نجمه معتمد، عبدالحمید شوشتری، آرش قلیانچی لنگرودی
    هر ساله با مهاجرت پرندگان مهاجر بین کشورهای مختلف طغیانهای آنفلوانزای فوق حاد در کشورهایی که این پرندگان به آنها مهاجرت می کنند مشاهده می شود. افزایش طغیانهای این بیماری به علت خسارات اقتصادی شدید و اثرات آن بر سلامت عمومی، نگرانی را در جوامع جهانی افزایش داده است. بیشتر گونه های پرندگان وحشی غیر آبزی به آنفلوانزای فوق حاد حساس بوده و به دلایل مختلف از جمله پرواز آزادانه و تماس با طیور اهلی و در برخی موارد با طیور صنعتی، مهاجرت برخی از گونه ها و جابه جایی بین کشورهای مختلف و تجارت و قاچاق آنها در سطح بین المللی و تماس نزدیک به انسان به علت نگهداری آنها به عنوان سرگرمی و یا تفریح، اهمیت بالقوه ای در اکولوژی ویروسهای آنفلوانزای فوق حاد دارند. بیشتر گزارشات بیماری در پرندگان وحشی غیر آبزی ناشی از تحت تیپ H5N1 می باشد. کمترین حساسیت به ویروسهای آنفلوانزای فوق حاد در دو گونه کبوترها و سارها مشاهده شده است و احتمالا کمترین نقش را در اپیدمیولوژی این ویروس ایفا می کنند. در حالیکه سایر گنجشک سانان، شاهین سانان و طوطی ها به آنفلوانزای فوق حاد حساسیت بالایی دارند. در بیشتر طغیان های گزارش شده از شاهین سانان و کلاغ، علت اصلی ابتلا مصرف لاشه پرندگان مبتلا و یا مجاورت با آنها بوده است. علت اصلی حساسیت گونه ها به ویروس های آنفلوانزا، وجود گیرنده های اختصاصی آلفا 2 و 3 در دستگاه تنفس و گوارش آنها می باشد. علایم غالب مشاهده شده در پرندگان وحشی غیر آبزی، علایم عصبی است و بیشترین غلظت ویروس در مغز مشاهده شده است. با توجه به حساسیت بیشتر گونه های پرندگان وحشی غیر آبزی و به دلیل تعداد زیاد این پرندگان و تماس بین پرندگان مهاجر و طیور بومی و صنعتی و احتمال انتقال آلودگی به سایر آنها و انسان، در طراحی برنامه های مراقبت آنفلوانزا و در همه گیری ها باید این پرندگان را نیز در نظر گرفت.
    کلید واژگان: آنفلوانزای فوق حاد, کبوترسانان, گنجشک سانان, شاهین سانان و طوطی سانان
    M.H. FallahMehrabadi *, N. Motamed, A.H. Shoushtari, A. GhalyanchiLangeroudi
    Every year, the outbreaks of highly pathogenic avian influenza occurs when migratory birds migrate to different countries.. Because of high economic losses and its effects on public health, increase in the outbreaks of this disease,have increased concern in global societies.Most of the non-waterfowl wild bird Species are susceptible to HPAI and for various reasons, including free-range flying, contact with domestic poultry and in some cases contact with industrial poultries, migrating some species and moving between different countries, international trade, in some cases smuggling of them, andclose contact with humans because of their maintenance as entertainment or as games bird, they arepotentialy important in the ecology HPAI viruses. Most reports of this disease in the nonwaterfowl wild birds are the H5N1 subtype. The least susceptibility to HPAI viruses has been observed in the pigeon and starling spicies, and probably these spicieshavethe least role in the epidemiology of these viruses. While other Passeriformes, Falconiformes and parrots are highly susceptible to HPAI. In the most reported outbreaks in the Falconiformes and crows, the main causes of the infection were using the carcasses of the affected birds or contact with them. The main cause of the susceptibility of these birds to the influenza viruses is the presences of the alpha 2 and 3 sialic acid receptors in the respiratory and gastrointestinal tracts of them. The most common signs that observed in these birds are neurologic signs and the highest viral concentration has been observed in the brain.Due to the susceptibility of non-waterfowl wild birds, and the large number of these birds and the close contact between migratory birds with domestic and industrial birds and the possibility of transmission of infection to other birds and humans, these birds should be considered in the designing of influenza surveillance programs and in the outbreaks of HPAI.
    Keywords: Highly pathogenic avian influenza, Columbiformes, Falconiformes, Passeriformes, Psittaciformes.
  • منصور میاحی *، فرهاد هاشم زاده، عبدالحمید شوشتری، مسعودرضا صیفی آباد شاپوری، مسعود قربانپور
    زمینه مطالعه
    عفونت با ویروس بیماری عفونی بورس (IBDV) ممکن است به سرکوب ایمنی در بوقلمون منجر شده و باعث گردد بوقلمون ها نتوانند دربرابر عوامل بیماریزا یا کم بیماریزا مقاومت نمایند.
    هدف
    بررسی تاثیر IBDV بر پاسخ بوقلمون به ویروس آنفلوانزای پرندگان (AIV).
    روش کار
    یک صد قطعه جوجه بوقلمون یک روزه تجاری هیبرید فرانسه به طور تصادفی به 4 گروه مساوی 25 قطعه ای تقسیم شدند. جوجه های گروه اول و دوم در سن یک روزگی104CID50 از IBDV به روش خوراکی آلوده شدند. در 30 روزگی جوجه های گروه های اول و سوم با 106EID50 از AIVا(H9N2) به روش داخل بینی-چشمی آلوده شدند. جوجه های گروه چهارم به عنوان شاهد غیر آلوده نگه داری شدند. تمام گروه ها با واکسن بیماری نیوکاسل واکسینه شدند.
    نتایج
    در روزهای 30، 37، 44، 51 و 58 خون گیری و عیار پادتن ضد نیوکاسل و آنفلوانزا آن ها با آزمایش HI اندازه گیری شد. در روزهای 33 و 41 سه پرنده از هرگروه آسان کشی گردید و پاسخ تکثیر لنفوسیت های طحالی آن ها به فیتوهماگلوتینین ارزیابی شد. علایم آنفلوانزا در گروه 1 شدیدتر و بادوام تر از گروه 3 بود. میانگین عیار پادتن ضد NDV در تمامی زمان های نمونه گیری ولی عیار پادتن ضد AIV از روز 14 بعد از عفونت در گروه 1 به مراتب کمتر از گروه 3 بود. پاسخ تکثیر لنفوسیت های طحالی به فیتوهماگلوتینین بین دو گروه 1 و 3 تفاوت معنی داری نداشت.
    نتیجه گیری نهایی: ویروس بیماری بورس عفونی می تواند باعث تضعیف پاسخ ایمنی در بوقلمون شده و علایم شدیدتر و بادوام تر آنفلوانزا را باعث شود.
    کلید واژگان: بوقلمون, آنفلوانزای طیور, بیماری عفونی بورس, سرکوب ایمنی
    Mansouir Mayahi *, Farhad Hashemzade, Abdol Hamid Shoshtary, Masoud Reza Seyfi Abad Shapouri, Masoud Gourbanpoor
    Background
    Infection by infectious bursal disease virus (IBDV) in turkeys may lead to immunosuppression effects and therefore turkeys could not resist against pathogenic or less pathogenic agents.
    Objective
    The aim of present study was to examine the effects of IBDV on response of turkey’s poults to avian influenza virus (AIV).
    Methods
    A total of 100 day-old poults were divided randomly into 4 equal groups. Groups 1 and 2 were infected with 104CID50 of IBDV by oral route at 1 day of age; groups 1 and 3 were infected with 106 EID50 of AIV (H9N2) by the oculo-nasal route at day 30. Poults of group 4 were kept as uninfected control group. All groups were vaccinated with Newcastle disease virus (NDV) vaccine. Blood samples via wing web were collected at days 0, 30, 37, 44, 51 and 58 and anti- NDV and anti-AIV serum titers were measured by HI test. At days 33 and 41 three poults of each group were euthanized and their splenic lymphocytes proliferation repose to phytohaemagglutinin was assessed.
    Results
    Influenza clinical signs were prolonged and more intensive in group 1 than group 3. The mean HI titers to NDV were significantly lower in group 1 than group 3, in all sampling times, but anti-AIV titers were significantly lower in group 1 compared to group 3 from days 14 AIV (H9N2) post infection. The lymphocyte proliferation assay with PHA did not show any differences between groups 1 and 3.
    Conclusions
    IBDV suppresses immune response in turkey and causes prolonged and more intensive clinical signs after challenge with AIV.
    Keywords: Turkey, Avian Influenza, IBD, Immunosuppression
  • یدالله اسدپور*، سهراب عاقبتی، فرشته زاهدی، ابراهیم رحیم آبادی، عبدالحمید شوشتری
    برونشیت عفونی طیور (IB) به وسیله کروناویروس ها ایجاد می شود. برونشیت یکی از عوامل مهم خسارت اقتصادی در طیور بوده که سبب درگیر شدن بیماری های تنفسی ، نفریت و کاهش تولید و کیفیت تخم مرغ می شود. ویروس برونشیت دارای سروتیپ های متعددی بوده که ایمنی متقاطع در مقابل همدیگر ایجاد نمی کنند. هدف از این مطالعه ردیابی سروتیپ های ویروس برونشیت عفونی طیور در فارم های گوشتی استان گیلان دارای علائم تنفسی بوده است. در مطالعه حاضر به طور تصادفی نمونه های نای و ریه 28 گله گوشتی که دارای علائم تنفسی بودند جمع آوری شد. آزمایش RT- PCR بعد از استخراج RNA ویروس از نمونه ها جهت تشخیص برونشیت عفونی انجام شد. 20 گله (70درصد) از تعدادکل 28 گله گوشتی از نظر برونشیت عفونی تایید شد. آزمایش Nested PCR جهت شناسائی سروتیپ های درگیر با استفاده از پرایمرهای اختصاصی سه سروتیپ Mass، 1B/ 793 و D274 انجام شد. نتایج نشان داد که 13 نمونه (65درصد) متعلق به سروتیپ Mass، 7 نمونه (35 درصد) به سروتیپ B/ 793 و در 2 نمونه (10درصد) هر دو سروتیپ Mass و
    B/ 793 به طور توامان ردیابی گردید امادر هیچ یک از نمونه ها سروتیپ D274 شناسائی نشد. نتیجه اینکه به منظور وضعیت ایمنی بر علیه برونشیت در گله های گوشتی استان گیلان، استفاده دو سروتیپ ماساچوست و B/ 793 در برنامه واکسیناسیون و امنیت زیستی توصیه می شود.
    کلید واژگان: برونشیت طیور, RT-PCR, Nested- PCR, گیلان
    Y. Asadpour *, S. Aghebati, F. Zahedi, E. Rahimabadi, A.H. Shooshtari
    Avian infectious bronchitis (IB) is caused by corona viruses. Infectious bronchitis virus (IBV) is a major cause of economic losses in poultry and can be involved in respiratory disease, nephritis, and both poor egg production and quality by reproductive tract infection. IBV has many serotypes that do not confer cross protection against each other. The aim of this study was conducted to detect IBV serotypes in broiler chicken farms of Guilan province were involveled with clinical signs respiratory disease. In the present study, tracheal and lung tissue samples were collected randomly from 28 broiler chicken farms with respiratory signs. Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction (RT-PCR) method was done after extraction of RNA virus from samples for diagnosis of IBV. 20 flocks (70%) out of 28 flocks were positive. Nested- PCR method was performed for detection of 3 serotypes of IBV (Mass, 793/B and D274) by using of specific primers. The results showed that 13samples (65%) belonged to Mass serotype, 7 samples(35%) to 793/B and both of Mass, 793/B serotypes were detected from 2 samples (10%), but in all of samples D274 serotype was not detected. In conclusion, for the best immunity against IB in broiler flocks of Guilan province, using of 2 serotypes (Mass, 793/B) in vaccination programs with biosecurity in farms are recommended.
    Keywords: Infectious bronchitis virus, RT-PCR, Nested- PCR, Guilan
  • سکینه زندیه، محسن لطفی*، مرتضی کمال زاده، نادیه شیری، عفت پرمور، علی اسحاقی، شهین مسعودی، محمدحسن حبل الورید، عبدالحمید شوشتری، حسین گودرزی، سید محمد جواد طاهر مفرد، سعید امانپور
    بیماری بورس عفونی (بیماری گامبورو) از سراسر دنیا گزارش شده و اهمیت اقتصادی- اجتماعی بیماری در سطح بین المللی قابل ملاحظه است. برای کنترل بیماری چندین نوع واکسن تجاری معرفی شده اند که یا بر پایه کشت سلول و یا بر پایه کشت در تخم مرغ جنین دار هستند. چنانچه واکسن های بر پایه سلولی بیماری گامبورو بی ضرر و کارا باشند، بسیار مقرون به صرفه هستند. سلول اولیه فیبروبلاست جنین جوجه (CEF) پر مصرف ترین سلول برای تهیه واکسن بورس عفونی بر پایه سلولی است. تهیه و استفاده از سلول CEF بسیار سخت و زمانبر است. در این مطالعه برای اولین بار توجه به رفرنس TRS 978 Annex3، WHO یک سلول سوسپانسیون با منشاء لنفوئیدی گوسفند (H1 Cell Line) که حساسیت خود را به ویروس واکسینال گامبورو نشان داده است، تعیین ویژگی گردید. این سلول تمام آزمایش ها را با موفقیت پشت سر گذاشت و برای تکثیر ویروس بورس عفونی مناسب است.
    کلید واژگان: سلول اولیه فیبروبلاست جنین جوجه, بیماری بورس عفونی طیور, تعیین ویژگی سلول, سلول لاین لنفوئیدی گوسفند, بیماری گامبورو
    Sakineh Zandieh, Mohsen Lotfi *, Morteza Kamalzadeh, Nadieh Shiri, Effat Parmour, Ali Eshaghi, Shahin Masoudi, Mohammad Hasan Hablolvarid, Abdolhamid Shoushtari, Hosein Goudarzi, Seyyed Mohammad Javad Taher Mofrad, Saeid Amanpour
    La bursite infectieuse (maladie de Gumboro) a été rapportée de partout dans le monde et limportance socio-économique de cette maladie est considérable au niveau international. Plusieurs types de vaccins commerciaux ont été introduits pour contrôler cette maladie. Ces vaccins sont produits par culture cellulaire ou dans des œufs embryonnés. Si les vaccins à base de cellules contre la maladie de Gumboro s’avèrent sans danger et efficaces, ils seront beaucoup plus abordables pour le traitement de la maladie. Les fibroblastes embryonnaires de poussin (CEF) sont les cellules les plus populaires pour la production du vaccin contre la Bursite infectieuse par culture cellulaire. Le procès de préparation et dutilisation des cellules CEF est très long et difficile. Dans cette études, l’attention est portée pour la première fois sur la référence Annex3 TRS 978, WHO, une cellule en suspension de moutons dorigine lymphoïde (H1 Cell Line) ayant montré une sensibilité au virus vaccinal de Gumboro. Cette cellule a passé avec succès tous les tests et a été adaptée à la réplication du virus de la Bursite infectieuse.
    Keywords: Cellule embryonnaire fibroblastique de poussin, Bursite infectieuse des volailles, Caractérisation des cellules, Lignée cellulaire lymphoïde de mouton, La maladie de Gumboro
  • عبدالحمید شوشتری*
    در این مطالعه آلودگی گله های گوشتی به ویروس بیماری بورس عفونی قبل از واکسیناسیون مورد بررسی قرار گفت. از 25 گله مرغ گوشتی در استان تهران 10 پرنده 12-10 روزه قبل از واکسیناسیون انتخاب و پس از وزن کشی نمونه های بورس گرفته شد. نمونه های بورس اخذ شده؛ جهت ردیابی ویروس با آزمایشات مولکولی RT-PCR مورد استفاده قرار گرفتند. نتایج آزمایشات RT-PCR که با استفاده از پرایمرهای اختصاصی ؛ قطعه ی 643 جفت بازی از منطقه ی متغیر VP2 تکثیر شد؛ نشان داد که دو گله 4 و9 از نظر وجود ژنوم ویروس بیماری بورس عفونی مثبت بودند. برای شناخت بیشتر ویروس ردیابی شده چگونگی هضم آنزیمی محصولات PCR توسط آنزیمهای اندونوکلئاز SacI و SspI مورد مطالعه قرار گرفت. نتایج هضم آنزیمی نشان داد که محصولات PCR به دست آمده از نمونه های 4 و 9 توسط آنزیم SacI شکسته نشد. با این همه آنزیم SspI توانست تنها محصولات PCR یکی از جدایه ها را برش دهد (گله 9) در حالی که نمونه 4 توسط این آنزیم هضم نشد. میانگین شاخص بورس این دو گله کمتر از گله های آلوده نشده بود منتهی تنها شاخص بورس گله ی 4 به طور معنی دار از گله های غیر آلوده کمتر بود (001/0 > p). با توجه به نتایج این مطالعه می توان اظهار داشت که امکان آلوده شدن گله های مرغ گوشتی به ویروس های بسیار حاد این بیماری قبل از واکسیناسیون وجود دارد.
    کلید واژگان: ویروس بیماری بورس عفونی, جوجه های گوشتی, FLP- Nested PCR- RT-PCR, شاخص بورس
    A. H. Shoushtari *
    This study was conducted to detect the infection with infectious bursal disease virus (IBDV )in broiler flocks before vaccination in Tehran provience . Ten birds of 10 to 12 days olds from each 25 boiler flocks were selected .The mean bursal indexes of all flocks were determined. To detect IBDV genome in bursal samples a RT – PCR test targeting a 643 base pairs segment in VP2 gene were conducted. Two flocks( samples 1 and 2) were posiive indicating IBDV infection. For Further indentification of IBDV , the RT-PCR products were incubated to be digested by endonuclease enzyms SacI and SspI respectively. The RT-PCR products of positive samples ( samples 4 and 9) remaind undigested when were incubated with SacI, an indication for non vaccinal viruses. However only the RT-PCR products of sample 9 could be digested by SspI as the RT-PCR of samples 4 remaind undigested. Although the mean bursal indexes of these two infected flocks were less than those of noninfected ones, however only mean bursal indexes of the flock 4 were significantly different from those of non-infected flocks. In conclusion, this study showed that infection of broilers with very virulent pathotype of IBDV is probable before vaccination.
    Keywords: Infectious bursal disease virus, Broilers, FLP- Nested PCR- RT-PCR, Bursal Index
  • محمد صادقی، احمد بناکار، عبدالحمید شوشتری
    در این پژوهش روشی هوشمند به منظور تشخیص توامان بیماری های نیوکاسل، آنفلوانزا و برRBFونشیت پرنده از روی سیگنال صدای قلب پرداخته شده است. در ابتدا جوجه ها به 4 دسته تقسیم شدند. یک گروه به عنوان نمونه های شاهد در نظر گرفته شدند و با ویروس هیچ گونه تماسی نداشتند و 3 گروه باقی مانده به ترتیب به ویروس های نیوکاسل، آنفلوانزا و برونشیت آلوده شدند. سیگنال های حوزه زمان صدای قلب توسط تبدیل فوریه سریع و تبدیل موجک گسسته دابچی نوع اول در دو سطح تجزیه به ترتیب به حوزه های فرکانس و زمان- فرکانس انتقال داده شدند. در مرحله داده کاوی از سیگنال های هر سه حوزه 25 ویژگی آماری استخراج شدند و با استفاده از IDE بهترین ویژگی ها انتخاب شدند. با استفاده از ماشین بردار پشتیبان و نظریه شواهد دمپستر- شافر سیگنال های صدای قلب جوجه ها طبقه بندی شدند. دقت میانگین، Specificityو Sensitivity تلفیق طبقه بندها به منظور تشخیص بیماری ها به ترتیب93/81، 29/93 و 28/82 درصد به دست آمد.
    کلید واژگان: ماشین بردار پشتیبان, تبدیل موجک گسسته, بیماری طیور, نظریه شواهد دمپستر, شافر
  • سمیه دیباوند، منصور میاحی، عبدالحمید شوشتری، مسعودرضا صیفی، رمضانعلی جعفری
    کم خونی عفونی به عنوان یکی از مهم ترین بیماری های سرکوب کننده ی ایمنی در ماکیان می باشد. عامل بیماری از سیرکوویروس ها ایکوزاهیدرال، بدون غشا می باشد. ژنوم حلقوی و DNA تک رشته ای دارد. ویروس کم خونی عفونی ماکیان (CIAV) اخیرا به عنوان تنها جنس گیروویروس دسته بندی شده است. شدت نشانه های بالینی به چندین فاکتور از قبیل دوز ویروس و سن آلودگی وابسته می باشد. همچنین معتقدند که ایجاد مقاومت سنی با بلوغ سیستم ایمنی مرتبط می باشد. هدف این مطالعه، ردیابی ویروس کم خونی عفونی در گله های گوشتی استان خوزستان در جنوب غربی ایران بود. نمونه ها از 50 گله ی گوشتی تهیه و به طور تصادفی از هر گله 10 کبد از لاشه های کشتار شده جدا گردید. نتایج نشان دادند که از نظر ویروس کم خونی عفونی، 32 گله (64 درصد) از 50 گله ی گوشتی از نظر CAV با روش مولکولی PCR مثبت هستند. همچنین 13 گله از 24 گله ی گوشتی تجارتی (16/54 درصد) به روش الایزا مثبت بودند. این مطالعه نشان داد آلودگی با ویروس کم خونی عفونی ماکیان در گله های گوشتی منطقه گسترده است و در گله های مرغان گوشتی به میزان بالایی وجود دارد.
    کلید واژگان: کم خونی عفونی ماکیان, ایمونوساپرسیو, گله گوشتی, خوزستان
    Somayeh Dibavand, Mansour Mayahi, Abdol Hamid Shoushtari, Masoud Reza Seifi, Ramezanali Jafari
    Chicken infectious anemia virus (CIAV) is one of the most important immunosuppressive in chickens. Circoviruses are non-enveloped and icosahedral viruses. Their genomes are circular, single-stranded DNA. The CAV is recently re-classified as the only member of the genus Gyrovirus. The severity of clinical disease depends on several factors, including virus dose, age at infection. It is believed that the development of age resistance is strongly associated with the maturation of immune system. The aim of this study was to detect CIAV infection in broiler chickens of Khuzestan province, Southwestern of Iran. Samples from 50 broiler chicken at slaughterhouse were collected randomly 10 liver tissues. Results showed 32 (64%) of 50 broiler chicken were positive with PCR. Thirteen of 24 farms (54.16%) in broiler chickens were positive by ELISA test. It was concluded that CAVs infection widespread in broiler flocks of this area and proved high rate subclinical form of CIAV in broiler poultry farms.
    Keywords: Chicken infectious anemia virus, immunosuppressive, broiler chicken, Khuzestan
  • مسعود هاشم زاده *، شهین مسعودی، وحید کریمی، عبدالحمید شوشتری، آرش قلیان چی لنگرودی، محسن محمودزاده
    زمینه مطالعه

    بیماری برونشیت عفونی پرندگان بسیار مسری، که می تواند موجب ضعف در وزن گیری و کاهش کارایی غذا در پرندگان آلوده شود. وجود سروتیپTMژنوتیپ های متعدد گزارش شده، کنترل بیماری را با واکسن مشکل تر نموده است. به هر حال تنها معدودی اسیدهای آمینه پروتئین 1S مسئول حفاظت در سویه های واکسن و فیلدی می باشند.

    هدف

    مقایسه جدایه های ویروس برونشیت در گله های طیور صنعتی ایران با واکسن های رایج مورد مصرف می باشد.

    روش کار

    قطعه ای از ژن پروتئین 1S که ناحیه پر تغییر و پایدار را پوشش می دهد، در جدایه های ویروس برونشیت پرندگان ایران با استفاده از روش R T - PCR تکثیر، تعیین توالی و مورد مقایسه قرار گرفتند.

    نتایج

    تجزیه و تحلیل فیلوژنی توالی اسیدهای آمینه نشان داد که هشت جدایه از نه جدایه مورد مطالعه با واکسن 52 H و120H بیش از 21/8% اختلاف و شش جدایه نیز حداقل 22/7% با سویه واکسن سویه 4/94 و هر نه جدایه با سروتیپ D 274 حداقل 20% اختلاف داشتند.
    نتیجه گیری نهایی: نتایج بدست آمده برای بررسی مستمر استراتژی های کنترل بیماری و نظارت بر سویه های در گردش ضروری می باشد، بنابراین اهمیت اصلاح برنامه واکسیناسیون را در ایران تاکید می نماید.

    کلید واژگان: برونشیت عفونی ماکیان, شجره شناسی, واکسن
    Hashemzadehm., Masoudi, Sh.*, Karimiv., Shoushtaryh., Ghalyanchi, Langeroudia., Mahmoodzadeh, M
    Background

    Infectious bronchitis is a highly contagious disease which may cause poor weight gain and low feed efficiency in infected chickens. There are a large number of reported serotypes/genotypes, which makes the control of the disease more difficult through vaccination. However, there are only a few amino acid differences in the S1 protein of vaccine and wild type strains which are responsible for protection.

    Objectives

    The purpose of this study is to compare IBV variants isolated from commercial chicken flocks in Iran with currently used vaccine strains. METHODES: The partial S1 gene of the spike protein, covering a hypervariable and constant regions, was amplified and sequenced using conventional RT-PCR.

    Results

    Phylogenetic analysis of amino acid sequences revealed that eight of total nine isolates were divergence at least 21.8% from vaccinal Massachusetts serotypes, and six of nine isolates were divergence at least 22.7% from 4/91, and none of the nine isolates were similar to Dutch-type, D274,vaccine serotypes.

    Conclusions

    These findings are essential for continuous surveillance disease control strategies and monitoring of variants, and thus emphasize on the importance of improving the vaccination program in Iran.

    Keywords: Infectious bronchitis, phylogenetic, vaccine
  • محمد ابراهیمی، سورن گریگوریان، عبدالحمید شوشتری*، فاطمه عابدینی، حسن مویینی
    اولین گزارش شیوع ویروس آنفلوآنزادر گله های طیور ایران مربوط به سال 1998 می باشد. درصد مرگ و میر بالا و کاهش شدید تولید تخم مرغ از عوارض اقتصادی است که به ویروس آنفلوآنزا سویه H9N2 نسبت داده می شود. در مطالعه حاضر ژن NS ده نمونه ویروس آنفلوانزا طیور سویه H9N2 که طی سال های 1386-1377 از استانهای مختلف ایران جدا شده بودند بطور کامل از نظر توالی اسیدهای آمینه و نوکلئیک وفیلوژنی مورد تجزیه و تحلیل قرار گرفتند. نتایج نشان داد که تمام این ویروسها متعلق به آلل A هستند و تحت تیپ ویروس کره ای A/Chicken/Korea/38349-p96323/96 به دو گروه مجزا تقسیم می شوند. میزان همولوژی ژن NS در بین نمونه های مورد مطالعه از 7/98-6/91 درصد متغیر بوده است. موتیف شناساگر لیگاند PDZ در ویروسهای گروه اول این مطالعه EDEV (N=6) و یا (N=1) ESEV بود در حالیکه موتیف شناساگر لیگاند PDZ ویروسهای گروه دوم KSEV (N=3) بود. مطالعه حاضر اطلاعات مولکولار اپیدمیولوژیک بسیار مفیدی در رابطه با مسیر تکاملی و منشا ویروسهای آنفلوآنزا که در طی سالهای 1377 تا 1386 در مرغداری های ایران در گردش بودند را در اختیار ما قرار می دهد.
    کلید واژگان: فیلوژنتیک پروفایلینگ, ویروس آنفلونزا, H9N2, ژنNS, ایران
    M. Ebrahimi, S. Grigorian, A. Shoushtari *, F. Abedini, H. Moeini
    The earliest evidences on circulation of Avian Influenza (AI) virus on the Iranian poultry farms date back to 1998. Great economic losses through dramatic drop in egg production and high mortality rates are characteristically attributed to H9N2 AI virus. In the present work non-structural (NS) genes of 10 Iranian H9N2 chicken AI viruses collected during 1998-2007 were fully sequenced and subjected to a phylogenetic analysis. The observations proved allele A was the single-detectable type of the NS gene within the studied isolates. All the examined Iranian isolates fell into the Korean sublineage with a relatively broad sequence homology (91.6-98%) in nucleotide construction of the NS genes. The motif for PDZ ligand recognition of the group one isolates was either EDEV (N=6) or ESEV (N=1) While all viruses as group two contained a PL motif “KSEV” (N=3). The present work provides useful epidemiological data at molecular level on source and contemporary evolution of H9N2 virus population in Iran.
    Keywords: Phylogenetic profiling, Influenza Virus, H9N2, NS gene
  • فریبا گلچین فر، رسول مدنی، تارا امامی، سیدعلی پوربخش، عبدالحمید شوشتری
    آنفلوانزای مرغی (AI) یک بیماری بسیار مسری در طیور است که شیوع بیماری می تواند پیامدهای چشمگیری در اقتصاد و سلامت داشته باشد. جهت نظارت موثر بر بیماری ها، نیاز به سنجش سریع و حساس آنتی بادی علیه پروتئین ویروس آنفولانزا جهت تشخیص می باشد. به منظور ریشه کن کردن عفونت آنفلوانزای مرغی در طیور و اجرای واکسیناسیون با پیشنهاد سازمان های بین المللی بکارگیری استراتژی DIVA، امکان تمایزطیور آلوده از واکسینه شده را فراهم می کند. بدین منظور سیستمی بر اساس تشخیص آنتی بادی علیه پروتئین های غیر ساختاری (NS1) ویروس آنفولانزای پرندگان پیشنهاد شده است، تادر صورت بروز بیماری در گله ی واکسینه شده امکان تشخیص طیور آلوده وجود داشته باشد. در این پروژه از دو پپتید حفاظت شده پروتئین NS1 جهت طراحی یک روش الایزا بهره برداری شده است. این روش الایزا که بر مبنای پپتید می باشد، می تواند سرم آلوده و واکسینه شده را با توجه به تیتر آنتی بادی تفکیک نماید. تجربه حاضر نشان میدهد با تست الایزا بر پایه پپتید پروتئین NS1 می توان تیتر آنتی بادی در طیور واکسینه و آلوده را سنجش نمود. این یافته ها تفاوت قابل توجهی در تکرار ویروسی در جوجه ها را نشان می دهد که نتیجه تنوع در تولید آنتی بادی علیه NS1 است که به عنوان روش تشخیصی برای شناسایی، مبتنی بر پپتید می باشد. این نتایج روشی اختصاصی جهت تشخیص آنتی بادی را ارائه می دهد که ارزش تشخیصی برای صنایع مرغداری دارد.
    کلید واژگان: آنفلوانزای مرغی, الایزا, NS1, پپتید, آلوده, واکسینه
    F. Golchinfar, R. Madani, T. Emami, S.A. Pourbakhsh, A.H. Shoushtary
    Avian influenza (AI) is a highly contagious disease in poultry and outbreaks can have dramatic economic and health implications. For effective disease surveillance، rapid and sensitive assays are needed to detect antibodies against AI virus (AIV) proteins. In order to support eradication efforts of avian influenza (AI) infections in poultry، the implementation of “DIVA” vaccination strategies، enabling the Differentiation of infected from Vaccinated Animals have been recommended by international organizations. A system، based on the detection of antibodies to the Non-Structural (NS1) protein of AI has been proposed to enable the detection of field exposure in vaccinated flocks، and through this detection، infected flocks may be properly managed. In this project we have used two conserved peptides of NS1 protein to develop a peptide based ELISA method. This ELISA could screen the infected and vaccinated sera due to their titer of antibody. Following experimentally infection and vaccinate of chickens، antibodies to the peptides of the NS1 protein were detected by enzyme-linked immuno sorbent assay (ELISA). These findings indicate that there is a significant difference in the viral replication in chickens، resulting in a variation in the production of antibodies to NS1، as detected by the peptide- based ELISA used. These results demonstrate the specific ELISA for anti NS1 antibodies that have diagnostic value for the poultry industries.
    Keywords: Avian influenza, ELISA, NS1, Peptide, infected, vaccinated
  • Rostamalit.*, Shoshtari, A.H., Charkhkars., Bozorgmehrifard, M.H
    Newcastle disease is one of the most important diseases in poultry with huge economical damages. It is possible to detect virulence of virus base on molecular techniques and sequence of F gene. In this study, Sequence of 1674 nucleotide acid in cleavage site of F gene of Newcastle disease virus¡ was analyzed for 10 isolates in industrial poultry. These isolates were obtained from endemic of very virulent Newcastle disease in Iran during 2009 and 2010 which have caused high mortality in broiler, breeder and layers along with high egg production drop in breeders and layers. Amino acid sequences were compared phylogenetically with those of previously reported in Iran and also with the gene bank. These isolates show phylogenitically distinction from previous isolates reported in Iran. These isolates show similarity with Chinese and Israeli isolates in gene bank.
    Keywords: Fusion Gene, Newcastle Disease Virus, Phylogenetic Analysis
  • Baharip.*, Pourbakhsha., Shoushtarih., Bahmaninejad, M
    Genetic variations in the hemagglutinin gene of influenza viruses are an important characteristic. These variations may cause limitation of RT-PCR assay for detection of influenza subtypes. In this study, a total of 6 samples, suspected to type A influenza virus, were isolated from industrial birds’ trachea in North Khorasan Province and RT-PCR analysis were performed. Results showed that all of the 6 suspected samples were detected positive as type A influenza viruses. These isolates were then determined their subtypes using RT-PCR H9N2 specific primers. The result showed that 4 out of 6 isolates were positive as H9N2 and other two isolates did not have any bond on gel electrophoresis and considered negative. For further evaluation, all of the hemagglutinin genes of viruses were sequenced and confirmed as H9N2 viruses using BLAST software in Gene Bank. It was also found, that primers binding sites with hemagglutinin genes in two last viruses were mismatched in three nucleotide acids with 3' end of forward and reverse primers. These factors may reduce the sensitivity of RT-PCR tests and cause false negative results. Therefore, it would recommend updating RT-PCR primers and protocols in a timely manner.
    Keywords: Influenza Virus, H9N2, Hemagglutinin Gene, Primer, RT, PCR
  • پژمان بهاری، سیدعلی پوربخش، عبدالحمید شوشتری، محمد علی بهمنی نژاد
    بیماری آنفلوانزای پرندگان یکی از بیماری های ویروسی مهم در مرغداری های صنعتی کشور می باشد و هر سال خسارات عمده ای به صنعت پرورش طیور کشور وارد می کند.تشخیص سریع ویروس آنفلوانزا و تعیین حدت آنها یکی از اولویت های مهم پیشگیری و مبارزه علیه این بیماری در کشور محسوب می شود. از آزمایش RT-PCR جهت تشخیص ویروس های آنفلوانزا و نیز بررسی تواالی محل شکافتگی پروتئین هماگلوتینین (HA) به عنوان یک شاخص مولکولی به منظور پیش بینی حدت سویه های آنفلوانزا مورد استفاده قرار گرفت. در این تحقیق جهت پایش بیماری آنفلوانزا 160 نمونه سوآپ نای از 20 واحد پرورش مرغ گوشتی در استان خراسان شمالی که مشکوک به بیماری آنفلوانزا بودند اخذگردید. آزمایش مولکولی RT-PCR براساس ژنوتیپ های شایع در ایران پایه ریزی گردید که در آن برای تعیین تیپ گروه A آنفلوانزا از پرایمراختصاصی ژن ماتریکس (M)وجهت تعیین تحت تیپ های H9، H5، H7 از پرایمرهای اختصاصی ژن هماگلوتنین(HA) استفاده شد. جهت تعیین توالی، نمونه های مثبت شده از نظر تیپ Aبه تخم مرغ جنین دار (SPF) 9-11 روزه تزریق شد، پس از سه تاپنج روز مایع آلانتوئیک با استفاده از فرمالین 1درصد خنثی و جهت بررسی تست هماگلوتیناسیون و استخراج RNAی ویروسی استفاده گردید. سپس قطعه ای به طول 437bp دربرگیرنده محل شکافتگی ژن هماگلوتینین تکثیر و جهت تعیین توالی نوکلئوتیدی به شرکت MWGآلمان ارسال شد و درنهایت به توالی اسیدآمینه ای ترجمه گردید. نتایج نشان دادکه با استفاده ازروش RT-PCR نمونه های اخذشده از 4 مرغداری صنعتی از نظر ویروس تیپ A آنفلوانزا مثبت بودند. تمام ویروس های تیپ Aاز نظر تحت تیپ H5، H7، منفی و از لحاظ H9 مثبت تشخیص داده شدند. بررسی محل شکافتگی پروتئین هماگلوتینین نشان دادکه هر4 سویه دارای توالی KSSR بودند، اگرچه این توالی نشان دهنده غیرحاد بودن سویه ها می باشد ولی با الگوی جدایه های قبلی ایران که عمدتا RSSR می باشد تفاوت داشت. به طورکلی آزمایش RT-PCR با استفاده ازپرایمرهای اختصاصی تحت تیپ های رایج درمنطقه، تشخیص تفریقی سریع ویروس های آنفلوانزا را امکان پذیرمی سازد. تغییر در محل شکافت پروتئین هماگلوتینین درویروس های H9N2 را می توان به عنوان یک خطر بالقوه جهت تبدیل این ویروس ها به سویه های حاد در نظرگرفت. لذا پایش مستمر توالی ژنتیکی این ویروس ها توصیه می گردد.
    کلید واژگان: آنفلوانزای پرندگان, RT, PCR, تحت تیپ H9, H5, H7, محل شکافتگی پروتئین هماگلوتینین, خراسان شمالی
    Bahari P., Pourbakhsh A., Shoushtari H., Bahmaninejad M.A.
    Avian influenza virus has been recognized as one of the most important pathogen in poultry that caused economic losses to the poultry industry of Iran. Rapid detection and pathotyping is the important priority in order to prevent extension of disease in Iran. RT-PCR method was used for the rapid detection of influenza viruses. The amino acid sequence of cleavage site of hemagglutinin was considered as a molecular determinant for the prediction of pathogenicity influenza viruses. In this study، 160 tracheal swabs samples were taken from 20 poultry farm to monitor influenza infection in North Khorasan province. RT-PCR assay was developed based on the most common genotype in Iran detecting type A and H9، H5 and H7 subtypes by specific primers targeting Matrix (M) and Hemagglutinin (HA) genes، respectively. The samples which were positive as type A influenza inoculated to embryonated eggs of 9-10 days. After 3-5 days، the allantoic fluids were tested with Hemagglutinin assay. The samples that contained HA activity were inactivated with formalin 0. 1%. These fluids were used for RNA extraction. A segment of 432bp was amplified by RT-PCR and nucleotide sequencing. The results showed that four poultry farms were positive for type A of influenza virus. All of them were negative for H5 or H7 but positive for H9 virus. The sequence analysis of hemagglutinin revealed that four isolates shared a KSSR motif at the cleavage site of HA. Although this motif represented low pathogenicity in poultry، it was different from previous Iranian isolates. As a result RT-PCR assay based on common genotype in region was considered as a rapid test for the detection of influenza viruses. The cleavage site sequence analyses indicated that these viruses have the potential for emerging highly pathogen influenza viruses. Therefore، continuous monitoring of viruses is being recommended.
    Keywords: Avian influenza, RT, PCR, H9, H7, H5 subtype, Cleavage site of hemagglutinin, North Khorasan
  • ابراهیم کرد، عبدالحمید شوشتری، هادی فامیل قدکچی، رضا محمدی، ابوالقاسم هادی نیا
    زمینه و هدف
    دربین زیرتیپ های مختلف آنفلوانزای پرندگان، ویروس های باقدرت بیماری زایی بالا زیرتیپ H5N1 از اهمیت بالایی برخوردار است. هدف این مطالعه آنالیز فیلوژنتیک ژن نورآمینیداز ویروس آنفلوانزای پرندگان زیرتیپ H5N1شناسایی شده در ایران در سال 1390 بود.
    روش بررسی
    دراین مطالعه تجربی تعداد دو سوآپ گرفته شده از جوجه های دارای علایم مشکوک، از نظر آنفلوانزای پرندگان با تکنیک های توصیه شده سازمان بهداشت جهانی بررسی شدند. سپس ژن نورآمینیداز نمونه مثبت باتکنیک RT-PCR تکثیر شد و پس از توالی یابی با استفاده از نرم افزارهای Megalign و MEGA5 مورد بررسی فیلوژنتیک قرارگرفت.
    یافته ها
    آنالیزهای فیلوژنتیک نشان دادند که این ویروس متعلق به Clade 2.3.2.1 است وبیشترین شباهت را به ویروس های شناسایی شده در مغولستان درسال 2010 دارد. هم چنین، در ساقه ی پروتئین نورآمینیداز این ویروس 20 اسیدآمینه درموقعیت 6949 حذف شده است.
    نتیجه گیری
    با توجه به یافته های این مطالعه، به نظر می رسد که این ویروس ها به وسیله پرندگان وحشی مهاجر و از منشاء ویروس های مغولستان وارد ایران شده اند.
    کلید واژگان: آنفلوانزا, پرندگان, نورآمینیداز
    Background and Aim
    Among the various subtypes of avian influenza viruses، an H5N1 subtype virus with high pathogenicity is of great importance. The aim of this study was to determine the Phylogenetic analysis of neuraminidase gene of avian influenza virus subtype of the H5N1 in Iran in 1390.
    Methods
    In this experimental study، two swab samples from chickens with suspected symptoms of avian influenza were tested by the World Health Organization recommendation. The neuraminidase gene of positive samples was amplified by RT-PCR technique. After sequencing the phylogenetic studies were analyzed using MEGA5 and Megalign.
    Results
    Phylogenetic analysis showed that the virus belongs to the Clade 2. 3. 2. 1 which is highly similar to the viruses that are identified in Mongolia in 2010. Also in the stem of this virus neuraminidase protein a number of 20 amino acid has been deleted at position 69-49.
    Conclusion
    Due to findings of this study، it seems that the virus has entered by migratory wild birds with the origin of Mongolia.
    Keywords: Influenza, Avian, Neuraminidase
  • Homayounfarn.*, Shoushtaria., Charkhkars., Bozorgmehrifard, M.H
    Avian metapneumovirus causes upper respiratory tract infections in chickens and turkeys. Avian metapneumovirus plays an important role in respiratory diseases, it may be involved in multifactorial disease. The aim of this study was the detection and sequencing of the G gene of avian metapneumovirus from chicken flocks in East and West Azarbaijan province. Clinical samples from 50 commercial chicken flocks with respiratory signs such as swollen infraorbital sinuses, nasal discharges, coughing, tracheal rales, and foamy conjunctivitis were collected. Samples included the choenal cleft, trachea and turbinates swabs and brought to the Razi Vaccine and Serum Research Institute for RT-PCR. The G genes of Positive samples were sequenced. Of the 50 chicken flocks, 8 flocks were positive by RT-PCR (16%). Partial sequence analysis of the G gene confirmed that the positive samples belonged to subtype B. Phylogenetic tree demonstrated that These Iranian strains formed one group apart from subtype B vaccine strain used in Iran.
    Keywords: Multifactorial, Phylogenetic Tree, Sequence
نمایش عناوین بیشتر...
بدانید!
  • در این صفحه نام مورد نظر در اسامی نویسندگان مقالات جستجو می‌شود. ممکن است نتایج شامل مطالب نویسندگان هم نام و حتی در رشته‌های مختلف باشد.
  • همه مقالات ترجمه فارسی یا انگلیسی ندارند پس ممکن است مقالاتی باشند که نام نویسنده مورد نظر شما به صورت معادل فارسی یا انگلیسی آن درج شده باشد. در صفحه جستجوی پیشرفته می‌توانید همزمان نام فارسی و انگلیسی نویسنده را درج نمایید.
  • در صورتی که می‌خواهید جستجو را با شرایط متفاوت تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مطالب نشریات مراجعه کنید.
درخواست پشتیبانی - گزارش اشکال