جستجوی مقالات مرتبط با کلیدواژه "سودوموناس آئروجینوزا" در نشریات گروه "پزشکی"
-
مجله دانشگاه علوم پزشکی اراک، سال بیست و پنجم شماره 3 (پیاپی 157، امرداد و شهریور 1401)، صص 382 -393زمینه و هدف
پمپ افلاکس در سودوموناس آیروجینوزا باعث مقاومت آنتی بیوتیک های خانواده کینولون ها با اخراج آن از سلول سودوموناس می شود؛ بنابراین مهار این پمپ با کمک ترکیبات شیمیایی غیر فعال کننده فعالیت پمپ می تواند باعث مقابله با مقاومت دارویی باکتری شود. هدف از این پژوهش، ارزیابی استفاده از سرترالین به عنوان مهارکننده پمپ افلاکس در سودوموناس آیروجینوزا برای کاهش مقاومت دارویی است.
مواد و روش هاسویه های سودوموناس آیروجینوزای ارزیابی شده در این پژوهش از نمونه های بالینی بیماران جداسازی و پس از شناسایی آن ها با روش های میکروب شناسی، مقاومت آن ها نسبت به سیپروفلوکساسین با روش کربی بایر ارزیابی شد. حداقل غلظت ممانعت کننده سیپروفلوکساسین با روش سریال رقتی محیط مایع در میکروپلیت و حداقل غلظت کشنده دارو با کشت و نیز روش MTT برای سویه های مقاوم به داروی سودوموناس آیروجینوزا و سوش استاندارد سودوموناس آیروجینوزای 25873 تعیین شد. بررسی شکست مقاومت با اضافه کردن سرترالین به محیط مولر هینتون آگار و تعیین قطر هاله سیپروفلوکساسین انجام شد. حضور پمپ افلاکس به روش فنوتیپی با استفاده از ماده دارویی سرترالین و روش سریال رقتی محیط مایع در میکروپلیت، روی سویه های مقاوم به سیپروفلوکساسین ارزیابی شد. وجود ژن مولد این پمپ به روش ژنوتایپی در سویه های مقاوم با انجام PCR تعیین شد. از سویه استاندارد PAO1 سودوموناس آیروجینوزا به عنوان کنترل مثبت استفاده شد.
ملاحظات اخلاقیاین پژوهش با کد اخلاق IR.IAU.B.REC.1401.011 به تصویب کمیته اخلاق دانشکده علوم پزشکی دانشگاه آزاد اسلامی واحد بروجرد رسید.
یافته هابر اساس نتایج کربی بایر، 3 سویه مقاوم به سیپروفلوکساسین در نظر گرفته شد. حداقل غلظت ممانعت کننده سویه های مقاوم به دارو بین 32 تا 64 میلی گرم بر میلی لیتر و حداقل غلظت کشنده دارو بین 16 تا 32 میلی گرم بر میلی لیتر بود. با انجام الکتروفورز روی محصولات PCR مشخص شد سویه های مورد آزمایش، حاوی ژن mexA کد کننده پمپ افلاکس هستند. در محیط آگار دار بدون سرترالین، قطر هاله اطراف دیسک سیپروفلوکساسین صفر بود، اما پس از افزودن سرترالین، قطر هاله به 25 میلی متر افزایش یافت. همچنین حداقل غلظت ممانعت کننده از رشد سیپروفلوکساسین در سویه ها قبل از اضافه کردن 2 درصد سرترالین، 128 میکروگرم بر میلی لیتر بود که پس از اضافه کردن سرترالین به 4 میکرو گرم بر میلی لیتر تبدیل شد.
نتیجه گیریسرترالین باعث کاهش حداقل غلظت ممانعت کننده دارو از طریق کاهش کارایی پمپ افلاکس در باکتری سودوموناس آیروجینوزا می شود و مقاومت باکتری را نسبت به آنتی بیوتیک سیپروفلوکساسین کاهش می دهد.
کلید واژگان: سودوموناس آئروجینوزا, سیپروفلوکساسین, پمپ افلاکس, سرترالینBackground and AimThe efflux pump in Pseudomonas aeruginosa inhibits the effect of ciprofloxacin by releasing quinolones out of the cell. It is important to find compounds to inactivate or inhibit its activity to continue using the antibiotics. The present study was done to investigate using sertraline as an efflux pump inhibitor in P. aeruginosa to reduce antibiotic resistance.
Methods & MaterialsP. aeruginosa strains were isolated from clinical sources and identified by routine microbiological methods. Resistance of the isolates to ciprofloxacin was evaluated by Kirby–Bauer test. Resistance breakdown was investigated by adding sertraline to the Moller Hinton agar medium and determining the zone of inhibition of ciprofloxacin. Minimum inhibitory concentration (MIC) by microplate dilution method and Minimum bactericidal concentration (MBC) by culture and MTT method were done for the isolates and ATCC 27853. The presence of the efflux pump was evaluated by the phenotypic method using sertraline and serial dilution method of the liquid medium in a microplate, on ciprofloxacin-resistant strains. The presence of the producing gene of this pump was determined by the genotyping method in resistant strains by performing PCR. The standard PAO1 strain of P. aeruginosa was used as a positive control.
Ethical ConsiderationsThis study was approved by the Ethics Committee of the Faculty of Medical Sciences of Islamic Azad University, Brojerd Branch (Code: IR.IAU.B.REC.1401.011).
ResultsBased on Kirby–Bauer test results, three strains were considered resistant to ciprofloxacin. MIC of drug-resistant strains was between 32 and 64 mg/ml and MBC was between 16 and 32 mg/ml. By performing electrophoresis on the PCR products, it was determined that the tested strains contained the mexA gene encoding the efflux pump. In the agar medium without sertraline, the zone of inhibition around the ciprofloxacin disc was zero, but after adding sertraline, the diameter of the halo increased to 25 mm. The minimum inhibitory concentration of ciprofloxacin in the isolates before adding 25 µg of sertraline was 128 µg/ml and after adding sertraline, it was 4 µg/ml.
ConclusionIt was concluded that sertraline inhibited the efficiency of the efflux pump in resistant P. aeruginosa isolates and reduced ciprofloxacin resistance.
Keywords: Pseudomonas aeruginosa, Ciprofloxacin, Efflux pump, Sertraline -
مقدمه
باکتری سودوموناس آیروجینوزا دارای مقاومت بسیار زیاد به اکثر داروهای ضد سودوموناسی می باشد که همین امر موجب ایجاد نگرانی در سراسر دنیا گردیده است. از این رو در این تحقیق به بررسی اثر باکتریوفاژ های لایتیک بر جدایه های سودوموناس آیروژینوزا با مقاومت چند دارویی پرداخته می شود.
مواد و روش هاسویه های مختلف باکتری سودوموناس آیروجینوزا از نمونه های مختلف بالینی در طی 5 ماه (اردیبهشت ماه 1400 تا مهر ماه 1400) از بیمارستان ها و آزمایشگاه های نقاط مختلف شهر تهران شناسایی و جداسازی گردید و مقاومت آنتی بیوتیکی به روش دیسک دیفیوژن انجام گردید. جدایه هایی با مقاومت همه دارویی انتخاب و با روش مولکولی مورد بررسی قرار گرفتند. سپس جداسازی باکتریوفاژها از فاضلاب بیمارستانی و شهری انجام شد و توسط ایجاد پلاک ، حضور باکتریوفاژها بررسی گردید. پس از غنی سازی و تغلیظ باکتریوفاژهای جداسازی شده و رنگ آمیزی نمونه ها، از میکروسکوپ الکترونی گذاره(TEM) برای بررسی مورفولوژیکی باکتریوفاژ ها استفاده گردید.
یافته هااز میان 70 سویه سودوموناس آیروجینوزا، 24 (34 درصد) سویه از باکتری ها دارای مقاومت چند دارویی به همه آنتی بیوتیک های تست شده بودند که پلاک های باکتریوفاژها بر علیه 22(91 درصد) عدد از آن ها دیده شد. در تصاویر گرفته شده توسط میکروسکوپ TEMباکتریوفاژ اصلی در مورد همه پلاک ها مورد شناسایی قرار گرفت که مشابه به خانواده های پودوویروس (Podoviridae) ،و پلاسموویروس (Plasmoviridae) بودند.
بحث و نتیجه گیریباکتریوفاژهای که جداسازی شدند اثر باکتری کشی بسیار خوبی بر روی ایزوله های با مقاومت چند دارویی باکتری سودوموناس آیروجینوزا داشته و می توانند کاندیداهای مناسبی برای استفاده در فاژدرمانی بر علیه این عفونت ها باشند.
کلید واژگان: باکتریوفاژ, فاژدرمانی, سودوموناس آئروجینوزا, مقاومت آنتی بیوتیکیIntroductionPseudomonas aeruginosa bacterium has a high resistance to most anti-Pseudomonas drugs, which has caused concern all over the world. Therefore, the effect of lytic bacteriophages on Pseudomonas aeruginosa isolates with multi-drug resistance is investigated in this research.
Methods and Materials:
Different strains of Pseudomonas aeruginosa bacterium were identified and isolated from different clinical samples during 5 months (May 2021 to October 2021) from hospitals and laboratories in different parts of Tehran. Moreover, antibiotic resistance was determined by disk diffusion method. Isolates with resistance to all drugs were selected and analyzed by molecular method. Then, the isolation of bacteriophages from hospital and city wastewater was performed and the presence of bacteriophages was investigated by plaque formation. After enriching and concentrating the isolated bacteriophages and staining the samples, transmission electron microscope (TEM) was used to examine the morphology of the bacteriophages.
ResultAmong 70 strains of Pseudomonas aeruginosa, 24 (34%) strains of bacteria had multidrug resistance to all tested antibiotics and bacteriophage plaques were seen against 22 (91%) of them. In the pictures taken by Transmission Electron Microscopy (TEM), the main bacteriophage was identified in all plaques, which were similar to Podoviridae and Plasmoviridae families.
Discussion and ConclusionThe bacteriophages that were isolated have a very good bactericidal effect on isolates with multi-drug resistance of Pseudomonas aeruginosa bacterium and they can be suitable candidates for using in phage therapy against these infections.
Keywords: Bacteriophage, Phage Therapy, Pseudomonas Aeruginosa, Antibiotic Resistance -
زمینه و اهداف
ضدعفونی کننده ها کاربردهای بالینی مهمی دارند. مقاومت آنتی بیوتیکی برخی پاتوژن های بیمارستانی نظیر سودوموناس آیروجینوزا منجر به استفاده از ضدعفونی کننده ها شده است. در پژوهش حاضر تاثیر چهار ضدعفونی کننده؛ اینتراهیدروکر، بنزالکونیوم کلراید، ستریمید-سی و وایکوسیانس بر روی تعدادی جدایه سودوموناس آیروجینوزا بررسی شد.
مواد و روش کاررقت های توصیه شده توسط هکارخانه سازنده از چهار ضدعفونی کنندهکننده مورد بررسی تهیه شده و تاثیر آنها علیه 12 جدایه سودوموناس آیروجینوزا در زمان های 5، 10، 15 دقیقه بعد از اضافه کردن باکتری بررسی شد.
یافته ها و بحثاینتراهیدروکر و بنزالکونیوم کلراید رشد تمام سوش ها را در هر سه زمان مورد بررسی مهار کردند درحالی که ستریمید- سی در هیچ زمانی موجب عدم رشد سوش های باکتری نشد. وایکوسیانس در زمان های 10 و 15 دقیقه به طور کامل رشد سوش های باکتری را مهار کرد. با توجه به اینکه در پژوهش حاضر رقت های توصیه شده توسط کارخانه سازنده تهیه شده و مورد ارزیابی قرار گرفتند، عدم کارایی کامل تعدادی از ضدعفونی کننده ها نشان داد که ارزیابی و رقت سنجی ضدعفونی کننده پیش از هاستفاده معمول در آزمایشگاه ها و یا مراکز بهداشتی ضروری است.
کلید واژگان: ضدعفونی کننده, اینتراهیدروکر, بنزالکونیوم کلراید, ستریمید-سی, وایکوسیانس, سودوموناس آئروجینوزاBackgroundDisinfectants have important clinical applications. Antibiotic resistance of some hospital pathogens such as Pseudomonas aeruginosa has led to the use of disinfectants. In the present study, the effects of four commercial disinfectants; Hydrocare, Benzalkonium Chloride, Cetrimide-C, and Vico sience on Pseudomonas aeruginosa isolates were investigated.
Materials & MethodsThe dilutions of four tested disinfectants recommended by the manufacturer were prepared and their effects on twelve Pseudomonas aeruginosa isolates were evaluated at five, ten, fifteen minutes after the bacterial inoculation.
Results & DiscussionHydrocare and Benzalkonium Chloride inhibited the growth of all strains while Cetrimide-C disinfectant did not inhibit the growth of bacterial strains at any time. The Vico sience completely inhibited the growth of bacterial strains at ten and fifteen minutes after the addition of disinfectant. Since the recommended dilutions by the manufacturer were prepared and evaluated in the present study, the inefficiency of some of the disinfectants indicated that the evaluation and dilution assay of the disinfectant is necessary prior to routine use in laboratories or health centers.
Keywords: Disinfectant, Hydrocare, Benzalkonium Chloride, Vico sience, Cetrimide- C, Pseudomonas aeruginosa -
زمینه و هدفسودوموناس آئروجینوزا یکی از مهمترین باکتری های بیماریزای ایجادکننده عفونتهای بیمارستانی بوده که دارای مقاومت نسبت به بسیاری از آنتی بیوتیک ها است. همچنین حضور ژن LasI و AlgD به قدرت بیماری زایی این باکتری کمک می کند. هدف از این مطالعه بررسی فراوانی ژن های یاد شده و مقاومت آنتی بیوتیکی و ارتباط معنی دار بین آن ها بوده است.مواد و روش هااین مطالعه مقطعی- توصیفی بر روی 91 ایزوله سودوموناس جداشده از مراکز درمانی شهرستان فسا انجام شد. پس از انجام تست های استاندارد بیوشیمیایی و میکروبیولوژی، تمامی سویه ها از لحاظ حضور ژن های LasI و AlgD به روش PCR ارزیابی شدند و تست حساسیت آنتی بیوتیکی به روش دیسک دیفیوژن و MIC انجام گرفت. آنالیز آماری توسط نرم افزار SPSS20 انجام شد.نتایجاز 91 جدایه، (34/%59) 54 نمونه سودوموناس آئروجینواز و (66/%40) 37 نمونه سایر گونه ها تشخیص داده شدند. نتایج تعیین الگوی مقاومت دارویی برای هر دو گروه نشان داد که بیشترین مقاومت نسبت به سفپیم به وجود آمده است. 40 ایزوله سودوموناس آئروجینوزا و 30 ایزوله سایر گونه ها، تست MIC نسبت به سفپیم را μg/ml ≥ 16 نشان دادند. تمام جدایه ها واحد ژن AlgD بوده اند.نتیجه گیرینتایج این مطالعه، مقاومت بالایی نسبت به آنتی بیوتیک های مختلف در بین سویه های سودوموناس آئروجینوزا و سایر سویه ها نشان داد. همراهی ژن های کروم، سنسینگ و ژن مولد آلژینات با ژن های مقاومت آنتی بیوتیکی می تواند وخامت درگیری با این گروه از باکتری ها را بیشتر نماید.کلید واژگان: سودوموناس آئروجینوزا, LasI, AlgDBackground & ObjectivePseudomonas aeruginosa is one of the most important pathogenic bacteria causing infectious diseases that include resistance to many antibiotics. In addition, existence of LasIand AlgD gene contributes to pathogenicity of this bacterium. This study is aimed to investigate the frequency of mentioned genes, antibiotic resistance and a significant relationship between them.Materials & MethodsThis descriptive cross-sectional study was performed on 91 isolated Pseudomonas from Fasa medical centers. After completing biochemical and microbiological tests, all strains were evaluated by the PCR method in terms of LasIand AlgD genes existence, and antibiotic susceptibility test was performed by disk diffusion and MIC methods. Statistical analysis was performed using SPSS 20 software.ResultsAmong 91 isolated samples, (59.34%) 54 samples of Pseudomonas aeruginosa and (40.66%) 37 samples of other species were detected. The results of drug resistance pattern determination for both groups showed that highest resistance to Cefepime has been established. 40 isolated Pseudomonas aeruginosa and 30 isolated samples of other species showed a MIC test relative to Cefepime. All isolated samples had AlgD gene.ConclusionThe results of this study revealed high resistance to different antibiotics among Pseudomonas aeruginosa strains and other strains. Quorum sensing genes and alginate generator genes with antibiotic resistance genes can increase the severity of involvement in this group of bacteria.Keywords: Pseudomonas aeruginosa, AlgD, LasI
-
مقدمه و هدفساکارومیسس سرویزیه یکی از انواع مخمرهای پروبیوتیک است که تاثیرات مثبت بر سلامت دارد. سودوموناس آئروجینوزا یکی از باکتری های بیماری زای فرصت طلب بسیار مهم است. اگزوتوکسین S از توکسین ها و آنزیم های ترشحی مهم آن است. هدف از این مطالعه تعیین اثر سوپرناتانت ساکارومیسس سرویزیه بر ممانعت از رشد سودوموناس آئروجینوزا و اثر آن بر بیان ژن اگزوتوکسین S به روش Real-Time PCR است.مواد و روش هاکشت سودوموناس آئروجینوزا در محیط Brain Heart Broth صورت گرفت. استخراج Total RNA باکتری با کیت RNA Protect Bacteria و استخراج cDNA با کیت QuantiTect Transcription Reverse انجام شد. کشت ساکارومیسس سرویزیه در محیط Potato Dextrose Broth صورت گرفت و سوپرناتانت آن به دست آمد. سه بار آزمایش حداقل غلظت بازدارنده ی رشد(MIC) سوپرناتانت علیه سودوموناس آئروجینوزا با روش micro dilution broth انجام شد. سوسپانسیون باکتریایی سودوموناس آئروجینوزا سه بار جداگانه با کشت خالص و سوپرناتانت مخمر مجاور شد و هر بار آزمایش Real-Time PCR با کیت QuantiTect SYBER Green PCR جهت سنجش بیان ژن اگزوتوکسین S صورت گرفت.نتایجحداقل غلظت ممانعت گر رشد (MIC) سوپرناتانت علیه سودوموناس آئروجینوزا μg/ml 2048 بود. نتایج آزمایش Real-Time PCR نشان دهنده ی بازده بیان ژن اگزوتوکسین S در کشت باکتری و سوپرناتانت 77 /1 بود.نتیجه گیریسوپرناتانت باعث ممانعت از رشد سودوموناس آئروجینوزا شد اما سبب افزایش بیان ژن اگزوتوکسین S در سودوموناس آئروجینوزا گردید، زیرا از غلظتMIC سوپرناتانت استفاده شد و عدد بازده بیان ژن بزرگ تر از 1 شد.کلید واژگان: ساکارومیسس سرویزیه, سودوموناس آئروجینوزا, سوپرناتانت, اگزوتوکسین SBackground And ObjectiveSaccharomyces cerevisiae is one of the probiotic yeasts that has positive effects on health. Pseudomonas aeruginosa is one of the important opportunistic pathogenic bacteria. The purpose of this study was to determine the effect of supernatant of Saccharomyces cerevisiae on preventing the growth of Pseudomonas aeruginosa and its effect on exotoxin S gene expression by Real-Time PCR method.Materials And MethodsPseudomonas aeruginosa was cultured in brain heart broth. Total RNA extraction was done by RNA Protect Bacteria kit and cDNA extraction was performed with QuantiTect Reverse Transcription kit. Saccharomyces cerevisiae was cultured in potato dextrose broth culture media and its supernatant was gained. Minimal Inhibitory Concentration (MIC) test for supernatant against P. aeruginosa was done by micro dilution broth method three times. The bacterial suspension of P. aeruginosa was admixed three times with pure culture, supernatant yeast. Each Real-Time PCR test was performed with a QuantiTect SYBER Green PCR kit to measure the expression of Exotoxin S gene.ResultsSupernatant Minimal Inhibitory Concentration (MIC) test against Pseudomonas aeruginosa was 2048 µg/ml. The results of Real-Time PCR test represent the Exotoxin S gene expression efficiency in the culture of bacteria and supernatant was 1.77.ConclusionSupernatant of Saccharomyces cerevisiae could prevent the growth of Pseudomonas aeruginosa, but increases the expression of Exotoxin S gene in Pseudomonas aeruginosa, because supernatant 1/2 MIC concentrations was used and the gene expression efficiency number was greater than 1.Keywords: Saccharomyces cerevisiae, Pseudomonas aeruginosa, Supernatant, Exotoxin S
-
مقدمه و هدفبراساس تعریف ارائه شده توسط WHO/FAO:''پروبیوتیک ها میکروارگانیسم های زنده ایی هستند که استفاده از میزان کافی آن اثرات سودمندی برای میزبان به ارمغان می آورد. ساکارومایسس سرویزیه اولین مخمر غیرپاتوژنی است که به عنوان پروبیوتیک برای انسان شناخته شد. سودوموناس آئروجینوزا یکی از پاتوژنهای مهم فرصت طلب است که مقاومت قابل توجهی به طیف وسیعی از مواد آنتی باکتریال دارد. این مطالعه اثر ساکارومایسس سرویزیه را بر تولید فاکتورهای بیماری زای سودوموناس آئروجینوزا (الاستاز، آلکالین پروتئاز و حرکت) ارزیابی می کند.مواد و روش هادر این مطالعه، از سویه ی بومی ساکارومایسس سرویزیه S3که خاصیت پروبیوتیکی آن در مطالعات قبلی به اثبات رسیده و از باکتری سودوموناس آئروجینوزا سویه ی PAO1 استفاده گردید. به منظور بررسی اثر (سوپرناتانت و لیزات) مخمر برسودوموناس آئروجینوزا از آزمایش های فنوتیپی (آزمایش تست الاستاز-آلکالین پروتئاز-حرکت) مناسب استفاده گردید.نتایجعصاره ساکارومایسس سرویزیه (سوپرناتانت-لیزات) تخلیص شده از سویه بومی، دارای اثرات مهارکنندگی علیه سودوموناس آئروژینوزا است. سه فاکتور دخیل در بیماری زایی سودوموناس آئروجینوزا که در این مطالعه مورد بررسی قرار گرفت (الاستاز- حرکت-آلکالین پروتئاز) همگی در بررسی های فنوتیپی تا حد قابل قبولی کنترل و مهار گردید.نتیجه گیریبا توجه به نتایج حاصل از این پژوهش، ساکارومایسس سرویزیه دارای اثرات کاهنده علیه فاکتورهای بیماری زای سودوموناس آئروجینوزا است که با تحقیقات گسترده تر در این زمینه می توان به عنوان یک روش نوین و امیدبخش در درمان عفونت های حاصل از این باکتری مورد استفاده قرار گیرد.کلید واژگان: سودوموناس آئروجینوزا, ساکارومایسس سرویزیه, الاستاز, حرکت, آلکالین پروتئازBackground And ObjectiveAccording to definition of probiotics by WHO/FAO that is Live microorganisms which, when present in sufficient amount, confer beneficial effects to the host.
Saccharomyces cerevisiae is the first non-pathogenic yeast which is known as a probiotic for humans that its helpful effects for humankind has been proved. Pseudomonas aeruginosa is one of the most significant opportunistic pathogen that has notably resistance to many antibacterial agents. This study evaluated the effect of Saccharomyces cerevisiae on the pathogenic factors of Pseudomonas aeruginosa such as elastase, alkaline protease, and motility.Materials And MethodsIn this study, we used local strain of Saccharomyces cerevisiae, which has the probiotic property and Pseudomonas aeruginosa )PAO1 strain). In order to investigate the effect of Saccharomyces cerevisiae (supernatant-lysate) on Pseudomonas aeruginosa, appropriate phenotypic tests were used.ResultsThe extract of Saccharomyces cerevisiae from local strain has inhibitory effects against Pseudomonas aeruginosa. Three factors involved in Pseudomonas aeruginosa pathogenicity, which was studied in this research (elastase, alkaline protease, and motility), to the acceptable extent, controlled and inhibited.ConclusionAccording to results of this study, Saccharomyces cerevisiae has reducing effects against Pseudomonas aeruginosa, which with more extensive research in this field, it can be used as a promising and innovative way to treat infection of this bacteria.Keywords: Pseudomonas aeruginosa, Saccharomyces cerevisiae, Elastase, Motility, Alkaline protease -
زمینه و هدفترکیبات نفتی آروماتیک جزء مهم ترین آلاینده های آلی بوده که به واسطه عوارض جانبی متعدد نظیر سرطان زایی، جهش زایی و سم زایی از خطرناک ترین ترکیبات نفتی است. در بین باکتری های تجزیه کننده ترکیبات آروماتیک، سودوموناس ها به واسطه توانایی تولید آنزیم های تجزیه کننده از ابزارهای مهم بیولوژیک در جهت کاهش انواع آلاینده ها از جمله هیدروکربن های سه حلقه ای آنتراسن است. این مطالعه به منظور ارزیابی توانایی سودوموناس آئروجینوزا جدا شده از مصب رودخانه برای تجزیه آنتراسن در مقیاس آزمایشگاهی انجام شد.روش بررسیدر این مطالعه توصیفی – تحلیلی نمونه ها از رسوبات مصب رودخانه بابلرود اخذ و پس از انتقال به آزمایشگاه در محیط کشت حداقل MSM (Minimal Salt Medium) کشت داده شدند. پس انجام تست های بیوشیمایی و آزمایشات تکمیلی مولکولی، یکی از باکتری های جدا شده سودوموناس آئروجینوزا بود. برای ارزیابی تجزیه بیولوژیکی آنتراسن توسط سودوموناس، از عواملی نظیر pH (دامنه 6.5 و 7.5)، دما (25 و 35 درجه سانتی گراد) و غلظت آنتراسن (150 و 200 میلی گرم در لیتر) استفاده شد. روند تغییرات آنتراسن و باکتری در زمان های صفر، 24 و 48 ساعت به ترتیب با استفاده از دستگاه HPLC و قرائت جذب نوری با استفاده از دستگاه اسپکتروفتومتر تعیین گردید.یافته هاشرایط بهینه برای تجزیه آنتراسن شامل pH=7.5، دمای 35 درجه سانتی گراد و غلظت 150 میلی گرم در لیتر از آنتراسن بود و با افزایش زمان انکوباسیون، روند تجزیه آنتراسن نیز سریع تر صورت گرفت. بازده تجزیه بیولوژیکی آنتراسن در حضور سودوموناس 50 درصد در طول دو روز بود که نشان دهنده توانایی بالای آنزیمی این باکتری است.نتیجه گیریبا توجه به پتانسیل رشد بالای سودوموناس در محیط های نامناسب و تولید طیف وسیعی از آنزیم های تجزیه کننده توسط این باکتری می توان از آن به عنوان باکتری شاخص برای حذف آنتراسن استفاده نمود.کلید واژگان: هیدروکربن های چند حلقه ای آروماتیک, آنتراسن, سودوموناس آئروجینوزاBackground And ObjectivePolycyclic Aromatic Hydrocarbons (PAHs) are the most important organic pollutants that causing multiple side effects including carcinogenic, mutagenic and toxicity. Among the aromatic compounds degrading bacteria, pseudomonas produce board spectrum of degrading enzymes and are used, as biological tools, for decreasing of PAHs. This study was done to evaluate the degradation of polycyclic hydrocarbones anthracene by using Pseudomonas aeruginusa.MethodsIn this descriptive analytic study, sampling was collected from river estuary sediment and had cultured in Minimal Salt Medium (MSM). Pseudomonas aeruginosa was one of the isolated bacteria from river sediment which identified by molecular technique. In next step, influence of pH (6.5 and 7.5) temperature (25 and 35°C) and concentration of anthracene (150 and 200 ppm) were surveyed on anthracene biodegradation and bacterial growth during zero, 24 and 48 hours by HPLC and spectrophotometry method respectively.ResultsThe results showed that the optimized condition for biodegradation included pH=7.5, 35°C and 150 ppm of anthracene. Bacterial degradation of anthracene was increased with prolong of incubation time. Biodegradation efficiency of anthracene in the presence of pseudomonas was 50% within 2 days, which indicates the ability of the bacteria for the enzymes production.ConclusionHigh growth potential of pseudomonas in unsuitable areas and due to the production of degrading enzymes, it can be used as indicator bacteria used to remove anthracene.Keywords: Polycyclic aromatic hydrocarbons, Anthracene, Pseudomonas aeruginosa
-
مقدمه و هدفافزایش مقاومت دارویی و توجه بیشتر به خطرات عوارض جانبی داروهای صناعی باعث شده است که تحقیقات گسترده ای بر روی منابع گیاهی دارویی انجام شود. هدف از انجام این مطالعه تعیین ترکیبات شیمیایی عصاره گیاهان دارویی خار مریم (Silybum marianum) و رازیانه (Foeniculum vulgare) بومی اردبیل و بررسی اثر ضد سرطان آنها بر روی رده سلولی سرطان کبد HepG2 و اثرات ضد باکتریایی آنها بر روی استافیلوکوکوس اورئوس و سودوموناس آئروژینوزا جهت ارائه یک راه حل برای کنترل یا درمان بود.روش تحقیقترکیبات شیمیایی عصاره های به دست آمده از طریق دستگاه سوکسیله توسط سیستم GC/MS انجام گرفت. اثر ضد سرطانی با روش MTT و فعالیت های ضد میکروبی با استفاده از روش انتشار دیسک مورد سنجش قرار گرفتند و همچنین مقادیر MIC و MBC بر اساس روش رقت در لوله برآورد گردید.نتایج و بحثعصاره خارمریم با 29 ترکیب و عمدتا شامل 63/2% Nonane، 68/4% Camphor، 84/2% Borneol، 65/3% Trans-anethole، 78/8% Viridiflorol، 26/34% α–Selinene، 34/2% Longiborn-9-ene، 52/2% amorphane-B، 00/5% Erucylamide، 15/10% o-Terphenyl و 8/46% α-androst-8-ene بود، عصاره رازیانه با 14 ترکیب و عمدتا شامل 53/5 درصد Fenchone، 53/5% α- Thujone، 84/2% Nonane، 10/79% trans-Anethol و 51/2 درصد Hentriacontane بود. اثرات عصاره رازیانه بر روی استافیلوکوکوس و عصاره خارمریم بر روی سودوموناس قابل توجه بود. در طرح ترکیبی، تاثیر خاصی مشاهده نشد. مقادیر MIC و MBC نتایج حاصل از تست حساسیت را تایید کردند. اثرات سیتوتوکسیک عصاره ها بر رده سلول سرطانی کبد در غلظت 25 µg/ml بعد از 48 ساعت اپتیمم بود.توصیه کاربردی/صنعتیبا توجه به نتایج، این ترکیبات می توانند جایگزین مناسبی برای مواد نگهدارنده شیمیایی در صنایع غذایی و صنایع دارویی باشند.کلید واژگان: خار مریم, رازیانه, استافیلوکوکوس اورئوس, سودوموناس آئروجینوزا, HepG2Background & AimAccording to globally development of stomach cancer especially in Ardabil, Iran, as the second major cause of mortality throughout the world, increased drug-resistant bacteria including Helicobacter pylori as the most important risk factors for stomach cancer, and side effects of antibiotics and chemical drugs normally used to treat.ExperimentalThe current research was conducted to investigate the anticancer and antimicrobial effects of native herbs of liquorice (Glycyrrhiza glabra) and pennyroyal (Mentha pulegium) extractions for finding a solution with the lowest complications in control or treatment of stomach cancer.The extractions were firstly obtained using Soxhlet and methanol solvent and then their compounds were determined by GC/MS. Antimicrobial activity, MIC and MBC of the extractions were assessed respectively using agar diffusion and broth dilution test and the anticancer effect on stomach cancer (cell line AGS) was assessed by MTT assay. H. pylori ATCC 26695 was respectively revived and purified on Brucella broth containing 7% citrated horse serum and Columbia agar.ResultsThe analysis showed thatliquorice extract contains 15 compositions, mainly consists of 26.48% Nonane, 23.38% Ethylcyclohexan, 8.29% 3-Bromodecane, 10.31% trans-2-Heptenal, 8.93% 9-Octadecenamide and 4.68% β-pregna and pennyroyal extract contains 17 compositions, mainly including 3.36% Camphor, 22.79% Pulegone, 4.92% Paramenth-3-n8-l, 8.06% Menthoforan, 7.54% Cis-Isopulegon and 24.58% α-Selinene. The bacteria were resistant or semi-sensitive to common antibiotics, whereas had considerable sensitivity to herbal extracts and liquorice showed almost three times more antibacterial effect. Pennyroyal extract had no cytotoxic effects, but the anticancer effect was observed in liquorice extract with optimal concentration of 25 μg/ml after 48 hours.Recommended applications/industriesIn conclusion, liquorice extract due to the significant health benefits of anticancer and antibacterial activity can be selective and highly effective herbal medicine as an alternative to antibiotics and other chemical drugs.Keywords: Glycyrrhiza glabra, Mentha pulegium, Helicobacter pylori, AGS
-
مقدمهنانوذرات با اندازه ها، خصوصیات شیمیایی و سطحی متفاوت می توانند کاربردهای مختلفی داشته باشند. سودوموناس آئروجینوزا باکتری فرصت طلبی است که توانایی تولید پیگمان دارد. هدف این تحقیق بررسی اثر نانو ذرات اکسید روی بر تولید پیگمان جدایه های بالینی سودوموناس آئروجینوزا بود.مواد و روش هادر این مطالعه توصیفی مقطعی، 15 جدایه بالینی سودوموناس آئروجینوزا از بیمارستان های مشهد جمع آوری گردید. باکتری ها با استفاده از آزمایشات بیوشیمیایی و واکنش زنجیره پلیمراز (PCR) با پرایمر اختصاصی ژن exoA شناسایی شدند. حداقل غلظت ممانعت کننده از رشد(MIC) و حداقل غلظت کشندگی(MBC) نانوذرات اکسید روی(قطر nm 7-4) با روش رقت در آگار تعیین شد. برای بررسی اثر نانوذره بر تولید پیگمان، از محیط گلیسرول آلانین(GA) حاوی غلظت های مختلف نانوذره(0، 20، 40 و mg/ml60) استفاده شد. پیگمان با افزودن کلروفرم استخراج شد.
یافته های پژوهش: تمامی جدایه های بالینی با روش های بیوشیمیایی به عنوان سودوموناس آئروجینوزا شناسایی شدند و ژن exoA در آن ها ردیابی شد. میانگین MIC نانوذرات mg/ml 60 و MBC آن mg/ml 70 تعیین شد. میزان تولید پیگمان پیوسیانین در تمامی جدایه ها بررسی و مقایسه شد. با افزایش غلظت نانوذره میزان تولید پیگمان به طور معنی داری کاهش یافت(P<0.05).بحث و نتیجه گیرینانوذره اکسید روی اثر مهاری بر این باکتری و تولید پیگمان آن داشت و با افزایش غلظت نانوذره، تولید پیگمان کاهش یافت. از نانوذره اکسید روی می توان برای پیشگیری و یا کمک به درمان عفونت های سودوموناس آئروجینوزا استفاده کرد.کلید واژگان: پیوسیانین, نانوذرات, اکسید روی, سودوموناس آئروجینوزاIntroductionNanoparticles with the different sizes, surfaces and chemical characteristics can have different applications. Pseudomonas aeruginosa is an opportunistic bacterium that has the ability to produce pigment. The aim of this study was to investigate the effect of zinc oxide (ZnO) nanoparticles on pigment production of clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa.Materials and MethodsIn this description cross-sectional study, 15 clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa were collected from hospitals in Mashhad. Bacteria were identified using biochemical tests and polymerase chain reaction (PCR) by specific primers of exoA gene. The minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC) of zinc oxide nanoparticles (diameter of 4-7 nm) were determined by agar dilution method. Glycerol- alanine (GA) medium containing different concentrations (0, 20, 40 and 60 mg/ml) of nanoparticles were used for investigation of the effect of ZnO nanoparticles on pigment production. The pigment was extracted by adding chloroform.
Findings: All clinical isolates were identified by biochemical experiments as P. aeruginosa and exoA gene was detected in all bacteria. The average MIC and MBC of ZnO nanoparticles were 60 mg/ml and 70 mg/ml, respectively. All isolates were examined and compared for pyocyanin pigment production. The pigment production was significantly reduced with increasing concentrations the ZnO nanoparticles (p Discussion &ConclusionZinc oxide nanoparticles had inhibitory effect on bacteria and pigment production. Pigment production decreased with increasing concentrations of nanoparticles. ZnO nanoparticles could be used in prevention or helping to treat P. aeruginosa infections.Keywords: Pyocyanin, Nanoparticles, Zinc oxide, Pseudomonas aeruginosa -
مقدمهسودوموناس آئروجینوزا عامل اصلی عفونت های حاد بیمارستانی، دارای مقاومت ذاتی به طیف وسیعی از آنتی بیوتیک ها می باشد. مقاومت آن به آنتی بیوتیک های بتالاکتام به دلیل تولید آنزیم های بتالاکتامازها و متالوبتالاکتامازها می باشد، که معضلات زیادی را در درمان این عفونت ها ایجاد می نماید. هدف از این مطالعه جداسازی و بررسی سویه های مقاوم به آنتی بیوتیک های بتالاکتام و ایمی پنم در نمونه های کلینیکی جدا شده از چهار بیمارستان بزرگ تهران می باشد.مواد و روش هادر این مطالعه تحلیلی-توصیفی، طی 2 سال، 600 نمونه سودوموناس آئروجینوزا از بیماران بستری و یا مراجعه کننده به بیمارستان های بقیه الله (عج)، امام خمینی، مرکز طبی کودکان و سوانح سوختگی شهید مطهری جمع آوری گردید. بررسی اولیه مقاومت باکتریایی با استفاده از آنتی بیوتیک های وسیع الطیف مختلف از روش دیسک دیفیوژن(Kirby-Bauar) انجام گردید. سپس تست MIC نسبت به سفتازیدیم و ایمی پنم با روشMicrodiution tube و پروتکل CLSI برای آن ها مورد بررسی قرار گرفت.
یافته های پژوهش: در این مطالعه بالاترین حساسیت باکتری(92 درصد) به ایمی پنم(IPM) و بیشترین مقاومت(2/91 درصد) به تتراسیکلین(Te) نشان داده شد. هم چنین نتایج روش MIC نشان داد که 6 درصد از سویه ها دارای مقاومت به ایمی پنم(g/mlμ4 ≤ MIC) می باشند و 5/39 درصد از آن ها دارای مقاومت به سفتازیدیم(g/mlμ16 ≤ MIC) می باشند.بحث و نتیجه گیرینتایج حاصل نشان می دهد که به دلیل مقاومت بالای این باکتری نسبت به ایمی پنم و سفالوسپورین های نسل سوم، حتما در مصرف این آنتی بیوتیک ها دقت بیشتر ضروری است، چرا که در غیر این صورت خطر انتقال این مقاومت به دیگر سویه ها و از جمله دیگر باکتری های گرم منفی دور از انتظار نخواهد بود.کلید واژگان: سودوموناس آئروجینوزا, مقاومت آنتی بیوتیکی, ایمی پنم, MICIntroductionPseudomonas aeruginosa is a major agent of hospital infection which has a resistance intrinsic to a wide range of Antibiotics. It is resistant to beta-lactam antibiotics because of Beta-lactamase and Metalo-lactamase enzymes production. They have crucial problems in the treatment. The goal of this research is to isolate and characterize strains which are resistant to beta-lactam and Imipenem Antibiotics in clinical samples from four major hospitals in Tehran.
Methods &MethodsIn this study 600 samples of Pseudomonas aeruginosa were collected from patients and those people referring to Baqyiatallah hospital , Imam Khomeini hospital , Shahid Motahari Burns Center and Pediatrics Center during two years, In the first step Antibacterial resistance were prefer by wide range of Antibiotics (Kirby-Bauar). The MIC test was used to Ceftazidime and Imipenem by Microdiution tube and CLSI protocol.
Findings: This research demonstrated that the highest sensitivity of bacteria is to Imipenem (92%) and Tetracycline (91.2%) The results showed that 6 % of the MIC of strains are resistant to imipenem (4μg/ml≤ MIC) and the 39/5 % of them are resistant to Ceftazidime (16μg/ml ≤ MIC), respectively.
Discussion &ConclusionsThese results showed that consumption of these Antibiotics should be used precisely due to the highest resistance of these bacteria to Imipenem and third generation Cephalosporins otherwise it can transfer to other strains Gram-Negative bacteria special.Keywords: Pseudomonas aeruginosa, Imipenem, Antimicrobial resistance, MIC -
مجله پزشکی دانشگاه علوم پزشکی تبریز، سال سی و هشتم شماره 6 (پیاپی 126، بهمن و اسفند 1395)، صص 74 -83زمینه و اهداف
سودوموناس ائروجینوزا یکی از باکتری های مهم در عفونت های بیمارستانی است که قادر به ایجاد مقاومت های دارویی در مقابل بسیاری از عوامل ضدمیکروبی و آنتی بیوتیک ها می باشد. این باکتری فرصت طلب در بیماران مختلف بویژه در بیماران مبتلا به نقص ایمنی از قبیل بیماران بستری در بخش های مراقبت ویژه و بخش های سوختگی قادر به ایجاد عفونت های خطرناک و منجر به مرگ می گردد. این باکتری اغلب از منشاء محیط بیمارستان انتقال یافته و با داشتن مقاومت آنتی بیوتیکی وسیع چرخه ی عفونت های بیمارستانی را دوام می بخشد. این مطالعه جهت شناخت بهتر اپیدمیولوژیک سویه های دخیل در عفونت های سوختگی در بخش سوانح سوختگی مرکز آموزشی و درمانی سینای تبریز و مقایسه ی ژنومی باکتری های جدا شده از عفونت های سوختگی با استفاده از روش RAPD (Random amplified polymorphic DNA) انجام شد.
مواد و روش هاتعداد 124 ایزوله ی سودوموناس ائروجینوزا از نمونه های مختلف بیماران بستری در بخش سوختگی شامل ترشحات زخم سوختگی و خون، با روش های مرسوم آزمایشگاهی شامل میکروسکوپی، کشت و انجام تست های بیوشیمیایی جداسازی شدند. ایزوله های جمع آوری شده جهت (1) شناسایی الگوی حساسیت و مقاومت در برابر آنتی بیوتیک های رایج در درمان شامل سفتازیدیم، آزترونام، کاربنی سیلین، پلی میکسین B، کولیستین، جنتامایسین و سیپروفلوکساسین با استفاده از روش دیسک آگار دیفیوژن و (2) DNA ایزوله ها استخراج شده و از روش RAPD-PCR با استفاده از دو پرایمر کوتاه 272(5’-AGCGGCCAA-3’) و 208(5’-ACGGCCGACC-3’) مورد مقایسه قرار گرفتند.
یافته هاحساسیت و مقاومت به آنتی بیوتیک های آزمایشی، نشانگر مقاومت بالا در برابر آزترونام (1/70٪)، سفتازیدیم (1/66٪)، کولیستین (2/61٪)، کاربنی سیلین (6/51٪)، جنتامایسین (5/47٪)، سیپروفلوکساسین (5/18٪) و پلی میکسینB (7/13٪) بود. ایزوله های آزمایشی 41 الگوی حساسیت آنتی بیوتیکی نشان دادند. نتایج RAPD نشانگر وجود 32 ژنوتیپ مختلف در بین ایزوله های آزمایشی بود که از این تعداد 60 ایزوله دارای ژنوتیپ مشابه (42 ایزوله با یک باند مشابه، 2 ایزوله با دو باند مشابه، 8 ایزوله با سه باند مشابه، 6 ایزوله با چهار باند مشابه و 2 ایزوله با هشت باند مشابه) بودند. اگرچه مقایسه ی ژنوتیپ RAPD با الگوی حساسیت آنتی بیوتیکی در یکی از ژنوتیپ ها تشابهات الگوی حساسیت آنتی بیوتیکی را نشان داد، ولی در بقیه ی ژنوتیپ ها چنین تشابهی مشاهده نشد.
نتیجه گیریدر این مطالعه 124 ایزوله ی سودوموناس ائروجینوزای ایزوله شده از عفونت های سوختگی بیشترین مقاومت را به آزترونام (1/70٪) و کمترین میزان مقاومت را به پلی میکسین B (7/13٪) نشان دادند. ایزوله های آزمایشی دارای 41 الگوی حساسیت آنتی بیوتیکی متفاوت بودند.نتایج RAPD-PCR نشانگر وجود 32 ژنوتیپ مختلف در باکتری های آزمایشی بود. مقایسه ی الگوی حساسیت آنتی بیوتیکی ایزوله ها بر اساس ژنوتیپ RAPD باکتری ها فقط در ژنوتیپ 3 که شامل 42 ایزوله (8/33٪) بود تشابه الگوی حساسیت آنتی بیوتیکی را نشان داد، درحالیکه در بقیه ی ژنوتیپ ها هیچگونه تشابهی بدست نیامد. لذا این تشابهات احتمال در گردش بودن این سویه ها در بین بیماران بخش سوختگی را مطرح می سازد و نیاز به اعمال شرایط دقیق ضد عفونی و پایش های میکروبیولوژیک لازم در این بخش ها را یادآور می شود.
کلید واژگان: سودوموناس ائروجینوزا, الگوی حساسیت آنتی بیوتیکی, RAPD, PCR, ژنوتیپ, بیمار دچار سوختگیBackground and ObjectivesPseudomonas aeruginosa is one of the important nosocomial Gram-negative bacilli which are resistant to most of antimicrobial agents and antibiotics. This opportunistic bacterium is capable of causing life threatening infections in patients, especially in those with immunodeficiency such as those in ICUs and burn wards. This study was conducted to detect antibiotic susceptibility and also molecular typing of P. aeruginosa isolates from burn infections by using RAPD (Random amplified polymorphic DNA).
Materials and MethodsTotally 124 P. aeruginosa isolates collected from burn patients consisting of burn infection discharge and blood specimens by application of conventional microscopic, culture and biochemical identification tests. The collected isolates were studied for their antibiotic susceptibility patterns using routine antibiotics ceftazidim (30 µg), aztreonam (30 µg), carbenicillin (100 µg), polymixin B(300 u), colistin(100 µg), gentamicin(10 µg) and ciprofloxacin(5 µg) by disc agar diffusion method and detection of genotypes by two short primers namely 272(5-AGCGGCCAA-3) and 208(5-ACGGCCGACC-3) according to RAPD-PCR method.
ResultsResults of antibiotic susceptibility tests showed high resistance to aztreonam (70.1%), ceftazidime (66.1%), colistin (61.2%) and gentamicin (47.5%), but less resistance to ciprofloxacin(18.5%) and polymixin B(13.7%). Based on antibiotic susceptibility 41 patterns were detected. RAPD-PCR created 32 genotypic profiles with base pair length ranging from 250 to 10000. Each genotype showed between 1 and 8 different weight DNA bands. Genotype 3 was the most prevalent, identified in 42 isolates (33.8%) and accommodated isolates with similar antibiotic susceptibility patterns, while in other genotypes no similar susceptibility patterns were encountered.
ConclusionOur P. aeruginosa isolates collected from burn infections were most resistant to aztreonam (70.1%), but least resistant to polymixin B (13.7%). The test isolates showed 41 antibiotic susceptibility patterns and 32 RAPD genotypes. Genotype 3 was the most prevalent and accommodated isolates with similar antibiotic susceptibility patterns, but in other genotypes, isolates with similar antibiotic susceptibility patterns was not detected. Some isolates with similar antibiotic patterns underline possibility of their transfer among burn patients and suggest need for restricted conditions and microbiologic surveillance in the burn wards.
Keywords: Pseudomonas aeruginosa, Antibiotic susceptibility pattern, RAPD, PCR, Genotyping, Burn patient -
پیش زمینه و هدفسودوموناس آئروجینوزا باسیل گرم منفی مولد بیوفیلم و فسفومایسین آنتی بیوتیکی وسیع الطیف و آویشن یکی از پرمصرف ترین گیاهان دارویی می باشند. هدف از انجام این مطالعه بررسی اثرات توام فسفو مایسین و اسانس آویشن بر میزان تولید بیوفیلم سودوموناس آئروجینوزا PAO1 می باشد.مواد و روش کارحداقل غلظت مهارکننده و کشنده فسفومایسین و اسانس آویشن به ترتیب در دامنه غلظت 25/0 تا128 میلی گرم در لیتر و 10درصد_078/0درصد تعیین شد. تولید بیوفیلم در غیاب و حضور غلظت های تحت کشنده از آنتی بیوتیک و یا اسانس و غلظت های توام از هردو اندازه گیری شد. آنالیز واریانس دوعاملی به منظور بررسی اثرات اصلی آویشن و آنتی بیوتیک و اثر متقابل آویشن و آنتی بیوتیک مورداستفاده قرار گرفت.یافته هاحداقل غلظت مهارکننده و کشنده فسفومایسین 64 میکروگرم در میلی لیتر و حداقل غلظت کشنده اسانس آویشن 5درصد بود. تولید بیوفیلم در غیاب فسفومایسین و آویشن حداکثر و در حضور فسفومایسین و غلظت تحت کشنده 5/2درصد اسانس آویشن کاهش یافت و کاهش بیشتری در حضور غلظت های توام مشاهده شد. نتایج آنالیز آماری نشان داد که در تیمار سویه PAO1 با تمامی دوزهای فسفومایسن ازنظر میزان تولید بیوفیلم با مورد بدون تیمار تفاوت معنی دار وجود دارد، ولی بین میزان کاهش تولید بیوفیلم تحت تاثیر غلظت های مختلف آنتی بیوتیک با یکدیگر تفاوت معنی دار وجود نداشت(برای تفاوت مابین همه گروه ها p>0.05).بحث و نتیجه گیریکاربرد توام اسانس آویشن و آنتی بیوتیک فسفومایسن به ویژه در غلظت های کم تر از آنتی بیوتیک فسفومایسین، روشی امیدبخش در کنترل و پیشگیری از تولید بیوفیلم توسط سویه PAO1 است.کلید واژگان: سودوموناس آئروجینوزا, بیوفیلم, فسفومایسین, آویشنBackground and AimsPseudomonas aeruginosa is a gram-negative bacterium which is capable of producing biofilm, phosphomycin is one of the broad-spectrum antibiotics and Zataria multiflora is among the most widely used medicinal plants. The aim of this study was to evaluate the combined effects of Phosphomycin and Z.multiflora essential oil against biofilm formation by P. aeruginosa PAO1.Materials and MethodsMinimum inhibitory concentration (MIC) and Minimum bactericidal concentration (MBC) of phosphomycin and Z.multiflora essential oil were determined in the concentration range of 0.25- 128 mg and 0.078%- 10% v/v, respectively. The biofilm formation amounts were measured in the absence of antimicrobials and then in the presence of sub-lethal concentrations of them alone or in combination. Two-factor analysis of variance was used to assess the main effects of Z.multiflora essential oil, antibiotic and the interaction between Z.multiflora essential oil and phosphomycin.ResultsMinimum inhibitory and bactericidal concentrations of phosphomycin were 64 mg/mL and minimum bactericidal concentration of the essential oil was 5%. The amount of biofilm formation in the absence of phosphomycin and Z.multiflora essential oil was the most, but in the presence of phosphomycin and sub-lethal concentration (2.5% V/V) of Z.multiflora essential oil was significantly reduced. More reduction was observed in the presence of the both compounds. Statistical analysis showed that there was a significant difference in biofilm formation in the presence of all phosphomycin doses compared with its absence; however, there was no significant difference between the amounts of biofilm formation in the presence of different concentrations of antibiotic (the difference between all groups, p> 0.05).ConclusionCombined use of Z.multiflora essential oil and phosphomycin, especially in low concentrations of phosphomycin, is a promising way to control and prevent biofilm formation by of P. aeruginosa PAO1.Keywords: P. aeruginosa, Phosphomycin, Biofilm, Z.multiflora
-
مجله دانشگاه علوم پزشکی شهید صدوقی یزد، سال بیست و چهارم شماره 1 (پیاپی 114، فروردین 1395)، صص 74 -82مقدمهکارباپنم ها یکی از آخرین داروهای درمانی برای عفونت های تهدید کننده سودوموناس آئروجینوزا هستند. مقاومت به این آنتی بیوتیک ها گاهی ناشی از کارباپنمازهای دسته B مثل متالوبتالاکتاماز رده VIM است که در جوامع رو به افزایش است. هدف اجرای پژوهش حاضر شناسایی ایزوله های بالینی سودوموناس آئروجینوزای حامل ژن blaVIM-1 در مشهد بود.روش بررسیدر این مطالعه توصیفی مقطعی، 70 ایزوله سودوموناس آئروجینوزا از نمونه های بیماران بستری در بیمارستان های مشهد جمع آوری شدند. باکتری ها با روش های بیوشیمیایی معمول شناسایی شدند. آزمایش حساسیت آنتی بیوتیکی مطابق با روش کربای بایر انجام شد و ایزوله های مولد متالوبتالاکتاماز با روش دیسک ترکیبی ایمی پنم و EDTA شناسایی شدند. سپس واکنش زنجیره پلیمراز با استفاده از پرایمرهای اختصاصی برای ردیابی ژن blaVIM-1 انجام شد.نتایج25 باکتری(7/35%) از 70 باکتری جدا شده دارای متالوبتالاکتاماز بودند که در ژنوم 8 باکتری ژن blaVIM-1 ردیابی شد. 6/65% باکتری های مقاوم به ایمی پنم، متالوبتالاکتاماز تولید می کردند. درصد بیشتری از ایزوله های مولد متالوبتالاکتاماز نسبت به ایمی پنم، مروپنم، کاربنی سیلین و سفوتاکسیم مقاوم بودند(05/0 > p).نتیجه گیرینتایج تحقیق نشان داد که مقاومت های آنتی بیوتیکی در میان ایزوله های بالینی سودوموناس آئروجینوزا در ناحیه مورد بررسی بالا بود و متالوبتالاکتاماز تیپ VIM در برخی از آنها ردیابی شد. شناسایی باکتری های دارای متالوبتالاکتاماز در پیشگیری و درمان عفونت های مقاوم به آنتی بیوتیک اهمیت بسزایی دارد.کلید واژگان: سودوموناس آئروجینوزا, متالوبتالاکتاماز, ژن blaVIM, 1, مقاومت آنتی بیوتیکیIntroductionCarbapenems are one of the latest drugs for treatment of threatening infections of Pseudomonas aeruginosa. Resistance to these antibiotics is sometimes caused by carbapnmase class B, such as VIM metallo-beta-lactamase (MBL) that is growing in the communities. The aim of this study was to detect the of metallo-beta-lactamase blaVIM-1 gene among clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa in Mashhad.MethodsIn this cross-sectional study, 70 isolates of Pseudomonas aeruginosa were collected from samples of inpatients at hospitals in Mashhad. Bacteria were identified by conventional biochemical methods. Antibiotic susceptibility testing was examined in accordance with the Kirby-Bauer method. Metallo-beta-lactamase- producing isolates were identified using a combination disc of imipenem and EDTA. Then, polymerase chain reaction was performed using specific primers to detect blaVIM-1 gene.Results25 (35.7%) out of 70 isolated bacteria had metallo-beta- lactamase, which blaVIM-1 gene were detected in the genome of 8 isolates. 65.6% of resistant bacteria to imipenem produced metallo-beta-lactamase (MBL). A higher percentage of MBL- producing isolates were resistant to imipenem, meropenem, carbenicillin and cefotaxime (pConclusionThe results of the study showed that antibiotic resistance among examined clinical isolates of Paeruginosa was high and VIM-type metallo-beta-lactamase was detected among them. Identification of bacteria with metallo-beta-lactamase (MBL) is very important in the prevention and treatment of infections resistant to antibiotics.Keywords: Pseudomonas Aeruginosa, Metallo, beta, lactamase, blaVIM, 1 Gene, Antibiotic Resistance
-
مقدمه و هدفسودوموناس آئروجینوزا پاتوژن گرم منفی و از عوامل اصلی عفونت های بیمارستانی با مکانیسم های مقاومت چندگانه، به عنوان دومین عامل مهم بیماری زا شناخته می شود که علی رغم وجود آنتی بیوتیک های متعدد علیه آن، درمان آن اغلب دشوار است. این مطالعه به منظور تعیین حساسیت آنتی بیوتیکی سودوموناس آئروجینوزا به دو روش دیسک دیفیوژن و میکرودایلوشن و مقایسه این دو روش صورت گرفته است.مواد و روش ها100 ایزوله بالینی سودوموناس آئروجینوزا از بیمارستان های منتخب تهران جمع آوری شده و پس از تایید هویت، الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی باکتری به دو روش دیسک دیفیوژن (با دیسک شرکت HiMedia، هند) و میکرودایلوشن (با کیت Sensititre، انگلیس) برای آنتی بیوتیک های آمپی سیلین/سولباکتام، سفتازیدیم، سفتریاکسون، سفوپرازون، کاربنی سیلین، پیپراسیلین، ایمی پنم، تتراسایکلین، جنتامایسین، توبرامایسین، کلرآمفنیکل، سیپروفلوکساسین و آمیکاسین بررسی شده و نتایج حاصله مورد تجزیه وتحلیل آماری قرار گرفت.نتایجمیزان مقاومت به آنتی بیوتیک های مذکور به روش دیسک دیفیوژن در محدوده 28تا100درصد به ترتیب برای آنتی بیوتیک ایمی پنم و تتراسایکلین و به روش میکرودایلوشن در محدوده 30تا97درصد به ترتیب برای آنتی بیوتیک های ایمی پنم و آمپی سیلین/ سولباکتام به دست آمد. همچنین ضریب کاپا یا K value جهت بررسی همخوانی دو روش تعیین مقاومت، برای تتراسایکلین صفر و برای سایر آنتی بیوتیک ها بالاتر از صفر به دست آمد.نتیجه گیریدر هر دو روش مورد مطالعه، بیشترین حساسیت در سودوموناس آئروجینوزا به آنتی بیوتیک ایمی پنم دیده شد که به منظور کاربرد های درمانی به متخصصین مربوطه پیشنهاد می شود. همچنین روش دیسک دیفیوژن حساسیت مناسب در تشخیص مقاومت آنتی بیوتیکی، نظیر روش میکرودایلوشن را برای سودوموناس آئروجینوزا نشان می دهد.کلید واژگان: سودوموناس آئروجینوزا, دیسک دیفیوژن, میکرودایلوشنBackground And ObjectivePseudomonas aeruginosa is a gram-negative pathogen and one of the main causes of nosocomial infections with its multiresistance mechanisms, is known as the second important cause of infections that despite of existence of several antibiotics, the treatment against it is so difficult. This study has been done to detect the antibacterial sensitivity of P.aeruginosa with the use of two methods of disk-diffusion and microdilution and then to compare between them.Materials And Methods100 clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa were collected from selected hospitals of Tehran and then after identification, the resistance pattern of the bacteria were studied with two methods of diskdiffusion and microdilution for these antibiotics: Ampicillin/Sulbactam, Piperacillin, Carbenicillin, Imipenem, Cefteriaxone, Ceftazidime, Cefoperazone, Gentamicin, Tobramycin, Amikacin, Chloramphenicol, Tetracyclin, Ciprofloxacin; then the results were analyzed by statistical tests.ResultsThe rate of resistance with the method of disk-diffusion was in the range of 28-100 percent for imipenem and tetracycline and with the method of microdilution was in the range of 30-97 percent for imipenem and ampicillin/sulbactam. Also, K-value which is used for survey of agreement between two methods used in this study, was 0.0 for tetracycline and more than 0.0 for other antibiotics.ConclusionP.aeruginosa has the maximum sensitivity to imipenem with both methods, so it is suggested to specialists for clinical use. The results have high agreement in all antibiotics except Tetracycline so the disk-diffusion method has a proper sensitivity for detection the antibacterial resistance of P.aeruginosa as well as microdilution method.Keywords: Pseudomonas aeruginosa, Disk diffusion, Microdilution
-
مقدمهفاژدرمانی یا استفاده از باکتریوفاژها برای درمان عفونت باکتری های بیماری زا، به عنوان یکی از روش های جایگزین آنتی بیوتیک ها در باکتری های مقاوم به آنتی بیوتیک مطرح است. هدف این تحقیق جداسازی باکتریوفاژهای موثر علیه سویه های مقاوم به آنتی بیوتیک سودوموناس آئروجینوزا(Pseudomonas aeruginosa) و تعیین هویت آن ها می باشد.مواد و روش هاسویه های مختلف باکتری سودوموناس آئروجینوزا از نمونه های مختلف بالینی در طی 9 ماه(تیر 91 تا فروردین 92) از سه بیمارستان الزهرا(س)، امید و شهید بهشتی شهر اصفهان جداسازی و شناسایی شدند و میزان مقاومت به آنتی بیوتیک در سویه های جداسازی شده نسبت به آنتی بیوتیک های رایج این باکتری(شامل ایمی پنم، مروپنم، آمیکاسین، سیپروفلوکساسین، سفپیم، پیپراسیلین/تازوباکتام، سفوتاکسیم و سفتازیدیم) به روش انتشار از دیسک(کربی-بائر) تعیین گردید. سویه های با مقاومت همه دارویی به این آنتی بیوتیک ها برای جداسازی باکتریوفاژهای اختصاصی انتخاب شدند. در مرحله بعد به منظور جداسازی باکتریوفاژها، نمونه برداری از فاضلاب بیمارستانی و فاضلاب شهری به عمل آمد. به کمک ایجاد پلاک حضور باکتریوفاژها بررسی گردیده و پس از غنی سازی و تغلیظ باکتریوفاژهای جداسازی شده و رنگ آمیزی نمونه ها، به منظور مشاهده موروفولوژی باکتریوفاژها و هم چنین اندازه گیری طول آن ها از میکروسکوپ الکترونی گذاره(TEM) استفاده گردید.
یافته های پژوهش: از میان 81 سویه سودوموناس آئروجینوزا، 38 (47 درصد) سویه از این باکتری ها دارای مقاومت کامل به همه آنتی بیوتیک های تست شده بودند که پلاک های باکتریوفاژها بر علیه 32 عدد(84 درصد) از آن ها دیده شد. در تصاویر گرفته شده توسط میکروسکوپ TEM دو باکتریوفاژ اصلی در مورد همه پلاک ها مورد شناسایی قرار گرفت که به خانواده های سیستوویریده(Cystoviridae) و لویویریده(Leviviridae) متعلق بودند.بحث و نتیجه گیریدو باکتریوفاژها جداسازی شده که به صورت مخلوط(یا کوکتل فاژی) اثر باکتری کشی قوی علیه اکثر سویه های بسیار مقاوم باکتری سودوموناس آئروجینوزا داشتند می توانند کاندیداهای مناسبی برای استفاده در فاژدرمانی بر علیه این عفونت ها باشند.کلید واژگان: باکتریوفاژ, فاژدرمانی, سودوموناس آئروجینوزا, مقاومت آنتی بیوتیکی, سیستوویریده, لویویریدهIntroductionPhagetherapy is the therapeutic use of bacteriophages to treat pathogenic bacterial infections as alternative to antibiotics for treatment of resistant bacteria. The aims of this study were to isolate, identify and evaluate effective bacteriophages active against antibiotic resistant strains of Pseudomonas aeruginosa.Materials and MethodsDifferent Pseudomonas aeruginosa strains isolated from clinical specimens during 9 months (July 2013 to March 2014) in three Isfahan hospitals (AlZahra, Omid and Shahid Beheshti hospitals) and Kirby Bauer's disc diffusion method was used for determination of resistance profiles of these isolates using different antibiotics including Amikacin, Imipenem, Meropenem, Ciprofloxacin, Ceftazidime, Cefepime, Cefotaxime, Piperacillin-tazobactam. The resistant strains to all tested antibiotics were selected for finding their specific bacteriophages from waste water and
hospital sewage. Presence of phage investigated by plaque formation and after enrichment and stained of samples, TEM microscope was used for determination of phage morphology and size.
Findings: Among 81 Pseudomonas aeruginosa isolates, 38 isolates (47%) were resistant to all tested antibiotics and plaque due to phages was detected against 32 (84%) among these 38 isolates. Two phages belong to Cystoviridae and Leviviridae identified using TEM microscope.
Discussion &ConclusionsIt seems that the mixture of two phages (cocktails phages) that has high bactericidal effect against resistant strains of Pseudomonas aeruginosa can be good candidates for use in phagetherapy.Keywords: Bacteriophage, Phagetherapy, Pseudomonas aeruginosa, Antibiotic resistance, Cystoviridae, Leviviridae -
مقدمهبتالاکتامازهای طیف وسیع(ESBL) باعث مقاومت برخی از باکتری ها به طیف وسیعی از آنتی بیوتیک های بتالاکتام می شوند. هدف از مطالعه حاضر بررسی مقاومت آنتی بیوتیکی جدایه های بالینی سودوموناس آئروجینوزا در مشهد و ردیابی ESBL تیپ CTX-M در میان آن ها بود.مواد و روش هادر این تحقیق باکتری های سودوموناس آئروجینوزا از نمونه های مختلف(زخم، ادرار، گوش، ریه، مایع صفاق و سایر مایعات بدن) بیماران بستری در شهر مشهد و سال 1392 جمع آوری شدند. سنجش حساسیت آنتی بیوتیکی با روش انتشار در آگار بر اساس استانداردهای کربای بایر انجام شد و فراوانی سویه های مولد ESBL با روش دیسک ترکیبی بررسی گردید. بعد از استخراج DNA پلاسمیدی حضور ژن blaCTX-M با روش واکنش زنجیره پلیم راز و با استفاده از پرایمر اختصاصی ردیابی شد.
یافته های پژوهش: تمامی باکتری های جدا شده مقاوم به سفتیزوکسیم، سفوکسیتین و اکساسیلین بودند. مقاومت به سیپروفلوکساسین، جنتامایسین، ایمی پنم، پیپراسیلین و کوتریموکسازول به ترتیب 45/31 درصد، 48/44 درصد، 45/31 درصد، 43/75 درصد و 98/44 درصد بود. درصد زیادی از جدایه های مولد ESBL در مقایسه با انواع غیر مولد ESBL، نسبت به کوتریموکسازول، جنتامایسین و پیپراسیلین مقاوم بودند که اختلاف برای جنتامایسین معنی دار بود. از 64 باکتری جدا شده 8 جدایه(12/5 درصد) مولد بتالاکتاماز طیف وسیع بودند و هیچ کدام از آن ها بتالاکتاماز نوع CTX-M نداشتند.بحث و نتیجه گیرینتایج تحقیق نشان داد که اگر چه مقاومت جدایه های بالینی سودوموناس آئروجینوزا نسبت به آنتی بیوتیک های بتالاکتام در جامعه مورد بررسی زیاد است، اما این مقاومت ناشی از شیوع ژن blaCTX-M در میان جدایه ها نبود و مقاومت آنتی بیوتیکی می تواند به انواع دیگری از بتالاکتامازها وابسته باشد.
کلید واژگان: مقاومت آنتی بیوتیکی, سودوموناس آئروجینوزا, بتالاکتاماز طیف وسیع, تیپ CTX, MIntroductionExtended-spectrum beta-lactamases (ESBLs) make some bacteria resistance to broad spectrum beta-lactam antibiotics. The aim of the present study was to evaluate the antibiotic resistance of clinical isolates of Pseudomonas aeruginosa in Mashhad and to detect CTX-M type extended-spectrum beta-lactamase among them.Materials And MethodsClinical isolates of P. aeruginosa were collected from different samples (wound, urine, ear, lung, peritoneal fluid and other body fluids) of hospitalized patients in Mashhad in 2013. The antibiotic susceptibility was examined by disc diffusion method and Kirby-Bauer standards. The frequency of ESBL producing strains was determined via the combined disk method. After DNA extraction, the existence of blaCTX-M gene was detected by polymerase chain reaction (PCR) using specific primers.FindingsAll isolates were resistance to ceftizoxime, cefoxitin and oxacillin. Resistance to ciprofloxacin, gentamicin, imipenem, piperacillin and co- trimoxazole was 45.31%, 48.44%, 45.31%, 43.75 and 98.44%, respectively. A large percentage of ESBL-producing isolates compared with ESBL-non producers were resistant to co-trimoxazole, gentamicin, and piperacillin and the difference for gentamicin was significant. Out of 64 clinical isolated bacteria, 8 (12.5%) isolates were beta- lactamase producers and none of them were positive for blaCTX-M type ESBL. Discussion andConclusionsResults of this study showed that however resistance of clinical isolates of P. aeruginosa to beta-lactam antibiotics was high in our community, but this resistance was not related to prevalence of blaCTX-M gene among isolated strains. Antibiotic resistance among these isolates could be associated with other types of beta-lactamases.Keywords: Antibiotic resistance, Pseudomonas aeruginosa, Extended spectrum beta, lactamase, CTX, M type -
زمینه و هدفمتالوبتالاکتامازهای وابسته به روی طیف وسیعی از داروهای بتالاکتام، بخصوص کارباپنم ها را غیر فعال می کنند. یکی از علل مقاومت آنتی بیوتیکی در باکتری سودوموناس آئروجینوزا تولید این آنزیم هاست. هدف از انجام این تحقیق، جداسازی و شناسایی بیوشیمیایی و مولکولی باکتری های سودوموناس آئروجینوزا در مشهد و مقایسه ی الگوی مقاومت آنتی بیوتیکی ایزوله های مولد متالوبتالاکتاماز و فاقد بتالاکتاماز در میان آن ها بود.مواد و روش کاردر این تحقیق 64 باکتری سودوموناس آئروجینوزا از نمونه های مختلف بیماران بستری در مشهد جدا و شناسایی شدند. شناسایی تاییدی باکتری ها با استفاده از واکنش زنجیره پلیمراز و پرایمر اختصاصی 16S rRNA انجام گرفت. باکتری های مولد متالوبتالاکتاماز با استفاده از دیسک ایمی پنم در مجاورت دیسک حاوی ایمی پنم و EDTA شناسایی شدند و آزمایش حساسیت آنتی بیوتیکی با روش انتشار در آگار متد کربای بایر انجام شد.یافته هااز میان 64 باکتری جدا شده، 22 ایزوله (34/38%) مولد متالوبتالاکتاماز بودند که 81/8% آنها مقاوم به ایمی پنم بودند. مقاومت نسبت به آنتی بیوتیک های مروپنم، ایمی پنم، کاربنی سیلین و سفتازیدیم بطور معنی داری در میان باکتری های مولد متالوبتالاکتاماز بیشتر از انواع فاقد متالوبتالاکتاماز بود (p < 0.05).نتیجه گیریبررسی حاضر نشان دهنده بالا بودن باکتری های مولد متالوبتالاکتاماز در ناحیه مورد بررسی و افزایش مقاومت به ایمی پنم در میان آن هاست. بنظر می رسد شیوع این باکتری ها در کشورمان رو به افزایش است که این امر ضرورت تدابیر بیشتر برای مدیریت تجویز آنتی بیوتیک و کنترل مقاومت را ایجاب می نماید.
کلید واژگان: سودوموناس آئروجینوزا, متالوبتالاکتاماز, مقاومت آنتی بیوتیکی, S rRNA16Background and ObjectivesZinc-dependent beta-lactamases inactivate a wide range of beta-lactam drugs, especially the carbapenem. One of the causes of antibiotic resistance in Pseudomonas aeruginosa is production of these enzymes. The aim of the present study was to identify clinical isolates of P. aeruginosa in Mashhad based on biochemical and molecular methods and to compare the antibiotic resistance pattern between methallo-beta-lactamase (MBL)-producing isolates and nonproducers.Material and MethodsIn this study, 64 clinical isolates of P. aeruginosa were collected and identified from various samples of patients in 2012. Confirmatory identification of bacteria was performed using polymerase chain reaction and specific 16S rRNA primers. MBL-producers were identified by using imipenem disk adjacent to a disk containing imipenem and EDTA. Antibiotic susceptibility assay was performed by agar diffusion method based on standard Kirby-Bauer method.ResultsOut of 64 bacterial isolates, 22 (34.38%) were MBLproducers which 81.8% were resistance to imipenem. Among MBL-producers, resistance to meropenem, imipenem, ceftazidime, and carbenicillin were significantly higher than non- MBL-producing bacteria (p < 0.05).ConclusionsThis study shows the high number of MBLproducing Pseudomonas aeruginosa in studied community and increased resistance to imipenem among them. It appears the prevalence of MBL-producing strains to be increasing in our country which emphasize the need for further strategies on antibiotic prescribing management and control of antibiotic resistance.Keywords: Pseudomonas aeruginosa, Methallo, beta, lactamase, Antibiotic resistance, 16S rRNA -
پیش زمینه و هدفسودوموناس ائروجینوزا یک باکتری فرصت طلب است که به صورت ذاتی به مواد ضد میکروبی مختلف مقاوم می باشد. یکی از علل مقاومت بیان پمپ های تخلیه مقاومت به چند دارو نظیر MexAB-OprM می باشد. آنالیز بیان ژن های کد کننده اجزای پمپ MexAB-OprM نظیر mexA با روش RT-PCR مخصوصا با یک کیت تجارتی می تواند کمک زبادی در انتخاب درمان مناسب آنتی بیوتیکی بنماید. بنابراین هدف این تحقیق مطالعه بیان ژن های کد کننده اجزای پمپ MexAB-OprM نظیر mexA و oprM با روش RT-PCR در ایزوله های بالینی بود.روش بررسیپس از استخراج RNA از 17 ایزوله بالینی و ساختن cDNA بیان کمی نسبی ژن های mexA و oprM با روش RT-PCR به ترتیب با استفاده از کیت تجارتی و بدون آن تعیین شد.یافته هاافزایش بیان هر دو ژن mexA و oprM که به ترتیب با استفاده از کیت و بدون آن تعیین شده بود در هشت ایزوله بالینی مشاهده شد. این افزایش بیان مطابق با افزایش MIC 4-2 برابری برای کربنی سیلین بود.نتیجه گیریهمگرایی میان نتایج حاصل از استفاده و عدم استفاده از کیت یافت شد. بعلاوه همگرایی فقط بین MIC کربنی سیلین از میان آنتی بیوتیک های استفاده شده در روش فنوتیپی و بیان پمپ MexAB-OprM در تمام ایزوله های بالینی یافت شد. بنابراین استفاده از روش فنوتیپی و آنالیز بیان ژن با روش RT-PCR با استفاده از کیت به علت سهولت کار با آن به صورت همزمان توصیه می گردد.
کلید واژگان: سودوموناس ائروجینوزا, پمپ MexAB, OprM, پمپ های چند کاره تخلیه دارو, RT, PCRBackground and AimsPseudomonas aeruginosa is an opportunistic bacterium that is intrinsically resistant to different antimicrobial substances. One reason for this resistance is the expression of multiple drug efflux pumps, such as MexAB-OprM. Analysis of expression of the MexAB–OprM pump such as mexA with RT-PCR especially with commercial kit can largely aid in selection of suitable antibiotic treatment. Thus, the aim of this investigation was to study the expression of mexA and oprM genes using RT-PCR in clinical isolates.Materials and MethodsFollowing the extraction of RNA from 17 clinical isolates and synthesis of cDNA, the relative quantification of mexA and oprM genes were determined by RT- PCR with and without commercial kit, respectively.ResultsOver-expression of both mexA and oprM genes were seen in eight clinical isolates. This over-expression corresponded to 2-4 fold increase in MIC for carbenicillin..ConclusionThe convergence between results obtained from using and not using the kit. Moreover, the convergence between only MIC for carbenicillin among several antibiotics used in phenotypic method and the expression of MexAB-OprM pump was found in all clinical isolates. Therefore, the application of phenotypic method and analysis of gene expression using RT- PCR with commercial kit, due to its ease of working, simultaneously is recommended.Keywords: Pseudomonas aeruginosa, MexAB, OprM, Multidrug efflux pumps, RT, PCR -
مقدمه
عفونت مجاری ادراری (Urinary tract infection) شایع ترین نوع عفونت بیمارستانی می باشد. Pseudomonas aeruginosa از علل مهم ایجاد عفونت های بیمارستانی است و مقاومت آنتی بیوتیکی در آن می تواند درمان بیماران را با مشکل مواجه نماید. این مطالعه با هدف بررسی فراوانی P. aeruginosa ایجاد کننده ی عفونت مجاری ادراری در بیماران سوندگذاری شده، تعیین میزان مقاومت آنتی بیوتیکی و مشخص نمودن الگوی ژنومی این باکتری انجام شد.
روش هانمونه های ادراری با استفاده از سرنگ استریل از سوند افراد سوندگذاری شده از 2 بیمارستان در تهران در یک مطالعه ی مقطعی از آذر 1386 تا مرداد 1387 جمع آوری گردید. سپس نمونه ها با روش لوپ استاندارد کشت داده شدند و در صورت وجود CFU/ml 105 باکتری، کشت مثبت در نظر گرفته شد. تشخیص باکتری ها با استفاده از روش های بیوشیمیایی انجام گرفت و با استفاده از دستورالعمل (Clinical and laboratory standards institute) CLSI مقاومت سویه ها نسبت به آنتی بیوتیک های مختلف تعیین شد. در مرحله ی بعد، سویه ها از لحاظ ژنتیکی با استفاده از روش PFGE (Pulsed- field gel electrophoresis) مورد مطالعه قرار گرفتند.
یافته هادر این مطالعه، 116 نمونه به لحاظ کشت باکتریایی مثبت بودند. سودوموناس آئروجینوزا 3/10 درصد نمونه ها را شامل شد. از لحاظ مقاومت آنتی بیوتیکی، بیشترین مقاومت نسبت به کاربنی سیلین (100 درصد)، سفوتوکسیم (75 درصد) و کوتریموکسازول (7/66 درصد) مشاهده شد. به لحاظ ژنوتیپی سویه ها در هفت تایپ قرار گرفتند.
نتیجه گیریاین بررسی مشخص نمود که سویه های جدا شده نسبت به طیف وسیعی از آنتی بیوتیک ها حساسیت داشتند. همچنین سویه های مشترک درون بیمارستانی و بین بیمارستانی، منجر به ایجاد عفونت مجاری ادراری در افراد بستری شده اند.
کلید واژگان: عفونت مجاری ادراری, سوندگذاری, سودوموناس آئروجینوزا, Pulsed, field gel electrophoresisBackgroundUrinary tract infection is the most common nosocomial infection worldwide. Microorganisms causing urinary tract infections are resistant to most of the antibiotics. Pseudomonas aeruginosa (P. aeruginosa) is one of the major causes of nosocomial infections and its antibiotic resistance leads to medical implications associated with urinary tract infections. The aim of this study was to assess the prevalence of P. aeruginosa strains to identify their in-vitro susceptibility to antimicrobial agents and to determine genetic diversity of them.
MethodsUrine samples were obtained from catheterized patients in Shohada and Labafi Nejad hospitals, Tehran, Iran, and cultured by standard loop method. The cultures with more than 105 CFU/ml were assumed as positive. After identification of bacterial species by biochemical tests, susceptibility of each isolate was assessed by disk diffusion method according to Clinical and Laboratory Standards Institute (CLSI) guidelines. In order to analyze bacterial genotypic diversity, pulsed-field gel electrophoresis (PFGE) was performed.
Findings116 out of 163 urine samples were positive for bacterial isolates. Pseudomonas species were placed in third step of the most frequent isolates. Antibiotic sensitivity was observed against most of antimicrobial agents. Some of strains were genetically similar.
ConclusionThis study revealed that isolated strains were sensitive to wide range of antibiotic agents. In addition, common type strains were responsible of causing inter- and intra-hospital urinary tract infections in catheterized patients.
Keywords: Urinary tract infection, Catheterization, Pseudomonas aeruginosa, Pulsed, field gel electrophoresis (PFGE) -
مقدمه
سودوموناس آئروجینوزا به عنوان یکی از عوامل مهم عفونت های بیمارستانی، به خصوص در بخش مراقبت های ویژه، مطرح می باشد. افزایش روز افزون مقاومت آنتی بیوتیکی سودوموناس آئروجینوزا در مواردی موجب سپتی سمی و مرگ و میر بیماران می شود. استفاده ی نامناسب و طولانی مدت از آنتی بیوتیک ها در بخش های مختلف بیمارستان منجر به ظهور سوش های مقاوم به چند دارو (Multidrug resistance یا MDR) و سوش های مقاوم به همه ی داروها (Pandrug resistance یا PDR) شده است. این مطالعه به منظور تعیین الگوی مقاومت دارویی سوش های دارای نقش در ایجاد عفونت در بیماران بستری شده در بخش مراقبت های ویژه (Intensive care unit یا ICU) بیمارستان الزهرای (س) اصفهان، صورت پذیرفت.
روش هاابتدا، 66 ایزوله از سودوموناس آئروجینوزا از نمونه های مختلف بالینی از بخش ICU بیمارستان الزهرای (س) شهر اصفهان جدا سازی گردید. سپس، الگوی مقاومت به آنتی بیوتیک سویه های سودوموناس آئروجینوزا نسبت به آنتی بیوتیک های ایمی پنم، مروپنم، آمیکاسین، جنتامایسین، سیپروفلوکساسین، لووفلوکساسین، آزترئونام، سفپیم، پیپراسیلین، پیپراسیلین/تازوباکتام و سفتازیدیم به روش Disk diffusion و با روش استاندارد Kirby-Bauer تعیین گردید.
یافته هااز 66 ایزوله ی جدا شده، 51 ایزوله (2/77 درصد) از سوش MDR و 33 ایزوله (50 درصد) از سوش PDR بود. به ترتیب، 8/75 و 7/72 درصد از ایزوله ها به سفتازیدیم و پیپراسیلین مقاوم بودند و بیشترین مقاومت سودوموناس به این دو آنتی بیوتیک تعیین گردید. در مقابل، کمترین درصد مقاومت این باکتری به آمیکاسین و برابر 50 درصد بود.
نتیجه گیریاین مطالعه نشان داد که استفاده ی بیش از حد و نادرست از آنتی بیوتیک ها در مراکز درمانی باعث افزایش مقاومت دارویی و ایجاد سویه های MDR و PDR سودوموناس آئروجینوزا می گردد. تعیین الگوی مقاومت دارویی می تواند در انتخاب داروی مناسب جهت درمان بیماران مورد استفاده قرار گیرد.
کلید واژگان: سودوموناس آئروجینوزا, مقاومت دارویی, مقاوم به چند دارو (Multidrug resistance), مقاوم به همه ی داروها (Pandrug resistance)BackgroundPseudomonas aeroginosa (P. aeroginosa) is one of the most important causes of hospital infections، especially in the intensive care unit (ICU). Increasing antibiotic-resistance of P. aeroginosa cause a lot of problems for patients and in some cases، lead to septicemia and death. The most important antibiotics used in the treatment of P. aeruginosa infection are ceftazidime، ciprofloxacin، imipenem and piperacillin mainly used in hospitals. Unsuitable and prolonged use of antibiotics has led to the emergence of multidrug (MDR) and pandrug resistant (PDR) strains. In fact، infections with MDR and PDR strains often result in increased cost of treatment، lengthy stay، and overall morbidity and mortality. This study aimed to determine the pattern of drug resistance in P. aeruginosa infection in ICU of Al-Zahra hospital (Isfahan، Iran).
Methods66 isolates of P. aeruginosa from different clinical specimens from ICU wards of Al-Zahra hospital were isolated. Antibacterial susceptibility test for imipenem، meropenem، amikacin، gentamicin، ciprofloxacin، levofloxacin، aztreonam، cefepime، piperacillin، piperacillin/tazobactam and ceftazidime was performed using disk diffusion (Kirby-Bauer) method.
FindingsOf 66 separated isolates، 51 (77. 2%) were of MDR and 33 (50%) were of PDR strain. 75. 8% were resistant to ceftazidime and 72. 7% to piperacillin. In fact، most of isolates were resistant to both antibiotics.
ConclusionThis study shows that overuse and misuse of antibiotics in hospitals has increased drug resistance and creation of the PDR and MDR strains. The results suggest that antibiotic resistance can be determined by choosing the appropriate drug to treat patients.
Keywords: Pesudomonas aeruginosa, Antibiotic resistance, Multidrug resistance, Pandrug resistance
- نتایج بر اساس تاریخ انتشار مرتب شده‌اند.
- کلیدواژه مورد نظر شما تنها در فیلد کلیدواژگان مقالات جستجو شده‌است. به منظور حذف نتایج غیر مرتبط، جستجو تنها در مقالات مجلاتی انجام شده که با مجله ماخذ هم موضوع هستند.
- در صورتی که می‌خواهید جستجو را در همه موضوعات و با شرایط دیگر تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مجلات مراجعه کنید.
©2000-2025 magiran.com All Rights Reserved.