مونا قاضی
-
سابقه و هدف
پیدایش مقاومت های دارویی و ظهور سویههای مایکوباکتریوم توبرکلوزیس مقاوم به درمان، کنترل این بیماری را با چالش مواجه ساخته است. بنا به آمار سازمان بهداشت جهانی (WHO)، سالانه در سراسر جهان حدود 000,500 مورد ابتلای جدید سل مقاوم به دارو گزارش میشود. با توجه به اینکه مکانیسمهای مرتبط با بروز مقاومت های دارویی به درستی شناخته نشده است و تحقیق های مختلف نشاندهنده نتایج متفاوتی است، بر آن شدیم تا به بررسی جهشهای ژن thyA در ارتباط با مقاومت به داروی پارا- آمینوسالیسیلیک اسید (PAS) بپردازیم.
روش کاردر این مطالعه توصیفی- مقطعی، در مدت سه سال تعداد 255 نمونه مثبت مایکوباکتریوم توبرکلوزیس با استفاده از روش استاندارد کشت و اسمیر جداسازی شد، سپس با انجام آزمون حساسیتسنجی دارویی 68 نمونه سل مقاوم به دارو انتخاب شد. برای بررسی جهش های ژن thyA، از روش PCR استاندارد استفاده شد و قطعه های حاصله توالییابی شدند. جهشهای منجر به تغییر کدون، با به کارگیری نرمافزارهای پیشبینی تغییرهای پروتئین آنالیز شدند. ارتباط جهشهای یافت شده با مقاومت به داروی PAS از لحاظ آماری توسط آزمون مربع کای مطالعه شد.
یافته هااز 255 نمونه مورد بررسی، 68 سویه (26/7درصد، فاصله اطمینان 21/3درصد) مقاوم به دارو تعیین شد. مجموعا 13 نمونه (19/1درصد) سویه مقاوم به PAS یافت شد که 5 سویه (38/4درصد) دارای جهش های نوکلئوتیدی مختلف در ژن thyA بودند. از لحاظ آماری ارتباط جهشهای مذکور با مقاومت آنتیبیوتیکی معنادار بود. به علاوه، نتایج آنالیز بیوانفورماتیک نشان داد که جهشهای یافتشده منجر به اختلال در عملکرد و ناپایداری در ساختار پروتئین حاصله میشوند.
نتیجه گیریطبق نتایج به دست آمده به نظر میرسد که جهش در ژن thyA با مقاومت به داروی PAS مرتبط است. همچنین یافتهها ارزش تشخیصی آنالیز قطعه های کوچک ژنومی و ابزارهای نوین بیوانفورماتیک را در شناسایی مکانیسمهای مقاومت دارویی نشان میدهد.
کلید واژگان: مایکوباکتریوم توبرکلوزیس, مقاومت دارویی, جهش ژنتیکی, آنالیز بیوانفورماتیکBackground and AimThe emergence of drug resistance and treatment- renitent Mycobacterium tuberculosis has made controlling the disease a challenge. World Health Organization (WHO) estimates that approximately 500,000 new cases of tuberculosis occur annually. Considering that mechanisms involved in drug resistance are yet to be elucidated and results of the studies are not consistent, we decided to investigate the correlation between mutations in thyA gene and resistance to para- aminosalicylic acid (PAS).
MethodsIn this descriptive cross- sectional study, a total of 255 positive MTB specimens were isolated during a three- year period using standard microscopic and culture methods from which 68 Multidrug resistant (MDR) and extensively drug resistant (XDR) tuberculosis samples were selected through drug susceptibility testing. Then, to determine potential mutations in thyA gene, the fragment was amplified using conventional PCR and products were sequenced. Afterward, mutations which have been induced amino acid substitutions were evaluated with various protein prediction tools. Also, the correlation between mutations and drug resistance was statistically determined using chi-square test.
ResultsFrom 255 clinical TB samples, 68 (26.7%, CI 21.3%) MDR / or XDR-TB strains were isolated. In total, 13 (19.1%) were PAS- resistant and 5 (38.4%) of them had different nucleotide mutations in thyA gene. All of the mutations were statistically correlated with drug resistance. Moreover, the results of bioinformatics showed that identified mutations could lead to the structural and functional disruption of the protein.
ConclusionAccording to our results, mutations in thyA gene have appeared to be associated with resistance to PAS. Also, our findings have shed light on the potential of the analysis of short genomic regions and new computational tools in unraveling the molecular mechanisms of drug resistance.
Keywords: Mycobacterium tuberculosis, Drug resistance, thyA, Mutation, Bioinformatics -
مقدمه و هدف
استنوتروفوموناس مالتوفیلیا یک باکتری گرم منفی غیرتخمیری است که به سرعت به عنوان یک پاتوژن مهم بیمارستانی در بیماران بستری در بیمارستان ظاهر شده است و به دلیل افزایش مقاومت آنتی بیوتیکی ذاتی، به عنوان یک تهدید جهانی مطرح است. به همین منظور این مطالعه با هدف تعیین الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی نمونه های استنوتروفوموناس مالتوفیلیا جداشده از کشت خون بیماران مراجعه کننده به بیمارستان های قزوین انجام شد.
مواد و روش هادر این پژوهش 28 نمونه خون با تشخیص اولیه استنوتروفوموناس مالتوفیلیا جمع آوری شد. ابتدا شناسایی باکتری از طریق کشت و تست های بیوشیمیایی رایج انجام شد. با بررسی ژن S rRNA 23 و استفاده از روش مولکولی PCR، نمونه ها به تایید قطعی رسید. درنهایت آنتی بیوگرام به روش دیسک دیفیوژن طبق دستورالعمل 2022 CLSI انجام شد.
نتایج71/60 درصد از افراد دارای کشت خون مثبت، مرد بودند. نتایج آزمایش مقاومت آنتی بیوتیکی نشان داد سویه های جداشده به آنتی بیوتیک های لووفلوکساسین، مینوسایکلین و تری متوپریم سولفامتوکسازول به ترتیب دارای مقاومت 71/10، 14/7 و 57/3 درصد بودند.
نتیجه گیریبا توجه به اثربخشی مناسب آنتی بیوتیک تری متوپریم سولفامتوکسازول می توان نتیجه گرفت کماکان سویه ها به این دارو حساسیت خوبی دارند و همچنان به عنوان بهترین گزینه درمانی مطرح است. لازم است پیش از تجویز دارو میزان مقاومت آنتی بیوتیکی با استفاده از روش های استاندارد ارزیابی شده تا از بروز و گسترش سویه های مقاوم در جامعه و احتمال شکست در درمان جلوگیری شود.
کلید واژگان: استنوتروفوموناس مالتوفیلیا, مقاومت آنتی بیوتیکی, دیسک دیفیوژنBackground and ObjectiveStenotrophomonas maltophilia (S. maltophilia) is a non-fermenting gram-negative bacterium that has rapidly emerged as an important hospital pathogen in hospitalized patients and is considered a global threat due to the increase of intrinsic antibiotic resistance. The present study was conducted to determine the antibiotic resistance profile of S. maltophilia isolates collected from blood cultures of patients referred to Qazvin hospitals.
Materials and MethodsIn this study, 28 blood samples with the early diagnosis of S. maltophilia were collected. First, the identification of bacteria was performed by using culture and common biochemical tests. The final confirmation of the samples was done by examining 23S rRNA gene using the molecular PCR method. Finally, antibiogram was performed using disc diffusion method according to CLSI 2022 guidelines.
Results60.71% of patients with positive blood culture were male. The resistance rates to levofloxacin, minocycline and trimethoprim-sulfamethoxazole were 10.71%, 7.14% and 3.57%, respectively.
ConclusionConsidering the appropriate effectiveness of the trimethoprim-sulfamethoxazole, it can be concluded that the isolates are still sensitive to this antibiotic and it is still considered as the best therapeutic option. It is necessary to evaluate the levels of antibiotic resistance using standard methods before prescribing the antibiotics in order to prevent the emergence and spread of resistant strains in the community and the possibility of treatment failure.
Keywords: Stenotrophomonas maltophilia, Antibiotic resistance, Disc diffusion -
سابقه و هدفانتشار بیوآئروسل ها در طول فرآیندهای تصفیه فاضلاب به هوا یک مشکل عمده بهداشتی می باشد. در این مطالعه اثر نوع سیستم هوادهی سطحی و عمقی بر تراکم و نوع باکتری ها و قارچ های هوابرد در دو تصفیه خانه فاضلاب مورد بررسی قرار گرفته است.مواد و روش هااین مطالعه توصیفی-مقطعی درتصفیه خانه های فاضلاب شهری در شهر تهران که به ترتیب دارای سیستم هوادهی سطحی و عمقی می باشند انجام شد. نمونه برداری برای تعیین تراکم و تشخیص بیوآئروسل ها با تناوب شش روز یک بار و در دو فصل تابستان و پاییز در سال 1396 انجام شد. علاوه برهوای اطراف واحد های هوادهی، هم چنین از واحدهای دانه گیر، ته نشینی ثانویه و دو نقطه کنترل نمونه ها برداشت شدند. تراکم باکتری ها و قارچ ها از طریق کشت و تشخیص گونه و جنس از طریق آزمون های استاندارد انجام گرفت.یافته هانتایج نشان داد در تصفیه خانه با هوادهی سطحی بیش ترین انتشار بیو آئروسل ها در هر دو فصل از واحد های هوادهی صورت می گیرد. در این تصفیه خانه میانگین تراکم باکتری ها از این واحد به ترتیب در فصل تابستان و پائیز 6845 و 15784 CFU/m2/h و بیش ترین انتشار قارچ ها در فصل تابستان و پاییز به ترتیب 535CFU/m2/h و899 CFU/m2/h اندازه گیری شد. انواعی از باکتری های گرم منفی، گرم مثبت و قارچ ها در هر دو تصفیه خانه شناسائی شدند.استنتاجبر اساس نتایج این مطالعه، خطرات ناشی از میزان انتشار بیوآئروسل ها در تصفیه خانه با سیستم هوادهی سطحی یا مکانیکی در مقایسه با هوادهی عمقی بیش تر است.کلید واژگان: بیوآئروسل, هوادهی سطحی, هوادهی عمقی, تصفیه خانه فاضلابBackground and purposeEmission of bioaerosols from wastewater treatment plants is a potential hazard to human health. In this study aimed at investigating the effects of surface and deep aeration techniques on density and type of airborne bacteria and fungi in two municipal wastewater treatment plants.Materials and methodsThis descriptive cross-sectional study was done in two wastewater treatment plants in Tehran equipped with surface and deep aerations. Microbial samples were taken from air beside aeration tank, grit chamber, secondary sedimentation basin and two control points (upwind and downwind) every 6 days during summer and autumn 2017. Samples were analyzed for density of bioaerosols and types of bacteria and fungus applying standard methods.ResultsWastewater treatment plant with surface aeration tank had the greatest effect on emission of bioaerosols than the plant with deep aeration. Mean values for density of bacterial bioaerosols and fungal emission were 6845 and 15784 CFU/m2/h in summer and 535 and 899 CFU/m2/h in autumn, respectively. Different gram-positive and gram-negative bacteria were identified in both wastewater treatment plants investigated.ConclusionAccording to current study, emission of bioaerosol in wastewater treatment plants with surface aeration is more than that of those with deep aeration and has greater potential hazard.Keywords: bioaerosol, mechanical aeration, surface aeration, wastewater treatment plant
-
چکیده
سابقه و هدفمطالعات کمی در مورد فاکتورهای ویرولانس باکتری در شرایط و بیماری های مزمنی مثل سیستیک فیبروزیس انجام شده است. بنابراین خلط بیماران مبتلا سیستیک فیبروزیس که از مهر ماه 1390 تا مهرماه 1391 به بیمارستان مفید مراجعه کرده بودند در رابطه با تعیین ژن های مرتبط با سیستم ترشحی نوع 3(exoT، exoS، exoU) مورد بررسی قرار گرفتند.
روش بررسیدر این تحقیق توصیفی، بر روی سودوموناس آئروژینوزا 51 بیمار تست حساسیت آنتی بیوتیکی با روش دیسک دیفیوژن انجام شد. همچنین برای تعیین توزیع ژن های کد کننده توکسین ExoS، ExoU و ExoT در نمونه ها از تکنیک PCR استفاده شد
یافته هااز 51 نمونه سودوموناس آئروژینوزا، 7/66% مقاوم به تری متوپریم، 2/37% مقاوم به جنتامایسین، 5/21% مقاوم به امیکاسین و سفپیم، 6/19% مقاوم به توبرامایسین، 7/15% مقاوم به سیپروفلوکساسین، 7/13% مقاوم به ایمیپنم و 8/9% مقاوم به سفتازیدیم بودند. نتایج PCR نشان داد که 2/90 درصد حاوی ژن exoT، 4/78 درصد حاوی ژن exoS و5/25 درصد حاوی ژن exoU بودند.
نتیجه گیریدر این مطالعه، مقاومت هم زمان بر علیه آنتی بیوتیک های گروه آمینوگلیکوزیدها (جنتامایسین)، فلوئوروکوئینولون ها (سیپروفلوکساسین) و سفالوسپورین های وسیع الطیف (سفپیم یا سفتازیدیم) در 7/13% نشانه شروع ظهور مقاومت به چند دارو در این نمونه ها می باشد. با توجه به نتایج این مطالعه، احتمالا نمونه های حاوی ژن exoS در مقایسه با نمونه های حاوی ژن exoU برای بقا در مجاری تنفسی بیماران مبتلا به سیستیک فیبروزیس مناسب تر هستند.
کلید واژگان: سودوموناس ائروژینوزا, سیستیک فیبروزیس, فاکتورهای ویرولانس, سیستم ترشحی نوع 3Abstract
BackgroundPseudomonas aeruginosalung infection is a major cause of morbidity and mortality in patients with cystic fibrosis (CF). The type III secretion system is an important and identified virulence determinant of P. aeruginosa that delivers effector proteins into targeted host cells. Three effector proteins have been described in P. aeruginosa: exoS, exoT, exoU. Unlike many studies that have been done on bacterial virulence factors in acute conditions, fewer studies have been done on virulence factors of bacteria in chronic disease and conditions such as cystic fibrosis.
Materials And Methodsthis study investigated 51 sputum samples containing P. aeruginosa from child patients with cystic fibrosis for their possession of genes associated with the type III secretion system (exoU, exoS, exoT). PCR assays using specific primers were used to determine the distribution of the type III secretion toxin-encoding genes exoU, exoT and exoS for the test strains.
ResultsIn this study from 51 samples, 34 of samples (6.66%) were resistant to trimethoprim, 19 of samples (2.37%) were resistant to gentamicin, and 11 samples (5.21%) were resistant to amikacin and cefepime, 10 samples (6.19%) were resistant to tobramycin, 8 cases (6.15%) were resistant to ciprofloxacin, 7 samples (7.13%) were resistant to imipenem, 5 (8/9%) were resistant to ceftazidime and 3 cases (8.5%) were resistant to meropenem. In the current study, from the total of 51 sputum samples, 46 samples (90%) possessed the exoT gene, 40 samples (75%) possessed the exoS genewhereas 13 samples (25%) possessed the exoU gene.
ConclusionIn this study, the resistance against antibiotics of aminoglycosides (gentamicin), fluoroquinolone (ciprofloxacin) and broad-spectrum cephalosporins (cefepime or Ceftazidime) was observed in 13/7% of the samples showing the emergence of multi-drug resistance in these samples. Our results demonstrated that most of our isolates harbored type III secretion toxin-encoding genes, but isolates containing the ExoS-encoding gene are significantly more common among CF patient isolates indicating that ExoS-secreting strains are selected for survival in CF patient airways.
Keywords: Pseudomonas aeruginosa, Type III Secretion System, Cystic fibrosis, virulence factor -
هدفتهیه و تخلیص آنتی (A60)60 از سیتوپلاسم BCGمواد و روش هادر این تحقیق از روش کروماتوگرافی حذفی توسط ستون سفارز 4B برای تخلیص A60 از سیتوپلاسم BCG استفاده گردید. برای تایید تخلیص آنتی ژن، تکنیک ایمونوالکتروفوز با استفاده از آنتی بادی های Anti BCG و Anti A60 به کار گرفته شد. آنتی ژن 60 تخلیص شده با روش های الکتروفوز در ژل آگارز 0.5 درصد و دبل دیفوژن نیز مورد بررسی قرار گرفت. برای بررسی وجود آنتی ژن از هر دو قسمت سیتوپلاسم و دیواره سلولی باکتری آزمایش دات بلات با استفاده از آنتی بادی Anti A60 انجام شد. برای مطالعه ساختاری این آنتی ژن اجزای آنتی ژن در SDS-PAGE تفکیک شدند و به کاغذ نیتروسلولز منتقل شده و آزمایش وسترن بلات با استفاده آنتی بادی Anti A60 انجام شد.یافته هاآنتی ژن تخلیص شده در ایمونوالکتروفوز متقاطع با استفاده از Anti BCG و Anti A60 به صورت کم حرکت ترین جز سیتوپلاسم نمودار گردید. آنتی ژن مذکور در الکتروفوز با ژل آگارز به صورت تک باند مشاهده گردید و در ایمونودیفیوژن در مواجه با Anti BCG دو خط رسوبی تشکیل داد. در بررسی با روش دات بلاتینگ هم سیتوپلاسم و هم دیواره سلولی باکتری با آنتی بادی Anti A60 واکنش مثبت نشان دادند. وقتی اجزایA60 با روش SDS-PAGE تفکیک شدند و وسترن بلاتینگ با استفاده از آنتی بادی Anti A60 انجام شد، اجزای پروتئینی با اوزان، 35، 38، 40، 46 و 65 کیلو دالتون شناسایی گردید.نتیجه گیرینتایج به دست آمده مبین این است که A60 یک ماکرومولکول با وزن مولکولی 10000-1000 کیلو دالتون در مایکوباکتریوم بویس سویه BCG و دارای اجزای متعدد پروتئینی است. A60 هم در سیتوپلاسم و هم در دیواره سلولی BCG موجود است و می توان آن را با استفاده از کروماتوگرافی حذفی، از سیتوپلاسم واکسن BCG که خوشبختانه در کشور ما نیز تولید می گردد، به راحتی تخلیص نمود.
کلید واژگان: آنتی ژن (A60), گروماتوگرافی, BCG, خالص سازی, مایکوباکتربوم بوویس
- در این صفحه نام مورد نظر در اسامی نویسندگان مقالات جستجو میشود. ممکن است نتایج شامل مطالب نویسندگان هم نام و حتی در رشتههای مختلف باشد.
- همه مقالات ترجمه فارسی یا انگلیسی ندارند پس ممکن است مقالاتی باشند که نام نویسنده مورد نظر شما به صورت معادل فارسی یا انگلیسی آن درج شده باشد. در صفحه جستجوی پیشرفته میتوانید همزمان نام فارسی و انگلیسی نویسنده را درج نمایید.
- در صورتی که میخواهید جستجو را با شرایط متفاوت تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مطالب نشریات مراجعه کنید.