به جمع مشترکان مگیران بپیوندید!

تنها با پرداخت 70 هزارتومان حق اشتراک سالانه به متن مقالات دسترسی داشته باشید و 100 مقاله را بدون هزینه دیگری دریافت کنید.

برای پرداخت حق اشتراک اگر عضو هستید وارد شوید در غیر این صورت حساب کاربری جدید ایجاد کنید

عضویت

جستجوی مقالات مرتبط با کلیدواژه « محیط کشت » در نشریات گروه « زراعت »

تکرار جستجوی کلیدواژه «محیط کشت» در نشریات گروه «کشاورزی»
  • آزاده خادم *، زهرا سرگزی مقدم، محبوبه یزدی، سیده مهدیه خرازی، احمد شریفی

    انتقال ژن با واسطه باکتری Agrobacterium tumefaciens یکی از روش های شناخته شده با هدف تولید گیاهان تراریخته است. موفقیت در این روش بستگی به نحوه رشد باکتری و باززایی ریزنمونه های گیاهی دارد. در این میان، آنتی بیوتیک ها به عنوان تنظیم کننده های رشد باکتری عمدتا اثرات بازدارندگی بر روی رشد گیاه دارند. از این رو معرفی یک روش انتقال ژن موفق با واسطه آگروباکتریوم نیازمند شناسایی آنتی بیوتیک دارای اثر بازدارندگی رشد بر باکتری و نیز کمترین تاثیر بر باززایی ریزنمونه های گیاهی و رشد گیاهان تراریخته است. در این راستا این پژوهش با هدف بهینه سازی آنتی بیوتیک مورد استفاده در هم کشتی به منظور افزایش بازده تراریختی گیاه اطلسی (Petunia hybrida) انجام شد. بدین منظور ابتدا میزان رشد باکتری A. tumefaciens در محیط کشت های مختلف دارای دو pH مناسب برای رشد گیاه (7/5) و رشد باکتری (7) در حضور غلظت 500 میلی گرم در لیتر آنتی بیوتیک سفوتاکسیم به عنوان آنتی بیوتیک رایج به منظور کنترل رشد باکتری مورد بررسی قرار گرفت. نتایج حساسیت سنجی باکتری نشان داد که نوع و غلظت نمک و pH محیط کشت بطور معنی داری بر میزان رشد باکتری تاثیرگذار است، بطوری که بیشترین میزان رشد باکتری در محیط کشت های LB و MH در pH= 7 مشاهده شده اما بر خلاف آن هیچ گونه رشدی در محیط کشت MS مشاهده نشد. علاوه بر آن، دو آنتی بیوتیک سفوتاکسیم و سفتریاکسون در غلظت 700 میلی گرم در لیتر دارای بیشترین اثر بازدارندگی بر رشد باکتری بودند. آزمایش دوم به منظور بررسی اثر آنتی بیوتیک بر روی باززایی ریزنمونه های برگ گیاه اطلسی انجام شد. نتایج این آزمایش نشان داد که آنتی بیوتیک های مختلف اثرات متفاوتی بر باززایی ریزنمونه ها و رشد گیاهچه حاصل از آنها دارند. طبق این نتایج بیشترین حجم کالوس و درصد باززایی در حضور آنتی بیوتیک های سفتیزوکسیم و کوآموکسی کلاو در هر سه غلظت و سفپیم در غلظت 300 میلی گرم در لیتر مشاهده گردید. بیشترین تعداد گیاهچه نیز در تیمار سفتیزوکسیم در غلظت های 300 و 500 میلی گرم در لیتر با میانگین 70/7 گیاهچه بود. در ارتباط با صفات رشدی گیاهچه، بیشترین تعداد و طول ریشه در هر گیاهچه به ترتیب در تیمار سفتیزوکسیم در غلظت 300 میلی گرم در لیتر و سفوتاکسیم در همین غلظت مشاهده شد. بیشترین وزن خشک متعلق به گیاهچه های رشدیافته در حضور آنتی بیوتیک کوآموکسی کلاو و پس از آن آنتی بیوتیک سفتیزوکسیم (mg/l 300) بود. مجموع نتایج این آزمایش ها نشان می دهد گیاهچه های رشد یافته در حضور آنتی بیوتیک سفتیزوکسیم از رشد مناسبی برخوردار بودند در حالیکه استفاده از این آنتی بیوتیک در بازدارندگی رشد A.tumefaciens موثر بود. از این رو کاربرد آنتی بیوتیک سفتیزوکسیم در فرآیند هم کشتی در افزایش بازدهی انتقال ژن موثر خواهد بود.

    کلید واژگان: رشد باکتری, رشد گیاهچه, سفوتاکسیم, سفتی زوکسیم, محیط کشت}
    Azadeh Khadem *, zahra sargazi moghaddam, Mahboobeh yazdi, Mahdiyeh Kharrazi, Ahmad Sharifi
    Introduction

    Gene transfer by the Agrobacterium tumefaciens is one of the well-known methods for the production of the transgenic plants. The success rate of this method depends on the growth of the bacteria and the regeneration of the plant explants. Among these variables, the antibiotics functioning as bacterial growth regulators have mainly inhibitory effects on the plant growth. Therefore, the introduction of a successful gene transfer method which is mediated by Agrobacterium requires the identification of an antibiotic with an inhibitory effect on the growth of the bacteria and also has a minimal effect on the regeneration of the explants and the growth of the transgenic plants. In this regard, the present research was conducted with the aim of optimizing the antibiotic used in co-culture in order to increase the transgenic yield of Petunia hybrida. For this purpose, a variety of antibiotics in different concentrations were tested.

    Materials and Methods

    The growth rate of A. tumefaciens in the different medium culture with two suitable pH for the bacterial growth (7) and plant growth (5.7) in the presence of 500 mg/L of the cefotaxime antibiotic as a common antibiotic for controlling bacterial growth was investigated. Sensitivity tests were run. The second experiment was conducted to investigate the effect of five different antibiotics in three concentration on the regeneration of the petunia leaf explants.

    Results and Discussion

    The results of the bacterial sensitivity test showed that the type and concentration of salt and the pH of the medium culture significantly affect the growth rate of the bacteria. So that the highest rate of bacterial growth was observed in LB and MH medium culture at pH=7, but on the contrary, no growth was observed in MS medium culture. In addition, two antibiotics of cefotaxime and ceftriaxone at 700 mg/L concentration had the highest inhibitory effect on the bacterial growth. The results of this experiment showed that different antibiotics have different effects on the regeneration of explants and the growth of the seedlings. According to the results, the highest volume of callus and also the highest percentage of regeneration were observed in the presence of ceftizoxime and coamoxiclav antibiotics in all three concentrations and cefepime at 300 mg/L. The highest number of the seedlings was also observed in the treatment of ceftizoxime at concentrations of 300 and 500 mg/L with an average of 7.70 seedlings. In relation to the seedling growth traits, the highest number and length of root per seedling were observed in ceftizoxime at 300 mg/l and cefotaxime at the same concentration, respectively. The highest dry weight belonged to the grown seedlings in the presence of co-amoxiclav antibiotic followed by the ceftizoxime (300 mg/L).

    Conclusion

     The overall results of these experiments show that the seedlings which are grown in the presence of ceftizoxime antibiotic had a good growth rate, while the use of this antibiotic was effective in inhibiting the growth of A. tumefaciens. Therefore, we recommend that the use of ceftizoxime antibiotic in the co-culture process will be effective in increasing the efficiency of the gene transfer. Further studies will solidify these results.

    Keywords: Cefotaxime, Ceftizoxime, Medium culture, pH, Seedling growth}
  • حمیدرضا شهابیان، حسن علیزاده*، مصطفی اویسی

    به منظور بررسی تاثیر برخی علفکش ها با دزهای مختلف در کشت مستقیم و مقایسه آن یا کشت نشایی این آزمایش در قالب کرت های خرد شده بر پایه بلوک های کامل تصادفی در سه تکرار در مازندران در بهار سال 1398 انجام شد .کرت های اصلی شامل کشت غرقابی و مستقیم برنج و کرت های فرعی شامل علف کش کانسیل با دزهای (150, 120, 90 , 60 , 30) علفکش نومینی با دزهای (250 , 200 ,150 , 100 , 50) کلین وید با دز 65 ؛ پرتیلاکلر + بن سولفورون متیل ؛ کلومازون + پندیمتالین ؛ کلومازون ، شاهد آلوده به علف هرز و شاهد بدون علف هرز بودند . نتایج نشان داد در شرایط آلوده به علف هرز بین دو روش کشت تفاوت معنی داری از لحاظ عملکرد شلتوک در سطح یک درصد وجود داشت به طوریکه در کشت غرقابی عملکرد 6/355 و در کشت مستقیم عملکرد 1/185 کیلو گرم در متر مربع را شاهد بودیم. در کشت مستقیم در علفکش کانسیل با دز 120 و150 گرم در هکتار عملکرد (5/546 ,2/492) و علفکش نومینی با دز 200 و 250 سی سی درهکتار عملکرد (3/539 ,5/412) و کلین وید 65 سی سی در هکتار عملکرد 3/534 کیلوگرم در متر مربع حاصل شد . پیشنهاد می شود که کشت مستقیم برنج به جهت کنترل علف هرز با علف کش ها ومصرف آب کمتر و به دست آمدن عملکرد مطلوب روش خوبی برای تولید پایدار با توجه به محدود بودن منابع، خصوصا آب خواهد بود .

    کلید واژگان: عملکرد, کارآیی مصرف آب, کانسیل, محیط کشت, وزن خشک}
    HamiedReza Shahabian, Hassan Alizadeh *, Mostafa Ovesi

    In order to investigate the effect of some herbicides with different doses in direct cultivation and comparing it with transplanted cultivation, an experiment was carried out in the form of split plots based on random complete blocks in three replications in Mazandaran in the spring of 2018. The main plots include  transplanted flooded rice and direct seeded rice and sub plots include Kancil herbicide with doses (150, 120, 90, 60, 30), Nomini herbicide with doses (250, 200, 150, 100, 50), Clean Weed with 65 doses; pertilachlor + bensulfuron methyl; clomazone+pendimethalin; Clomazone, weed-infested control and weed-free control. The results showed that in weed-infested conditions, there was a significant difference in paddy yield between the two cultivation methods, so that in flooded cultivation, the yield was 355.6 and in direct cultivation, the yield was 185.1 kg per square meter. In direct cultivation, Kancil herbicide with a dose of 120 and 150 grams per hectare yields (492.5, 546) and Nomini herbicide with a dose of 200 and 250 cc per hectare (412.5, 539 3) and Clean Weed 65 cc. per hectare yield was 534.3 kg per square meter. It is suggested that direct cultivation of rice will be a good method for sustainable production in order to control weeds with herbicides and use less water and obtain optimal yield, considering the limited resources, especially water.

    Keywords: cultivation environment, dry weight, Fertilizer, Water consumption efficiency, yield}
  • مهدی عمادی اندانی*، سید کاظم صباغ، کاظم کمالی

    گیاه بادرنجبویه با نام علمی Melisa officinalis L. متعلق به خانواده نعناییان یکی از گیاهان مهم دارویی است که در طب سنتی به وفور از آن استفاده می شود. خواص دارویی این گیاه مانند خاصیت آرام بخشی و گوارشی به اثبات رسیده است. به علت اندازه بسیار کوچک بذرها همواره جوانه زنی بذر و به دنبال آن رشد اولیه گیاه تحت تاثیر قرار می گیرد. بذرهای مورد استفاده از شرکت تولیدی پاکان اصفهان خریداری و سپس با ماده کلرآمین تی 1درصد به مدت 3 دقیقه ضدعفونی سطحی شدند. از محیط کشت غذایی سیب زمینی، دکستروز، آگار برای جوانه زنی استفاده شد. اثر دو هورمون اسید جیبرلیک و سیتوکنین با غلظت های 100 و 50 میلی مولار به دو صورت تنها و ترکیبی بر روی جوانه زنی بذر در قالب یک طرح فاکتوریل کاملا تصادفی مورد بررسی قرار گرفته و بذرهای جوانه زده به گلدان منتقل و صفات شاخص بنیه، طول ریشه چه و گیاهچه و وزن خشک گیاه اندازه گیری شد. مقایسه میانگین ها نشان داد که تیمارهای استفاده شده بر روی صفت مورد آزمایش اثر معنی داری در سطح 1 درصد داشتند. بیشترین میزان تاثیر هورمون ها بر روی جوانه زنی، مربوط به ترکیب دو هورمون با غلظت 100 میلی مولار و کمترین تاثیر برای هورمون سیتوکنین با غلظت 50 میلی مولار ثبت گردید. با توجه به داده های حاصل در این تحقیق، استفاده از هورمون های گیاهی با غلظت های پایین به صورت ترکیبی در جهت تسهیل در جوانه زنی و افزایش پارامترهای رشدی توصیه می شود.

    کلید واژگان: بادرنجبویه, جوانه زنی, صفات رشدی, محیط کشت}
    Mehdi Emadi, Seyed Kazem Sabbagh *, Kazem Kamali

    Melisa officinalis L. or Lemon balm; is belonged to Lamiaceae family is one of the most importan p;ant medicinal. The therapeutics effects of Lemon balm such as, antispasmodic and digestive effects have been demonstrated. Due to low small size of seeds, seed germination and fallow it primary growth will be affected. Seed used in this research were purchased from Pakban Company, Ispahan, Iran and then were surface sterilized in 1 % chloramineT for 3 min. Potato dextrose agar (PDA) medium was used for seed germination assay. The effect of tow cytokinin and gibberllic acid hormones at concentration of 50 and 100 mM in single and combination form was investigated in a factorial based on completely randomized design. Growth seedling were cultured and growth under pot culture containing peat moss and then some characteristics including germinated seeds, vigor index, seedling dry weigh, seedling length and coleoptile length were measured. Mean comparison analysis showed all used treatments have a significant effect at the level of 1% among tested parameters. The highest effect of treatment on seed germination was related to two hormones combination at 100 mM concentration and the lowes effect was recorded in Cytikinin application at 50 mM concentration. Our observation did not show any significant different and effect of culture medium on seed germination in compared to sterile water. Based on obtained data in this research, use of plant hormones at low concentration and in combination form is suggested to seed germination improvement and increase of growth parameters.

    Keywords: Lemon balm, seed germination, Growth traits, Culture medium}
  • ماجد چعب، محمدعلی ابراهیمی، سارا قزلباش، نسیم زرین پنجه*
     مقدمه

    گیاه دم گاوی از گونه های درختچه ای ارزشمند بومی و سازگار در ماسه زارهای مناطق مرکزی ایران است که علاوه بر ایفای نقش مهم در پوشش بیابانی به منظور حفاظت خاک، چرای دام و تولید علوفه، به عنوان گیاهی دارویی نیز حایز اهمیت است. از آن جایی که جوانه زنی بذر این گیاه به دلیل داشتن پوسته ای سخت به راحتی انجام نمی گیرد، لذا در این تحقیق برای اولین بار از روش کشت بافت و استقرار بذر در محیط کشت درون شیشه ای به منظور غلبه بر مشکلات جوانه زنی گیاه دم گاوی استفاده شده است.

    مواد و روش ها

    بذرهای بدون خراش، بذرهای خراش داده شده و جنین بذر گیاه دم گاوی به عنوان ریزنمونه های مختلف، پس از تیمار گندزدایی سطحی در دو نوع محیط کشت (MS و MS به همراه مخلوطی از اسیدهای آمینه) و همچنین در دو نوع تیمار نوری (16 ساعت روشنایی و 8 ساعت تاریکی و دیگری 24 ساعت تاریکی مطلق)، به صورت آزمایش فاکتوریل در قالب طرح پایه کاملا تصادفی در شش تکرار مورد بررسی قرار گرفتند. در نهایت درصد جوانه زنی (10 روز پس از کشت بذر) و طول نوساقه رشد یافته (30 روز پس از جوانه زنی بذر) اندازه گیری شدند.

    یافته ها

    نتایج به دست آمده مبین معنی دار بودن تاثیر تیمارهای مورد بررسی روی برخی صفات جوانه زنی درون شیشه ای بود. مشخص شد که کاشت جنین بذر در محیط کشت MS به همراه ترکیبی از اسید های آمینه در دوره نوری 16 ساعت روشنایی و 8 ساعت تاریکی، بهترین تیمار از نظر درصد جوانه زنی بذرها (83/78%) و طول نوساقه جوانه زده (83/44 میلی متر) می باشد.

    نتیجه گیری

     از روش کشت درون شیشه ای می توان جهت بهبود جوانه زنی و تولید پایه های بذری این گیاه استفاده نمود.

    کلید واژگان: جنین بذر, دم گاوی, دوره نوری, کشت بافت, محیط کشت}
    Majed Chaab, MohammadAli Ebrahimi, Sara Ghezelbash, Nasim Zarinpanjeh*
    Introduction

    Cow tail (Smirnovia iranica) is considered a valuable shrub species indigenous and adapted to the sandy lands of the Iranian central regions which besides playing an essential role in the desert cover for soil protection and of forage production, is considered important due to its great medicinal values. Considering the fact that seed germination of this plant does not easily occur due to its hard and solid seed coat, in this study, the in vitro tissue culture and seedling establishment is utilized for the first time in order to surmount the obstacles laid ahead of cow tail seed germination.

    Materials and Methods

    Scratched seed, unscratched seed and seed embryo of cow tail as different explants were placed in two culture media (MS, MS with free amino acids complex) following surface sterilization, and were exposed to two photoperiod treatments (16 hours of light and 8 hours of darkness as well as absolute darkness) and were investigated in a factorial experiment based on completely randomized design with six replications. Finally, germination percentage (10 days after seed culturing) and shoot length (30 days after seed germination) were evaluated.

    Results

    The results indicated that significance of the effect of investigated treatment conducted over some in vitro on germination characteristics. It was revealed that the cultivation of seed embryo in MS culture media along with free amino acids complex for 16 hours of light and 8 hours of darkness photo period can be considered as the best in vitro germination method, in terms of seed germination percentage (78.83%) and germinated shoot length (44.83 mm).

    Conclusion

    In vitro culture can be used to improve germination and seeding production of this species.

    Keywords: Cow tail, Culture medium, Photoperiod, Seed embryo, Tissue culture}
  • فاطمه احمدلو*، عباس قمری زارع، محسن کلاگری، آزاده صالحی، مهدیه صالحی وژده نظری

    تحقیق حاضر با هدف استفاده از توانمندی ارقام پر محصول معرفی شده برای تولید دورگ های جدید و ارزیابی صفات مورفولوژیک و آناتومیک نهال های دورگ بین گونه ای P. nigra و P. deltoides انجام شد. در پروژه حاضر از پایه های نر و ماده کلن های برتر صنوبر نیگرا و دلتوییدس که به لحاظ عملکرد تولید چوب و کیفیت تنه مناسب، عملکرد مناسبی داشته و به بخش اجرا معرفی شده اند، استفاده شد. در زمستان 97 جوانه های حامل گل از شاخه های گلدار پایه ماده به طول حدود 60 الی 100 سانتی متر از شاخه های انتهایی درخت جدا و در گلدان های 20 لیتری حاوی مخلوط خاک، ماسه و کود دامی کاشته شدند. برای تهیه دانه گرده، تعداد کافی از شاخه های گل دار از شاخه درخت نر هر یک از گونه های P. nigra و P. deltoides جدا و در داخل ظرف آب قرار داده شده و با باز شدن شاتون های گل نر، گرده ها جمع آوری شدند. عمل گرده افشانی به وسیله قلموی آغشته به گرده به صورت گرد و غبار انجام شد. پس از رسیدگی کامل کپسول ها، خوشه ها (کاتکین) جمع آوری شده و تمامی کپسول های دورگ و آزاد گرده افشان سترون شده، به صورت شکاف داده شده در شرایط محیط کشتMS  ½ فاقد هورمون، کشت شدند. گیاهچه های تولیدشده در اندازه بلندتر از 1 تا 2 سانتی متری به جی فی پات با مخلوطی از پرلیت و پیت ماس و ماسه منتقل و در گلخانه نگهداری شدند و مشخصه های درصد آلودگی و ارتفاع گیاهچه های درون شیشه و تعداد گیاهچه های منتقل شده به جی فی پات یادداشت شد. پس از سازگاری تدریجی، نهال های دورگ به گلدان های بزرگ انتقال یافتند و پس از دو سال بر اساس صفات کمی مانند ارتفاع، قطر یقه، شاخه و مشخصه های کمی و آناتومی برگ مورد ارزیابی قرار گرفتند. نتایج نشان داد که بیش ترین ارتفاع شاتون، تعداد و وزن کپسول در تلاقی آزادگرده افشان وجود داشت. تعداد 28 نتاج از تلاقی های مختلف صنوبر به دست آمد. بیش ترین ارتفاع ساقه در تلاقی هایPD♀xPS♂ (P. deltoides Marquette x P. deltoides Samsun) و PD♀xPB♂ (P. deltoides Marquette x P. nigra betulifolia 17/13) و بیش ترین زاویه شاخه، سطح برگ و سطح ویژه برگ در تلاقی آزادگرده افشان PD♀ (P. deltoides Marquette) مشاهده شد.

    کلید واژگان: دورگ گیری, صنوبر, کپسول, محیط کشت, نهال, وراثت پذیری}
    Fatemeh Ahmadloo *, Abbas Ghamari Zare, Mohsen Calagari, Azadeh Salehi, Mahdiyeh Salehi Vajdeh Nazari

    The aim of this study was to use the potential of productive cultivars to produce new hybrids and to evaluate the morphological and anatomical traits of hybrid seedlings between P. nigra and P. deltoides. In the present project, the male and female bases of the superior clones of Populus nigra and Populus deltoides were used, which had a high performance in terms of wood production and proper trunk quality, and were introduced to the implementation department. In winter 2018, the flowering branches of the base material with flower-bearing buds about 60–100 cm in length were collected from the end branches of the tree and planted in 20 litre plastic pots consisting of mixture of soil, sand and well-rotted cattle manure. To prepare pollen grains, a sufficient number of flowering branches were separated from the male branches of each of P. nigra and P. deltoides species and placed in a container of water and the pollen was collected by opening the male flower catkins. Pollination was achieved by lightly dusting the receptive flowers with a camel-hair brush. Catkins were collected from the branches when capsules mature and all of sterilized hybrid and open pollination capsules were cultured on Half-MS medium without hormone in the form of splitting. Produced plantlets taller than 1 to 2 cm in size were transferred to jiffypots with a mixture of sterilized perlite and peat moss and sand and kept in greenhouse and the characteristics of the percentage of contamination, height of plantlets and the number of plantlets transferred to jiffypots were recorded. The hybrid seedlings were transferred to large pots after gradual adaptation, and then they were evaluated based on quantitative traits such as height, collar diameter, branch and quantitative characteristics and anatomy of leaves after two years. The results showed that the highest catkins height, number and weight of capsules were in open pollinated cross. A total of 28 progeny were obtained from Populus different crossings. The highest stem height in crosses of PD♀xPS♂ (P. deltoides Marquette x P. deltoides Samsun) and PD♀xPB♂ (P. deltoides Marquette x P. nigra betulifolia 17/13), the maximum branch angle, leaf area and specific leaf area in open pollinated cross of PD♀ (P. deltoides Marquette) was observed.

    Keywords: Capsule, Culture medium, Heritability, Hybridization, Populus, seedling}
  • فاطمه احمدلو*، عباس قمری زارع، محسن کلاگری، آزاده صالحی، مهدیه صالحی وژده نظری

    تحقیق حاضر با هدف استفاده از توانمندی ارقام پر محصول معرفی شده برای تولید دورگ های جدید و ارزیابی صفات مورفولوژیک و آناتومیک نهال های دورگ بین گونه ای P. nigra و P. deltoides انجام شد. در پروژه حاضر از پایه های نر و ماده کلن های برتر صنوبر نیگرا و دلتوییدس که به لحاظ عملکرد تولید چوب و کیفیت تنه مناسبT عملکرد مناسبی داشته و به بخش اجرا معرفی شده اند، استفاده شد. در زمستان 97 جوانه های حامل گل از شاخه های گلدار پایه ماده به طول حدود 60 الی 100 سانتی متر از شاخه های انتهایی درخت جدا و در گلدان های 20 لیتری حاوی مخلوط خاک، ماسه و کود دامی کاشته شدند. برای تهیه دانه گرده، تعداد کافی از شاخه های گل دار از شاخه درخت نر هر یک از گونه های P. nigra و P. Deltoids جدا و در داخل ظرف آب قرار داده شده و با بازشدن شاتون های گل نر، گرده ها جمع آوری شدند. عمل گرده افشانی به وسیله قلموی آغشته به گرده به صورت گرد و غبار انجام شد. پس از رسیدگی کامل کپسول ها، خوشه ها (کاتکین) جمع آوری شده و تمامی کپسول های دورگ و آزاد گرده افشان سترون شده به صورت شکاف داده شده در شرایط محیط کشت MS½ فاقد هورمون کشت شدند. گیاهچه های تولیدشده در اندازه بلندتر از 1 تا 2 سانتی متری به جی فی پات با مخلوطی از پرلیت و پیت ماس و ماسه منتقل و در گلخانه نگهداری شدند و مشخصه های درصد آلودگی و ارتفاع گیاهچه های درون شیشه و تعداد گیاهچه های منتقل شده به جی فی پات یادداشت شد. پس از سازگاری تدریجی، نهال های دورگ به گلدان های بزرگ انتقال یافتند و پس از دو سال بر اساس صفات کمی مانند ارتفاع، قطر یقه، شاخه و مشخصه های کمی و آناتومی برگ مورد ارزیابی قرار گرفتند. نتایج نشان داد که بیش ترین ارتفاع شاتون، تعداد و وزن کپسول در تلاقی آزاد گرده افشان وجود داشت. تعداد 28 نتاج از تلاقی های مختلف صنوبر به دست آمد. بیش ترین ارتفاع ساقه در تلاقی های PD♀xPS♂ (P. deltoides Marquette x P. deltoidesSamsun) و PD♀xPB♂ (P. deltoidesMarquette x P. nigra betulifolia17/13) و بیش ترین زاویه شاخه، سطح برگ و سطح ویژه برگ در تلاقی آزادگرده افشان PD♀ (P. deltoidesMarquette) مشاهده شد.

    کلید واژگان: دورگ گیری, صنوبر, کپسول, محیط کشت, نهال, وراثت پذیری}
    Fatemeh Ahmadloo *, Abbas Ghamari Zare, Mohsen Calagari, Azadeh Salehi, Mahdiyeh Salehi Vajdeh Nazari

    The aim of this study was to use the potential of productive cultivars to produce new hybrids and to evaluate the morphological and anatomical traits of hybrid seedlings between P. nigra and P. deltoides.In the present project, the male and female bases of the superior clones of Populus nigra and Populus deltoides were used, which had a high performance in terms of wood production and proper trunk quality, and were introduced to the implementation department. In winter 2018, the flowering branches of the base material with flower-bearing buds about 60–100 cm in length were collected from the end branches of the tree and planted in 20 litre plastic pots consisting of mixture of soil, sand and well-rotted cattle manure. To prepare pollen grains, a sufficient number of flowering branches were separated from the male branches of each of P. nigra and P. deltoides species and placed in a container of water and the pollen was collected by opening the male flower catkins.Pollination was achieved by lightly dusting the receptive flowers with a camel-hair brush. Catkins were collected from the branches when capsules mature and all of sterilized hybrid and open pollination capsules were cultured on Half-MS medium without hormone in the form of splitting. Produced plantlets taller than 1 to 2 cm in size were transferred to jiffypots with a mixture of sterilized perlite and peat moss and sand and kept in greenhouse and the characteristics of the percentage of contamination, height of plantlets and the number of plantlets transferred to jiffypots were recorded. The hybrid seedlings were transferred to large pots after gradual adaptation, and then they were evaluated based on quantitative traits such as height, collar diameter, branch and quantitative characteristics and anatomy of leaves after two years. The results showed that the highest catkins height, number and weight of capsules were in open pollinated cross. A total of 28 progeny were obtained from Populus different crossings. The highest stem height in crosses of PD♀xPS♂ (P. deltoides Marquette x P. deltoides Samsun) and PD♀xPB♂ (P. deltoides Marquette x P. nigra betulifolia 17/13), the maximum branch angle, leaf area and specific leaf area in open pollinated cross of PD♀ (P. deltoides Marquette) was observed.

    Keywords: Capsule, Culture medium, Heritability, Hybridization, Populus, seedling}
  • عاطفه درخشان، علی ایزانلو*، زهره علیزاده، محمدعلی بهدانی

    زعفران گیاهی تریپلویید و عقیم بوده که تکثیر آن فقط از طریق رویشی انجام می شود، لذا بهبود خصوصیات زراعی آن توسط روش های اصلاح کلاسیک با محدودیت همراه است. فن آوری کشت بافت ابزاری مناسب برای کمک به بهبود خصوصیات زراعی می باشد. هدف از این تحقیق دستیابی به روشی مناسب برای القاء کالوس جنین‏زا و باززایی غیرمستقیم بر روی قطعات بنه‏ زعفران زراعی بود. آزمایش اول به منظور برای القاء و کشت کالوس بصورت فاکتوریل با سه فاکتور شامل؛ نوع ریز نمونه (در چهارسطح) و دو تنظیم کننده رشد 2,4-D و BAP هرکدام در سه سطح (1، 2 و 3 mg/L)، در قالب طرح کاملا تصادفی در 5 تکرار اجرا گردید. نتایج حاکی از این بود که قطعات حاصل از ریزبنه های تشکیل شده بر روی بنه های مادری بیشترین درصد کالوس (.94 درصد) را در مقایسه با انواع دیگر ریزنمونه ها تشکیل دادند. محیط کشت MS حاوی (mg/L 2) 2,4-D و mg/L) 2) BAP بهترین محیط برای تشکیل و رشد کالوس (74 درصد) در قطعات بنه بود. برای تولید کالوسهای جنینزا، کالوسهای به محیط کشت MS حاوی (mg/L 5/0) 2,4-D و(mg/L 3) BAP منتقل و واکشت شدند. به منظور نمو جنین یک آزمایش فاکتوریل در قالب طرح کاملا تصادفی با 6 تکرار در محیط‏های کشت در دو سطح (نیم غلظت MS و کامل MS) بدون هورمون و یا محتوی 6% ساکارز و یا محتوی (mg/L 1) ABA منتقل و مورد بررسی قرار گرفتند. نتایج نشان داد بهترین محیط برای نمو جنین محیط MS کامل محتوی (mg/L 1) ABA بود. سپس کالوس‏های دارای جنین های نمو یافته به منظور رشد و تمایز بیش‏تر به محیط کشت کامل MS محتوی 6% ساکارز منتقل شدند، و مشاهدات نشان داد کالوس‏هایی که در محیط کشت کامل MS محتوی (mg/L 1) ABA قرار داشتند، بهترین واکنش را به باززایی نشان دادند.

    کلید واژگان: بنه, تنظیم کننده های رشد, جنین سوماتیکی, محیط کشت}
    Atefeh Derakhshan, Ali Izanloo *, Zohreh Alizadeh, MohammadAli Behdani

    Saffron is a sterile triploid plant which is propagated by a daughter corms from the mother corm, thus improving its agronomic characteristics has been limited using conventional plant breeding. Tissue culture technology is a useful tool to improve crop characteristics. The purpose of this research is to find the appropriate protocol for the induction of callus in parts of saffron corms. A factorial experiment was carried out with plant growth regulators 2,4-D and BAP, at three levels (1, 2 and 3 mg/L) each, with 5 replications in a completely randomized design. The control samples had no any kind of growth regulator. These results indicate that MS culture medium supplemented with 2 mg/L 2,4-D and 2 mg/L BAP was the best culture medium for callus growth and formation. The purpose of this study was to achieve a suitable protocol for inducing embryogenic callus and indirect regeneration in saffron. To achieve this, an experiment was conducted in a completely randomized design with four replications using two growth regulators of 2,4-D, 0.5 mg/L, and BAP at three levels of 3, 4 and 5 mg/L. Observations showed that there were no significant differences between treatments. Then, these calluses were sub-cultured into two different levels of MS medium (half-strength MS and complete MS) without ABA with 3% and 6% sucrose, and with 1 mg/L ABA. The factorial experiment was conducted in a completely randomized design with 6 replications to examine embryo development. The results showed that the best medium for embryo development was complete MS medium containing 1 mg/L ABA. Finally, in order to growth and differentiation, these calluses were transferred to a MS medium with 6% sucrose. The observations indicated that calluses in full MS medium containing 1 mg/L ABA, showed the best reaction to regeneration.

    Keywords: Corm, growth regulators, Culture Medium, Somatic embryo}
  • محمد گردکانه*، مریم محمدی، هدیه بدخشان، عیسی ارجی
    مقدمه

    پایه GF677 (دو رگ بین هلو و بادام)، یک پایه مناسب برای هلو، شلیل و بادام است که به طور گسترده در سراسر دنیا استفاده می- شود. به دلیل کارایی کم ازدیاد از طریق قلمه، کشت بافت روشی مناسب و سریع برای ازدیاد این پایه است. در محیط مایع تماس بافت گیاهی با محیط کشت بهتر، تکثیر سریعتر، و هزینه تولید کاهش می یابد. بنابراین هدف این تحقیق بهبود پرتکل ریزازدیادی پایه GF677، با استفاده از محیط کشت مایع بود.

    مواد و روش ها

    در این تحقیق ریزنمونه های گره ضدعفونی شده در محیط کشت های MS، B5 و WPM در حالت مایع حاوی هورمون- های BA (بنزیل آدنین)، در پنج غلظت 25/0، 5/0، 1، 2 و 4 میلی گرم بر لیتر و IBA (ایندول-3- بوتیریک اسید)، در چهار غلظت 0، 1/0، 25/0 و 5/0 میلی گرم بر لیتر بررسی شد. آنالیز داده ها اساس روش آماری فاکتوریل در قالب طرح کاملا تصادفی و مقایسات میانگین داده ‎ها به روش آزمون LSD در سطح احتمال 5% انجام شد.

    نتایج و بحث

    نتایج نشان داد که حداکثر تعداد شاخساره (44/2 شاخساره) در محیط مایع WPM با غلظت 1 میلی گرم در لیتر BA و بلندترین طول شاخساره ها در محیط کشت حاوی 1 میلی گرم در لیتر BA و 25/0 میلی گرم در لیتر IBA در محیط کشت B5 مشاهده شد. این مطالعه نشان داد تعداد شاخساره با افزایش غلظت BA تا غلظت مشخصی افزایش یافت. به نظر می رسد که بین غلظت BA و تعداد شاخساره تا یک غلظت خاصی از BA، رابطه مثبت وجود دارد به طوری که تعداد شاخساره در غلظت 1 میلی گرم در لیتر BA به بیشترین تعداد خود رسید. در غلظت های بالاتر از 1 میلی گرم در لیتر BAP، تعداد شاخساره ها کاهش یافت. به نظر می رسد پایه GF 677 دارای مقادیری از تنظیم کننده های رشد به صورت درون زا باشند، به طوری که کاربرد غلظت کمی از تنظیم کننده های رشد برون زا برای پرآوری آن ها کافی است . به نظر می_رسد مقدار مشخصی از BA برای به دست آوردن بیشترین باززایی مورد نیاز است و غلظت های بالاتر BA سبب ایجاد مقدار زیادی کالوس می شود که در کشت بافت برای تولید شاخساره مناسب نیست. جهت ریشه زایی، شاخساره ها را به محیط کشت MS جامد حاوی 1 میلی گرم در لیتر IBA و 5/0 میلی گرم در لیتر BA منتقل و 33 درصد ریشه زایی حاصل شد. گیاهچه های ریشه دار شده در محیط شامل پرلیت، ماسه و خاک به نسبت 1:2:1 قرار گرفتند. 90 در صد نمونه های انتقال یافته به محیط خاکی زنده مانده و رشد طبیعی داشتند.

    نتیجه گیری

    ریز ازدیادی پایه GF677 تحت تاثیر محیط کشت (MS، B5 و WPM) و تنظیم کننده های رشد قرار گرفت. محیط کشت WPM همراه با 1 میلی گرم در لیتر BA با صددرصد باززایی ریزنمونه ها و تولید بیشترین تعداد شاخساره (44/2 شاخساره)، مناسب ترین محیط- کشت در بین سایر محیط ‏های کشت مورد استفاده بود.

    کلید واژگان: پایه رویشی, تنظیم کننده رشد, ریزازدیادی, محیط‏ کشت}
    Mohammad Gerdakaneh *, Maryam Mohamadi, Hedieh Badakhshan, Issa Arji
    Introduction

    GF667 is a hybrid of Prunus Amygdalus × Prunus persica and is the most commonly used rootstock for peach, nectarines and almonds. Due to low efficiency of propagation trough cutting, tissue culture is a good and fast method for propagation of GF667. In the liquid medium, contact between the plant tissue and the medium is better, propagation is accelerated, and cost of production is reduced. Therefore, the aim of this study was to optimize micropropagation methods for GF677 rootstock by using liquid culture system.

    Materials and Methods

    In this study, sterile nodal explants were cultured on different media include Murashige and SKoog (MS), Woody plant medium (WPM) and Gamborg (B5) supplemented with various concentrations of BA (benzyl adenine) at concentrations of 0.25, 0.5, 1, 2 and 4 mg/L and IBA (indole-3-butyric acid) at concentrations of 0, 0.1, 0.25 and 0.5 mg/L. Elongated shoots of GF677 were cultured on MS medium supplemented with 0.25, 0.5, 1.0 and 2.0 mg/l IBA and 0.0, 0.1, 0.2 and 0.5 mg/l BA for rooting. Factorial analysis of variance was carried out and differences between means were scored with LSD tests.

    Results and Discussion

    Effect of different culture media (MS, B5 and WPM) and growth regulators (BA and IBA) on number of shoots per proliferated explant of GF-677 showed that the maximum number of shoots (2.44 shoots) was obtained in WPM medium at a concentration of 1 mg / l BA and the highest shoot length was obtained with 1 mg / l BA and 0.25 mg / l IBA in medium B5. As concentration of BA increased to 1 mg/l, the number of shoot also increased. It sounds that there is a positive correlation between concentration of BA and number of shoot to a certain concentration of BA, so that number of shoot reaches its peak at concentration of 1 mg/l BA. At concentrations higher than 1 mg/l BA decrease in number of shoots can be seen. It shows that when concentration of BA was in excessive amount, it resulted in decrease of shoot number. One of the possible reason can be reductive effect of higher concentrations of BA. Apparently a certain amount of BA is required to obtain the best effect. Higher concentrations of BA brought about formation of high amount of callus which is not appropriate in tissue culture. On MS medium containing 1.0 mg/L IBA and 0.5 mg/l BA, a maximum rooting efficiency was obtained. Rooted plants were transferred in terrestrial environments combination of perlite, sand and soil in the ratio of 1: 2: 1 respectively. Rooted plantlets were successfully acclimatized and transferred to potting mix with 90% survival and grow naturally after strengthening and transferred to soil.

    Conclusions

    The shoot multiplication of GF677 was influenced by the media (MS, B5 and WPM) and growth regulators. The WPM medium at a concentration of 1 mg/l BA gave the best results (2.44 shoots) for the proliferation of cultures from explant among the tested media.

    Keywords: Culture medium, Growth regulatore, Micropropagation, Vegetative rootstock}
  • عبدالکریم زارعی*، فاطمه سلاجقه، مجاهد کمالی زاده

    گیاه گزنه به عنوان یکی از گیاهان با ارزش دارویی بوده که به علت دارا بودن ترکیبات فیتوشیمیایی با ارزش، اخیرا توجه زیادی به آن برای درمان بیماری های مختلف و همچنین استفاده از آن در صنایع غذایی به عنوان نگهدارنده شده است. در این پژوهش به منظور بهینه سازی شرایط کشت بافت برای القاء کالوس از بافت های مختلف این گیاه، اثر تیمارهای مختلف تنظیم کننده های رشد، شرایط نگهداری محیط کشت و نوع ریزنمونه بر میزان تولید کالوس آن مورد بررسی قرار گرفت. به این منظور آزمایشی به صورت فاکتوریل در قالب طرح کاملا تصادفی با سه تکرار در سال های 1395-1396 در دانشگاه جهرم انجام گردید و ریزنمونه های مختلف شامل برگ های مسن و جوان، گره و بذر این گیاه در محیط کشت MS جامد حاوی 30 گرم بر لیتر ساکارز و غلظت های متفاوت دو تنظیم کننده رشد تو-فور-دی (1، 2 و 3 میلی گرم در لیتر) و بنزیل آدنین (1، 5/0 و 1/0 میلی گرم در لیتر) کشت شدند و چهار هفته پس از کشت صفاتی از قبیل درصد تولید کالوس، زمان کالوس دهی، بافت و رنگ کالوس های القایی مورد ارزیابی قرار گرفتند. بر اساس نتایج حاصله، ریزنمونه های مورد استفاده تفاوت معنی داری از نظر تولید کالوس نشان دادند، به طوری که ریزنمونه های برگ مسن، برگ جوان و گره قادر به تولید کالوس بودند. پاسخ ریزنمونه ها برای تولید کالوس با قرار گرفتن در شرایط نوری مختلف متفاوت بود به نحوی که شرایط تاریکی تاثیربیشتری در القای کالوس و میزان رشد آن داشت. همچنین اثر تیمارهای مختلف تنظیم کننده رشد بر تولید کالوس ریزنمونه های مختلف در سطح یک درصد معنی دار بود، به طوری که بیشترین میزان تولید کالوس در ریزنمونه های برگ های جوان و ریزنمونه های گره در محیط کشت دارای یک میلی گرم در لیتر تو-فور-دی و یک میلی گرم بنزیل آدنین به دست آمد ولی در مورد برگ مسن بیشترین میزان این صفت در یک میلی گرم در لیتر تو-فور-دی و 1/0 میلی گرم در لیتر بنزیل آدنین در شرایط تاریکی حاصل شد. در بین ریزنمونه های مورد استفاده، ریزنمونه های برگ جوان در شرایط تاریکی بیشترین درصد تولید کالوس را نشان داده و رشد کالوس بهتری داشتند. استفاده از ریزنمونه برگ جوان و تیمار یک میلی گرم در لیتر تو-فور-دی و یک میلی گرم در لیتر بنزیل آدنین و نگهداری کشت ها در شرایط تاریکی برای تولید کالوس از این گیاه پیشنهاد می گردد.

    کلید واژگان: 6-بنزیل آدنین, تو-فور-دی, طرح فاکتوریل, کالوس‌زائی, محیط کشت}
    Abdolkarim Zarei *, Fatemeh Salajeghe, Mojahed Kamalizadeh
    Background and Objectives

    Nettle (Urtica dioica L.) is considered a valuable plant with high level of various beneficial phytochemical, which has been used centuries in traditional medicine. Since it contains various secondary metabolites and shows noticeable activity against different Gram-positive and Gram-negative bacteria, nettle has been identified as an appropriate choice for wider applications in the food and pharmaceutical industries in the recent years. This plant is native to Asia, Europe, Africa and North America and grows naturally in different regions of Iran. Although nettle is an important medicinal plant worldwide, there is no information about optimization of its tissue culture conditions. This study was carried out to investigate the effects of different plant growth regulators, explant types and light condition on the callogenesis properties of nettle plant under in vitro condition.

     Materials and Methods

    A factorial experiment was carried out on the base of completely randomized design with three replicates. Different explants including young leaves, old leaves, nodes and seeds of nettle plant were cultured in the solid MS medium supplemented with 30 g l-1 sucrose and different concentrations of plant growth regulators of 2,4-D (1, 2 and 3 mg l-1) and BA (0.1, 0.5 and 1 mg l-1). Callus-related characteristics, including time of callus induction, callogenesis percentage, and their color and texture were analyzed. Analysis of variance was carried out by SAS software ver. 9.3.1 and mean comparison was conducted using Duncan multiple range test.

     Results

    According to the results, callus induction was significantly influenced by explant type. The highest callus induction was attained from young leaves, nodes and old leaves, respectively. The results also showed that callus induction and its properties were significantly influenced by light condition. Preservation of cultures in dark condition resulted in higher callus induction than light condition. In addition, the effect of plant growth regulators was significant on callus induction and its properties. The highest percentage of callus induction was obtained from young leaf explants in the medium containing 1 mg l-1 2,4-D and 1 mg l-1 BA in dark condition followed by node explants in the same plant growth regulator treatment. However, medium supplemented with 1 mg l-1 2,4-D and 0.1 mg l-1 BA showed to be more effective for old leaf explants. Based on the results of this research, young leaf explants in the MS medium containing 1 mg l-1 2,4-D and 1 mg l-1 BA in dark condition are suggested for callus induction from nettle plant.

     Discussion

    Type, color and amount of produced callus in different plant species are highly dependent on the genotypes, compositions of tissue culture media as well as the levels of both endogenous and exogenous plant growth regulators. Auxin and cytokinin are two main plant growth regulators playing important roles in callogenesis of different plant species. There is an interaction between the level of plant growth regulators and color of produced callus. Based on the results of present study, it seems that in the nettle plant, node explants endure a higher level of plant growth regulators and hence produce a brighter callus than the leaf segment explants when they are treated with high concentrations of these chemicals.

    Keywords: 6-Benzyladenine, Callogenesis, Culture media, Factorial experiment, 4-D}
  • سارا احمدی، کامبیز مشایخی*، سید جواد موسوی زاده

    ترب اسبی به دلیل داشتن نرعقیمی، بذر کمی تولید کرده که بذرهای تولیدی نیز دارای جوانه زنی پایینی هستند. از این رو ازدیاد آن با قلمه ریشه انجام می شود که آن نیز با محدودیت تعداد پایه مادری مناسب روبرو است. بنابراین ازدیاد انبوه این گیاه از طریق کشت بافت اهمیت ویژه ای دارد. این آزمایش با هدف دست یابی به بهترین روش برای القای کالوس و تولید رویان های رویشی در دو محیط کشت B5 و NL، در دو فاز جامد و مایع طی سال های 97-1395 در آزمایشگاه کشت بافت گروه علوم باغبانی دانشگاه علوم کشاورزی و منابع طبیعی گرگان انجام شده است. بر اساس نتایج به دست آمده در هر دو فاز محیط کشت جامد و مایع  B5و NL، کالوس و رویان رویشی تولید شد. در بررسی کالوس زایی این پژوهش با توجه به سنجش از نظر کیفیت ظاهری و بررسی روند تشکیل کالوس، رشد و افزایش کالوس در کشت جامد نسبت به کشت مایع بیشتر بود. در محیط کشت جامد B5 حاوی دو میکرومولار kin (کنیتین) و یک میکرومولار 2,4-D (توفوردی) بهترین نتیجه در کالوس زایی به دست آمد. نتایج حاصل از رویان زایی ترب اسبی نشان داد که تعداد رویان ها در مراحل کروی، قلبی، اژدری و در نهایت تعداد کل رویان ها در محیط کشت B5 حاوی یک میکرومولار 2,4-D نسبت به محیط کشت NL حاوی یک میکرومولار IAA (ایندول استیک اسید) بیشتر بود. بهینه سازی رشد رویان های رویشی، در گیاهانی که از لحاظ جوانه زنی بذر با مشکل مواجه اند و یا دوره رشد طولانی دارند، در راستای ازدیاد بسیار مهم است. با توجه به موفقیت تولید رویان های رویشی ترب اسبی، نتایج این تحقیق می تواند نویدبخش امکان تولید و ازدیاد آسان این گیاه در مدت زمان کوتاه تر باشد.

    کلید واژگان: القای رویان رویشی, کنیتین, محیط کشت}
    Sara Ahmadi, Kambiz Mashayekhi *, Seyyed Javad Mousavizadeh
    Background and Objectives

    Horseradish has a male sterility that produces a small amount of seed with a low germination. It then propagates with root cuttings, which is also subject to a limited number of mother rootstocks. Therefore, the mass proliferation of this plant is important through tissue culture, especially somatic embryogenesis protocols. Somatic embryogenesis is a method to develop embryo via plant somatic cells during in vitro culture. The purpose of the present experiment is to find the best method for callus and somatic embryogenesis inducing horseradish, which is carried out in two B5 and NL media in both solid and liquid phases.
     

    Materials and Methods

    This research was carry out in the tissue culture lab of the department of horticultural sciences at gorgan university agricultural sciences and natural resources from 2016 to 2019. Calli are developed on callus induction media (B5 + 1 µM 2,4-D + 2 µM kin, NL + 1 µM IAA + 2 µM kin), and then transferred to somatic embryo induction phase (B5 + 3 µM 2,4-D + 4 µM kin, NL + 3 µM IAA + 4 µM kin) for 8 weeks. Elimination of IAA, 2,4-D and kin from induced calli done onto realization phase, and globular, heart and torpedo embryos observed 4 weeks later.
     

    Results

    Based on the results, the best surface sterilization was achieved by 70% ethanol for 30 seconds and 70% aqueous sodium hypochlorite (v/v) for 60 minutes. The callus and somatic embryo were observed in both solid and liquid B5 and NL media. In the study of callus induction, according to the measurement of appearance quality and the process of callus formation, the growth and increase of callus in solid phase are higher than that of liquid phase. The highest callus induction record is seen in solid B5 medium containing 2 µM Kin and 1 µM 2,4-D. Generally, calli on embryo induction phase are bright green to yellowish and compact consisting of separate clusters of somatic embryonic cells. The results of somatic embryogenesis revealed that globular, heart, torpedo and total embryos in B5 containing 1 µM 2,4-D are more than NL containing 1 µM IAA.

    Discussion

    Optimizing the growth of somatic embryos is important for mass propagation of plants that face problems in seed germination or have a long growth period. Due to the success of the production of horseradish somatic embryos, the results of this experiment can provide the possibility of production and propagation of horseradish plants in a short time. Further studies are required to determine the somaclonal variation of horseradish mature somatic embryos and plantlets.

    Keywords: kin, Medium, Somatic embryo induction}
  • ریحانه پیروزی، فرزاد شریف زاده*، منصور امیدی

    گیاه بریش (Hyparrhenia hirta L.) یک گونه علفی مقاوم به خشکی و یکی از ذخایر ژنتیکی ارزشمند است که تولید ضعیف بذر در آن، سبب برخی مشکلات مرتبط با زادآوری طبیعی این گیاه شده است، بنابراین ریزازدیادی و تولید بذر مصنوعی از طریق جنین های سوماتیکی در این گیاه، ضروری و دارای اهمیت خاصی است. جهت بررسی اثر کپسوله کردن جنین های سوماتیکی با غلظت های مختلف آلژینات سدیم و کلسیم کلراید و همچنین زمان های مختلف تعویض یونی بر درصد خروج گیاهچه از جنین های کپسوله شده، آزمایش فاکتوریل در قالب طرح کاملا تصادفی با سه تکرار انجام شد. تک جنین های رویشی بالغ به دست آمده از کشت های سوسپانسیون، در غلظت های دو، سه و چهار درصد آلژینات سدیم قرار داده شدند. تک جنین های موجود در محلول آلژینات سدیم، توسط سرنگ در غلظت های مختلف عامل کمپلکس کننده کلرید کلسیم با غلظت های 50، 75 و 100 میلی مولار چکانده شدند و در مدت زمان های 20، 30، 40 و 50 دقیقه تعویض یون پوشش دهی شدند. سپس جنین های کپسوله شده روی محیط کشت MS1/2 فاقد هرگونه تنظیم کننده رشدی کشت شدند و در اتاقک رشد و در دمای 22 درجه سانتی گراد و تناوب 16 ساعت روشنایی و هشت ساعت تاریکی تا دو هفته نگهداری شدند و پس از این مدت، میزان خروج گیاهچه ها از پوشش آلژینات اندازه گیری شد. بالاترین درصد جوانه زنی و خروج گیاهچه ها 60 درصد بود که با کاربرد سه درصد آلژینات سدیم به همراه غلظت 100 میلی مولار کلرید کلسیم با مدت زمان تعویض یونی 40 دقیقه به دست آمد.

    کلید واژگان: آلژینات سدیم, خروج گیاهچه, زمان تعویض یون, کلرید کلسیم, محیط کشت}
    Reyhaneh Pirozi, Farzad Sharifzadeh *, Mansor Omidi

    Hyparrhenia hirta L. is a drought tolerant herbaceous species and one of the valuable genetic reserves. Poor seed production has caused some problems related to natural regeneration of this plant and micro-propagation and the production of artificial seeds through somatic embryos in this plant is necessity and especially important. A factorial experiment based on a completely randomized design with three replications was performed to consider the effect of encapsulation of somatic embryos with different concentration of sodium alginate and calcium chloride as well as different duration of ion exchange on seedling emergence percentage from encapsulated embryos. Single adult embryos derived from suspension cultures were placed in different sodium alginate concentrations of two, three and four percent. Single embryos in sodium alginate solution were injected by syringes in various calcium chloride complex at concentrations of 50, 75 and 100 mM, and were coated in different times of 20, 30, 40 and 50 minutes. The encapsulated seeds were cultured on MS 1​​/2 without any growth regulator and kept in a growth chamber at 22 °C and the period of 16/8 h (light/darkness) for two weeks and the emerged seedlings from the alginate coating were measured. The highest germination percentage and seedling emergence (60%) was obtained from 3% sodium alginate and 100 mg calcium chloride during 40 minutes of ion exchange time.

    Keywords: Calcium Chloride, culture media, ion exchange time, seedling emergence, sodium}
  • مهدی محب الدینی*، رعنا میرزاده قصابه، مهدی بهنامیان، اسماعیل چمنی، رقیه فتحی

    آویشن دنایی با نام علمی Thymus daenensis Clake یکی از گیاهان دارویی مهمی می باشد که به تیره نعناییان (Lamiaceae) تعلق دارد. برگ و سرشاخه های گلدار این گیاه دارای تعدادی ترکیبات مهم مثل تیمول، کارواکرول، بتاپتین و پاراسیمین می باشد. تحقیق حاضر به منظور تعیین مناسب ترین غلظت تنظیم کننده های رشد گیاهی (اکسین ها و سایتوکینین ها) برای تولید گیاهچه های درون شیشه ای با استفاده از ریزنمونه ی جوانه ی انتهایی و هیپوکوتیل انجام گرفت. بذور گیاه آویشن دنایی بعد از ضد عفونی جهت جوانه زنی در محیط کشت MS کشت شدند. ریزنمونه ها در محیط کشت حاوی تنظیم کننده های رشد گیاهی BAP و Kin جهت بررسی ریزازدیادی کشت گردیدند. ریزنمونه ی هیپوکوتیل نیز در محیط کشت حاوی تنظیم کننده های رشد گیاهی BAP و NAA به صورت ترکیب هورمونی جهت القای کالوس و باززایی ساقه کشت شد. در آزمایشات بررسی ریزازدیادی، مقایسه میانگین داده ها نشان داد که بیشترین تعداد ساقه، تعداد برگ، تعداد جوانه و وزن تر در تیمار Kin با غلظت 5/2 میلی گرم در لیتر حاصل شد و در آزمایشات بررسی باززایی آویشن دنایی، بیشترین درصد باززایی و بیشترین تعداد نوساقه در محیط کشت MS حاوی 5/1 میلی گرم در لیتر BAP به همراه 6/0 میلی گرم در لیتر NAA در ریزنمونه ی هیپوکتیل مشاهده گردید. به طور کلی Kin بیشترین کارایی را در ریزازدیادی و ترکیب BAP و NAA بیشترین تاثیر را در باززایی آویشن داشتند.

    کلید واژگان: القای کالوس, باززایی شاخه, ریزنمونه, درون شیشه ای, محیط کشت}
    Mehdi Mohebodini*, Rana Mirzadeh Qassabeh, Mahdi Behnamian, Esmaeil Chamani, Roghayeh Fathi

    Daenensis thyme (Thymus daenensis Celak) is one of the important medicinal plant that belongs to the family Labiatae. The leaves and flowering branches of this plant has a number of important compounds such as Thymol, Carvacrol, Btaptyn and Parasymyn. The present study was performed in order to determine the optimum of plant growth regulators (auxin and cytokinin) for production of in vitro plantlet using apical bud and hypocotyl explants. The seeds after sterilization were germinated on MS medium. The explants were cultured on the medium containing various concentrations of BAP and Kin for study of in vitro micropropagation. Hypocotyl explants were cultured on the medium containing various combinations of BAP and NAA for callus induction and shoot regeneration. In study of micropropagation, the mean comparison showed the highest number of shoot, leaf and bud obtained in MS medium containing 2.5 mg l-1 Kin in the apical explants. In study of regeneration, the mean comparison showed the highest percentage of shoot regeneration and mean of shoot number were obtained on MS medium supplemented with 1.5 mg l-1 BAP + 0.6 mg l-1 NAA in hypocotyl explants. Overall, Kin was most effective plant growth regulator on micropropagation and comination of BAP and NAA had most effect on regeneration of Daenensis thyme.

    Keywords: Callus Induction, Explants, In Vitro, Medium, Shoot Regeneration}
  • زهرا شعبانی، بهرام عابدی*، ابراهیم گنجی مقدم، علی تهرانی فر
    سابقه و هدف

    هدف اصلی این مطالعه بررسی تکنیک هایی برای افزایش درون شیشه ایی پایه میروبالانC 29 (یک پایه برای درختان هسته دار) بود. ازدیاد درختان میوه در شرایط درون شیشه ایی یک روش قابل دسترس برای افزایش انبوه است. تکثیر درون شیشه ای گیاهان چوبی نسبت به گیاهان علفی دارای مشکلات بیش تری بوده و گیاهان چوبی از نظر باززایی درون شیشه ای شاخساره های نابجا از ریز نمونه و هم چنین از نظر ریشه زایی درون شیشه ای سرسخت هستند، از این رو گزینش محیط های کشت مناسب تر برای انگیزش باززایی شاخساره از ریز نمونه ها، پرآوری و ریشه زایی برای توسعه ی سیستم ریزازدیادی در درختان میوه ضروری است.

    مواد و روش ها

    این آزمایش به منظور ارزیابی بهترین محیط کشت و تنظیم کننده رشد برای ریزازدیادی پایه میروبالانC 29 به صورت آزمایش فاکتوریل بر پایه طرح کاملا تصادفی با چهار تکرار و هر تکرار شامل پنج نمونه در مرکز تحقیقات و آموزش کشاورزی و منابع طبیعی خراسان رضوی انجام شد. به منظور پرآوری، محیط کشت در دو سطح (MS و QL) و غلظت بنزیل آمینوپورین و تیدیازرون در پنج سطح (0، 1، 2، 3 و 4 میلی گرم در لیتر) در مرحله ریشه زایی از دو محیط کشت QL و DKW و تنظیم کننده رشد نفتالین استیک اسید در غلظت های (0، 1، 2 و3 میلی گرم در لیتر) و در مرحله سازگاری از بستر کشت، کوکوپیت و پرلایت (50 : 50 حجمی) استفاده شد. در مرحله شاخه زایی بعد از سه بار واکشت به فواصل هر سه هفته تعداد گیاهچه، طول گیاهچه و تعداد برگ و در مرحله ریشه زایی پس از شش هفته، صفات تعداد و طول ریشه، تعداد برگ، طول ساقه گیاهچه و درصد ریشه زایی مورد ارزیابی قرار گرفت.

    یافته ها

    نتایج نشان داد بیشترین ضریب تکثیر شاخه با 41/3 در محیط کشت MS حاوی دو میلی گرم در لیتر بنزیل آمینو پورین به دست آمد و همچنین بالاترین طول گیاهچه 5/2، 33/2 و 29/2 سانتی متر، به ترتیب در سه غلظت یک، دو و سه میلی گرم در لیتر بنزیل آمینو پورین مشاهده شد. بیش ترین درصد ریشه زایی (100 درصد) و طول ریشه 12/2 سانتی متر در محیط DKW به ترتیب در غلظت یک و سه میلی گرم در لیتر NAA ، ثبت شد. سازگاری گیاهچه ها با استفاده از سیستم مه افشانی، در گلخانه با موفقیت انجام شد که بیشترین درصد بقای گیاهچه (50 درصد) در محیط DKW با یک میلی گرم در لیتر NAAو در بستر کوکوپیت و پرلایت (50: 50 حجمی) به دست آمد.

    نتیجه گیری

    ترکیب محیط کشت و غلظت تنظیم کننده رشد برروی پرآوری و ازدیاد پایه های هسته دار تاثیر دارد. در این آزمایش غلظت بهینه بنزیل آمینو پورین و نفتالین استیک اسید برای پرآوری و ریشه زایی میروبالانC 29، به ترتیب دو و یک میلی گرم در لیتر بود. لازم به ذکر است غلظت بالاتر از دو میلی گرم در لیتر بنزیل آمینو پورین و نفتالین استیک اسید برای این گیاه توصیه نمی-شود. معمولا تولید ریشه تحت تاثیر سنتز، متابولیسم و حرکت اکسین در گیاهچه است بنابراین سازگاری گیاهچه ها به طور مستقیم با کیفیت ریشه و بیشترین ضریب ریشه زایی در ارتباط است.

    کلید واژگان: پرآوری, تنظیم کننده رشد, محیط کشت, ریشه زایی}
    zahra shabani, bahram abedi *, ebrahim ganji moghadam, ali tehranifar
    Background and objectives

    The main purpose of the presented study was to investigate the techniques for in vitro propagation of Myrobalan29c (a rootstock for stone trees). In vitro propagation fruit tree is available way for the mass propagation. In vitro proliferation of woody plants has more problems than herbaceous plants. And woody plant for the in vitro regeneration adventitious shoot from the explant٫ and also in vitro rooting are hard. Therefore, the selection of suitable culture media is necessary for inanition regeneration of shoots from explants٫ proliferation and rooting for the development of a propagation system in fruit trees.

    Material and methods

    This study was performed to determine the best culture medium and plant growth regulators in micropropagation of Myrobalan 29C in a factorial experiment on a complete randomized design (CRD) with 4 replication where each plot contained 5 explants at the Natural Resource and Agricultural Research and Educational Centre of Khorasan Razavi. In order to the proliferation used performed, in level two of culture medium including (MS and QL) and concentrations BAP and TDZ in level five (0, 1, 2, 3 and 4 mgL-1) and two kinds of culture medium including QL and DKW plant growth regulators NAA with (0, 1, 2 and 3 mgL-1) in rooting step and in the acclimatization of substrate Coco pit and Perlite (50; 50 V). The number and the length of the shoots and number leaf in proliferation phase after subculture three (21 days between each subculture) and in rooting phase number and root length, leaf number, percent root and plantlets stem length evaluated.

    Results

    The results showed that the highest shoots proliferation ratio was obtained with 3.41 in MS medium containing 2 mgL-1 of BAP and also the highest plantlets lengths 2.5, 2.33 and 2.29 cm, respectively was observed in three concentrations of 1, 2 and 3 mgL-1 of BAP. The highest percentage of rooting (100%) and root length (2.12 cm) were recorded in DKW medium respectively at concentrations of 1 and 3 mgL-1 NAA. The acclimatization of plantlets to greenhouse conditions was successful. The highest rate of plantlets survival (about 50%) in DKW medium with concentrations 1 mgL-1 of NAA was obtained in substrate Coco peat and Perlite (50; 50 V).

    Conclusion

    The composition of the culture medium and the concentration of growth regulator effect on the proliferation and propagation stone rootstock .In this experiment, optimum BAP and NAA concentrations respectively was 2 and 1 mgL-1 for proliferation and rooting of Myrobalan29c. It should be noted that higher concentrations of 2 mgL-1 BAP and NAA are not recommended for this plant. Usually, root production is affected by the synthesis, metabolism and auxin movement in the plant. Therefore acclimatization directly related to rooting quality and the highest rooting ratie.

    Keywords: Proliferatio, Growth regulator, Culture medium, Rooting}
  • سیده مهدیه خرازی *، احمد شریفی، فاطمه کیخا آخر، عبدالرضا باقری، مریم مرادیان
    ژربرا یکی از مهم ترین گیاهان زینتی می باشد که به صورت گل بریده و گیاه گلدانی مورد استفاده قرار می گیرد. روش های معمول تکثیر کارایی تامین تقاضای جهانی برای این گیاه زینتی را ندارد. لذا عمومی ترین سیستم برای ازدیاد تجاری ژربرا، ریزافزایی می باشد. در این پژوهش، اثر تیمارهای هورمونی مختلف و رقم بر تکثیر و ریشه زایی ریزنمونه نوک شاخساره پانزده رقم ژربرا مورد بررسی قرار گرفت. در مرحله تکثیر از محیط کشت MS حاوی 1 میلی گرم در لیتر BA و یا KIN در ترکیب با 1/0 میلی گرم در لیتر هورمون IAA و یا محیط کشت فاقد هورمون، 3 درصد ساکارز، 8 گرم در لیتر آگار استفاده گردید و جهت ریشه زایی گیاهچه های تکثیر شده از محیط کشت1⁄2 MS حاوی 1 میلی گرم در لیتر IBA، IAA، 2IP و یا محیط کشت 1⁄2 MSفاقد هورمون، 3 درصد ساکارز، 8 گرم در لیتر آگار استفاده شد. نتایج نشان داد که در مرحله تکثیر، در کلیه ارقام مورد مطالعه، محیط کشت حاوی هورمون بنزیل آدنین منجر به بیشترین پرآوری شاخساره گردید. همچنین نتایج نشان داد که ریشه زایی شاخساره های ژربرا تحت تاثیر رقم قرار گرفت و ترکیب هورمونی مناسب جهت ریشه زایی پانزده رقم ژربرا متفاوت بود. با این حال نکته قابل توجه در مرحله ریشه زایی، قابلیت سازگاری مناسب گیاهچه های تکثیر شده می باشد. در محیط کشت 1⁄2 MS، تعداد و طول ریشه های تولیدی در حد متوسط سایر تیمارها قرار داشت ولی با این حال گیاهچه های تولید شده در این محیط کشت، قابلیت سازگاری مطلوبی داشتند و علاوه بر این، هزینه مازاد جهت مصرف هورمون های ریشه زایی مصرف نگردید و هزینه تولید تجاری کاهش یافت. لذا کاربرد این محیط کشت جهت ریشه زایی ارقام مختلف ژربرا توصیه می گردد. در نهایت سازگاری گیاهچه های تولید شده در بستر کشت حاوی کوکوپیت و پرلیت با موفقیت 95 درصد انجام شد.
    کلید واژگان: بنزیل آدنین, تکثیر, ریشه زایی, محیط کشت, نوک شاخساره}
    M. Kharrazi *, A. Sharifi, F. Keykha Akhar, A. Bagheri, Y. M. Moradian
    Background and objectives Gerbera is one of the most important ornamental plants that used as cut flower and potted plant. The common methods of propagation does not have performance for supplying the global demand of this ornamental plant. So the most common method for commercial propagation of gerbera is micropropagation.
    Material and methods In this study, effect of different hormonal treatments and cultivars on micropropagation and rooting of gerbera shoot tip explant was evaluated. Shoot tip explants were first washed with running tap water for 30 min then they were surface sterilized by dipping in 1.5% sodium hypochlorite solution for 5 min and rinsed with sterile distilled water, followed by immersing in 0.1 % mercuric chloride solution for 5 min. After Sterilization with mercuric chloride solution, capitulum was washed with sterile distilled water. Subsequent washing was done with sterile distilled water three times. Sterilization with sodium hypochlorite solution and mercuric chloride and final rinse with sterile distilled water were done under laminar air flow hood. In the proliferation phase, MS medium containing 1 mg/l BA or KIN in combination with 0.1 mg/l IAA or hormone-free medium, 3% sucrose, 8 g/l agar was used. For rooting of propagated plantlets, ½ MS medium containing 1 mg/l IBA, IAA, 2IP or ½ MS hormone-free medium, 3% sucrose, 8 g/l agar was used. After 4 weeks different parameters such as number of plantlet, height of plantlet, number of main root, root length, number of secondary root were measured. Cultivars that was used in this experiment are as follows: 1: ‘Aventura’, 2: ‘Barones’, 3: ‘Mayfair’, 4: ‘Cacharelle’, 5: ‘Real’, 6: ‘Sorbet’, 7: ‘Dalma’, 8: ‘Goldy’, 9: ‘Panama’, 10: ‘Lancaster’, 11: ‘Dune’, 12: ‘Bellavue’, 13: ‘Blinddate’, 14: ‘Applause’, 15: ‘Sunway’.
    Results and discussion The results showed that in all studied cultivars, the medium containing BA lead to producing the highest number of plantlet. So using the medium containing BA in propagation phase is recommended for obtaining the highest number of plantlet. Also the results showed that the rooting of gerbera plantlets was affected by cultivar and suitable hormonal composition for rooting of each cultivar was different. However, the appropriate acclimation of produced plantlets is so important. Although the length and number of roots in ½ MS medium was at the average of other treatments, but propagated plantlets from this medium, had a suitable acclimation capacity. Moreover, additional cost for utilization of rooting hormones was reduced and therefore commercial production cost decreased. So application of this medium for rooting of different gerbera cultivars is recommended. Finally acclimation of rooted plantlet was done in cocopeat and perlite medium, with 95% success.
    Keywords: Benzyl adenine, micropropagation, rooting, Gerbera, shoot tip}
  • رحمان یوسفی، موسی موسوی *، نورالله معلمی، محمد هادی غفاریان مقرب
    جوانه زنی بذور توت فرنگی طولانی، غیر یکنواخت و متغیر می باشد که این امر می تواند باعث ایجاد مشکلاتی برای برنامه های به نژادی این گیاه شود. کوتاه کردن زمان لازم برای جوانه زنی و رسیدن به درصد بالای جوانه زنی بذور، این اجازه را به به نژادگران می دهد که به راحتی ژرم پلاسم های توت فرنگی را ارزیابی کنند. اخیرا نانوتیوب های کربنی برای بهبود جوانه زنی بذور گیاهان مورد استفاده قرار گرفته اند. لذا این آزمایش به منظور بررسی تاثیر نانوتیوب های کربنی بر جوانه زنی درون شیشه ای بذور توت فرنگی انجام شد. آزمایش به صورت فاکتوریل بر پایه طرح کاملا تصادفی در پنج تکرار اجرا گردید. فاکتورها شامل دو نوع محیط کشت درون شیشه ای (MS و B5)، غلظت های مختلف نانوتیوب های کربنی (صفر (شاهد)، 5، 10، 20 و 40 میکروگرم در میلی لیتر) و رقم توت فرنگی (پاروس و کاماروزا) بودند. در پایان دوره آزمایش (40 روز) شاخص های جوانه زنی شامل درصد و سرعت جوانه زنی، زمان رسیدن به 50 درصد جوانه زنی نهایی و میانگین طول ریشه چه و ساقه چه اندازه گیری شدند. نتایج نشان داد که بذور هر دو رقم کشت شده بر روی محیط کشت MS و B5 حاوی غلظت های 10، 20 و 40 میکروگرم در میلی لیتر نانوتیوب پس از 40 روز نشانه ای از جوانه زنی بروز ندادند. در شاهد و غلظت 5 میکروگرم در میلی لیتر در هر دو نوع محیط کشت، بذور جوانه زدند و بین تیمارها تفاوت معنی دار مشاهده گردید. در اکثر شاخص ها تیمار شاهد بهتر بود و تفاوت معنی داری با سایر تیمارها داشت. نتایج به دست آمده نشان داد که نانوتیوب های کربن غلظت های بالا باعث ایجاد محدودیت در جوانه زنی بذور توت فرنگی شدند که احتمال می رود که شاید به دلیل ایجاد سمیت برای جنین بذر باشد.
    کلید واژگان: جنین بذر, سمیت, غلظت, محیط کشت}
    Rahman Yousefi, Mosa Mousavi *, Nourollah Moalemi, Mohammad Hadi Ghafarian Mogharab
    Strawberry seed germination is long and non-uniform and variable, which can cause problems for the plant breeding programs. Reducing the time of germination for strawberry seeds and achieving a high percentage of germination, will allow breeders to easily assess the strawberry germ plasm. Recently, carbon nanotubes have been used to improve seeds germination of plants. Therefore, this experiment was conducted to evaluate the effect of carbon nanotubes on in vitro germination of strawberry seeds. The test was carried out through a factorial experiment based on a completely randomized design with 5 replicates. Factors included two in vitro culture media (B5 and MS), different concentrations of carbon nanotubes (0 (control), 5, 10, 20 and 40 µg/ml) and two cultivars of strawberries (Paros and Camarosa). At the end of experiment (40 days) germination indexes including germination percentage, germination rate, time to 50% of final germination, means of radicle and plumule length (two weeks after germination) were evaluated. The results showed that seeds of the two cultivars cultured on MS and B5 media containing 10, 20 and 40 µg/ml nanotube had no sign of germination. In 0 (control) and 5 µg/ml, seeds on both culture media germinated significantly compared to the other treatments. In most indexes, control treatment was better and significantly different among treatments. The results showed that carbon nanotubes in high concentrations restricted the strawberry seed germination possibly because of toxicity induction for the seed embryo.
    Keywords: Seed embryo, Toxicity, Concentration, Culture medium}
  • لیلا الیاسی، علی اشرف مهرابی، مهدی صیدی، زینب صفری
    م مرزه بختیاری با نام علمی Satureja bachtiarica L. یکی از گیاهان دارویی مهم متعلق به خانواده نعناعیان است که به سبب داشتن ترکیبات با ارزش دارویی از اهمیت خاصی برخوردار می باشد. بهینه سازی کشت کالوس این گونه به عنوان جایگزینی برای تکثیر رویشی مطرح می باشد. در این مطالعه یک روش موثر برای القاء کالوس مرزه بختیاری در محیط کشت MS با استفاده از ریزنمونه ها و غلظت های مختلف تنظیم کننده های رشد گیاهی توسعه داده شد. نتایج نشان داد بالاترین سرعت القاء کالوس (94/0±82/16 روز پس از کشت) و حجم کالوس (47/0±17/14) با استفاده از ریزنمونه ی میانگره به دست آمد. از سوی دیگر ریزنمونه های جوانه انتهایی، میانگره و قطعات گرهی در مقایسه با ریزنمونه ی برگ، مطلوب ترین ریزنمونه ها برای درصد القای کالوس بودند. با توجه به نتایج، قطعات گرهی کشت شده روی محیط کشت تکمیل شده با 1 میلی گرم در لیتر BAP و 1 میلی گرم در لیتر NAA، منجر به کاهش چشمگیر سرعت القاء کالوس شد. حداکثر حجم کالوس با استفاده از ریزنمونه ی میانگره کشت شده روی 5/0 میلی گرم در لیتر BAP و 5/0 میلی گرم در لیتر NAA به دست آمد.
    کلید واژگان: تنظیم کننده ی رشد, ریزنمونه, کالوس, محیط کشت, مرزه بختیار}
    Leila Elyasi, Dr Ali, Ashraf Mehrabi, Dr Mehdi Seyedi, Zeinab Safari
    Satureja bachtiarica L, an important medicinal plant from Lamiaceae family is valuable because of its medical compounds. Optimization of in vitro culture through callogenesis is proposed to be an alternative for vegetative propagation. In present study, an efficient protocol has been developed for callus induction of S. bachtiarica using different explants and concentrations of plant growth regulators on MS basal medium. Results indicated that the highest rate of callogenesis (16.82±0.94 days after culture) and callus volume (14.17±0.47) were achieved from internodes explants. On the other hand, for percentage of callus induction, shoot tips, internodes and nodal segments explants were more efficient than that of leaves explants. According to the results, the nodal segments cultured on medium supplemented with 1 mgl-1 BAP plus 1 mgl-1 NAA led to a remarkable decrease in induction rate of calli. Maximum callus volume was obtained from internodes explants cultured on medium supplemented with 0.5 mgl-1 BAP plus 0.5 mgl-1 NAA.
    Keywords: Callus, Explant, Growth regulator, Medium, Satureja bachtiarica L}
  • احمد جلیلیان، احمد اسماعیلی، فرهاد نظریان فیروزابادی، سیده زهرا حسینی
    گیاه شقایق (Papaver somniferum L.) یکی از قدیمی ترین گیاهان داروئی شناخته شده است. با توجه به این که پتانسیلمواد دارویی گیاهان دارویی درشرایططبیعیبسیارمحدودمی باشد، از این رو کشت بافت گیاهی به عنوان یکی ازروش های کاربردی نقش مهمی در راستای تولید صنعتی متابولیت های ثانویه درگیاهان دارویی دارد. از میان سیستم های کشت بافت، سیستم ریشه های موئین در شرایط کشت بدون تنظیم کننده رشد بسیار پایداراستو به دلیل ثبات ژنتیکی و بیوشیمیایی ذاتی، متابولیت های ثانویه را در طی یک دوره ی طولانی تولید می کنند. در این پژوهش به منظور بهینه سازی شرایط کشت ریشه های موئین از سویه های مختلف آگروباکتریوم رایزوژنز (ATCC15834،A4 و GMI9534)، محیط های کشت MS و 1⁄2MS، دو دمای 25 و 17 درجه سلسیوس در دوره هم کشتی و دو نوع ریزنمونه ی اندام هوایی و محور زیرلپه استفاده گردید. صفت های درصد تحریک ریشه موئین، تعداد ریشه موئین در ریزنمونه و تعداد انشعاب فرعی ریشه موئین در طول یک سانتی متر از ریزنمونه اندازه گیری شد. واکاوی نتایج نشان داد که سویه ی ATCC15834، محیط کشت 1⁄2 MS، دمای 25 درجه سلسیوس همکشتی و ریزنمونه اندام هوایی بهترین ترکیب تیماری جهت تحریک ریشه موئین در گیاه شقایق هستند. با استفاده از واکنش PCR تایید تراریختی ریشه های موئین با آغازگرهای اختصاصی ژن rolB انجام گرفت.
    کلید واژگان: ریشه موئین, آگروباکتریوم رایزوژنز, ریزنمونه, شقایق, سویه, محیط کشت, دما}
    Background And Objectives
    Opium poppy plant (Papaver somniferum L.) is one of the oldest known medicinal plants. Since the potential of medicinal components production in medicinal plants is very limited in natural conditions, plant tissue culture, as a new technology, has an important role in industrial production of secondary metabolites in medicinal plants. Among different tissue culture systems, hairy root is very stable in hormone-free culture conditions and these roots stably produce secondary metabolites over a long period due to their inherent genetic and biochemical stability. Hence, the objective of this study was to evaluate the effect of some different parameters on optimization of hairy production in P. somniferum.
    Materials And Methods
    In the present research, for the optimization of hairy root in papaver, a factorial experiment was conducted based on a completely randomized design with 4 replications. The factors included different Agrobacterium rhizogenes strains (ATCC15834, A4 and GMI9534), medium (MS and ½ MS medium), two temperatures (17 and 25 °C) at co-cultivation period, and two different explants (excised shoot and hypocotyl). Different traits were evaluated including percentage of induced hairy roots, number of lateral branches/1cm, number of hairy root per explants and days after inoculation (DAI).
    Results
    Hairy roots were induced at the wound site of explants after weeks of culture. Analysis of the results showed that strain ATCC15834, ½ MS medium, temperature 25 °C and excised shoot explant were the best treatment combination for hairy roots induction in the poppy plant. Transformed hairy roots were confirmed by polymerase chain reaction (PCR) using rolB gene specific primers.
    Discussion
    All of the A. rhizogenes strains led to hairy root induction, but there were no hairy roots formed from control explants. Differences in virulence, morphology and growth rate can be partially explained by the variety of plasmids harbored by the A. rhizogenesis strains. In the present study, excised shoot explants were highly and significantly susceptible to infection by each strain of A. rhizogenes and hypocotyl explants showed low rate of hairy root induction.
    Keywords: Hairy roots, Agrobacterium rhizogenes, Explant, Opium poppy, Strain, Medium, Temperature}
  • مجتبی رحیمی، محمدحسین دانشور
    ایران یکی از خاستگاه های لاله واژگون (Fritillaria imperialis L.) است. این گیاه زینتی در معرض انقراض می باشد. بنابراین افزایش آن از طریق کشت بافت ضروری است. این پژوهش در چهار آزمایش: تولید پینه، سوخک زایی، ریشه زایی و سازگاری انجام گردید. در آزمایش اول از دو ریزنمونه فلس و برگ اولیه در محیط کشت MS با غلظت های مختلف NAA و IBA اقدام به تولید پینه گردید. نتایج نشان داد بیشترین وزن پینه از ریزنمونه فلس در محیط کشت MS حاوی 0/5 میلی گرم در لیتر NAA و 0/5 میلی گرم در لیتر IBA تولید گردید. در آزمایش دوم از پینه های به دست آمده، در محیط کشت MS با غلظت های مختلف TDZ و KIN، پس از 6 و 12 هفته، تعداد سوخک مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد، بیشترین تعداد سوخک بعد از 12 هفته از پینه حاصل از ریزنمونه فلس در محیط کشت MS حاوی 0/5 میلی گرم در لیتر NAA و سپس در محیط کشت اندام زایی با 0/5 میلی گرم در لیتر TDZ همراه با 0/5 میلی گرم در لیتر KIN تشکیل شد. سپس سوخک ها به محیط کشت MS با غلظت های مختلف NAA (صفر، 0/5، 1 و 2 میلی گرم در لیتر) جهت ریشه زایی منتقل شدند. نتایج نشان داد، بیشترین تعداد ریشه از سوخک های حاصل از ریزنمونه برگ اولیه، در محیط کشت حاوی 1 میلی گرم در لیترNAA به دست آمد. در نهایت سوخک های ریشه دار شده پس از شستشو با آب مقطر جهت سازگاری به گلدان های حاوی پرلیت،کوکوپیت، پرلیت و کوکوپیت که در اتوکلاو گندزدایی شده بودند، منتقل شدند. نتایج نشان داد سوخک های حاصل از ریزنمونه فلس در بستر کشت کوکوپیت، دارای بیشترین تعداد ریشه بود. این تحقیق نشان داد که استفاده از کشت بافت، نقش مهمی در جلوگیری از انقراض لاله واژگون دارد.
    کلید واژگان: باززایی غیرمستقیم, درون شیشه ای, سوخک, لاله واژگون, محیط کشت}
    Mojtaba Rahimi, Mohammad Hosein Daneshvar
    Background And Objectives
    Iran is home of one of the most delightful and graceful flower of Fritillaria in the world. Its habitation is commonly expanded on the vast areas: growing in beds, borders, backgrounds and rock gardens. Besides, it is also suitable for naturalizing and excellent for cut flowers. Fritillaria imperialis as a medicinal plant has pharmaceutical purpose in which possesses a health beneficial essence that used in production of mucus and cough medicine. In addition, extractions of plant tissues contain certain of properties which affect to reduce blood pressure and blood sugar. Unfortunately, the habitation of this ornamental plant is under threat and majority of its habitation already being to ruin due to human activities and urbanization. The propagation of Fritillaria through offsets (bulblets) is prolonging approach which takes approximately 3-4 years. Whereas, using tissue culture technique for flower production is required less time probably within a few months and economically has a huge advantage due to low cost and a numerous plant production in a short time.
    Materials And Methods
    This research was carried out in four experiments: callus formation, bulblet production, root formation and acclimatization. In the present study, a factorial experiment was assigned as completed randomized design (CRD) with three replications. In the first experiment, leaf primordia and scale explants were cultured on MS medium supplemented with different concentrations of NAA and IBA in order to produce callus formation. In the second experiment, the calli were cultured on organogenesis medium which were contained MS medium supplement, with kin. and TDZ, after 6 and 12 weeks. In the third experiment, the bulblets were transferred into rooting media, which were contained MS medium supplemented with different concentrations of NAA (0, 0.5, 1.0 and 2.0 mg/l). In the fourth experiment, after washing the bulblet whit warm distilled water (40ᵒC) that contain 2.0 mg/l benlate fungicide, they then were planted into the pots containing sterilized perlite, cocopeat and perlite along with cocopeat.
    Results
    In the first experiment, the results demonstrated that the highest weight of callus (3.29g) was sustained in scale explants on basal MS medium which was supplemented with 0.5mg/l NAA along with 0.5mg/l IBA. In second experiment, the result indicated that the numerous of bulblets were developed on MS medium supplemented with 0.5mg/l TDZ along with 0.5mg/l kin. Which of these, the callus scale were produced on MS medium supplemented with 0.5mg/l NAA. In the third experiment, in order to retain rooting the bulblets, they were cultured on MS medium supplemented with different concentration of NAA. The result elucidated that the large quantity of roots (7.7) were obtained from leaf primordia on MS medium supplemented with 1.0mg/l NAA. In the fourth experiment, rooted bulblets were washed with warm distilled water for 5-10min, and then they were transferred into pots with perlite, cocopeat and perlite cocopeat.
    Discussion
    The results revealed information that the rooted bulblets from scale growing on cocopeat substrate had retained the most diameter (21.64mm) as compared to other treatments. The finding results under this investigation strongly suggested that using micropropagation it is definitely a possible trend to abolish the barriers which caused to deteriorate of Fritillaria imperiallis.
    Keywords: Callus, Fritillaria imperialis L, Bulblet regeneration, Micropropagation, In vitro culture}
  • الهام سربی، علی مرادی*، اسد معصومی اصل، حمیدرضا بلوچی
    سابقه و هدف
    جنین زایی رویشی در راستای تولید بذر مصنوعی یکی از روش های موثر جهت غلبه بر مشکلات کشت، تکثیر و حفاظت برخی گیاهان دارویی معرفی شده است. بدین منظور پینه زایی، جنین زایی و تعداد جنین رویشی چویل (Ferulago angulata L.) در محیط کشت موراشیگ و اسکوگ رقیق شده (1/4MS) در قالب سه آزمایش جداگانه بررسی شدند.
    مواد و روش ها
    آزمایش اول (پینه زایی) به صورت فاکتوریل دو عاملی شامل ترکیب هورمونی (در 10 ترکیب غلظت نفتالین استیک اسید (NAA) و بنزیل آمینوپورین (BAP)) و ژنوتیپ (دو ژنوتیپ کوه گل و چهل چشمه) در قالب طرح کاملا تصادفی با سه تکرار در آزمایشگاه مرکزی دانشکده کشاورزی دانشگاه یاسوج انجام شد. عامل های آزمایشی در آزمایش دوم (جنین زایی رویشی) شامل ژنوتیب، ریزنمونه و نور (نور کامل و تاریکی) بودند. در آزمایش بررسی تعداد جنین رویشی (آزمایش سوم) بعد از مشاهده علائم ظهور جنین اژدری تعداد جنین های کروی، قلبی و اژدری تشکیل شده بر سطح پینه جنین زا در هر ژنوتیپ شمارش و با استفاده از آزمون T مقایسه شدند.
    یافته ها
    در آزمایش پینه زایی، ژنوتیپ و ترکیب هورمونی در ترکیب با یکدیگر تاثیر زیادی بر میزان پینه زایی نشان دادند، به طوری که برهمکنش این دو تیمار در سطح احتمال 1 درصد معنی دار شد. ریزنمونه های حاصل از ریشه چه و ساقه چه در هر دو رقم چویل در غلظت 5/1 میلی گرم در لیتر NAA و 5/1 میلی گرم در لیتر BAP تشکیل پینه دادند. در این شرایط کمترین میزان درصد پینه زایی (صفر) مربوط به تیمار شاهد (فاقد هورمون) و ترکیباتی بود که یا از غلظت بالای اکسین در مقابل غلظت سیتوکینین استفاده شد و یا یکی از هورمون ها در محیط کشت حضور نداشت. در آزمایش جنین زایی رویشی (آزمایش دوم) ریزنمونه ساقه چه در کوه گل و ریز نمونه ریشه چه در چهل چشمه تشکیل جنین کروی دادند؛ نتایج این آزمایش همچنین نشان داد که ریزنمونه ساقه چه در رقم کوه گل و ریزنمونه ریشه چه در رقم چهل چشمه تحت روشنایی با کاهش غلظت اکسن پینه های سفید رنگ با بافت ترد و شکننده و دارای خاصیت جنین زایی تولید کردند. با انتقال پینه های حاوی جنین کروی به محیطی فاقد هورمون ادامه نمو جنین های کروی به مرحله اژدری طی شد. در آزمایش بررسی تعداد جنین رویشی (آزمایش سوم) چون شرایط تشکیل پینه جنین زا یکسان بود، بنابراین فقط دو ژنوتیپ از لحاظ تعداد جنین رویشی مقایسه شد و مشاهده شد که هر دو ژنوتیپ پاسخ یکسانی را به تشکیل جنین رویشی نشان دادند.
    نتیجه گیری
    در مجموع یافته های این آزمایش نشان داد که نوع ریزنمونه به ژنوتیپ بستگی دارد و می توان از طریق پینه های با بافت ترد و شکننده جنین رویشی تولید و برای تهیه بذر مصنوعی استفاده نمود.
    کلید واژگان: پیش جنین, پینه زایی, جنین زایی رویشی, چویل, محیط کشت}
    E. Sorbi, A. Moradi *, A. Masoumi Asal, H. R. Baloochi
    Background And Objectives
    In order to produce artificial seed, somatic embryogenesis has been introduced as one of the most effective methods to overcome the problems of cultivation, propagation and conservation of medicinal plants. For this reason, callus induction, embryogenesis and somatic embryos of Chavil (Ferulago angulata L.) were evaluated on diluted Murashige and Skoog growth medium ( MS) in three separate experiments.
    Materials And Methods
    The first experiment (callus induction) was done in a two factors factorial experiment consists of hormones combination (in 10 concentration combination of naphthalene acetic acid (NAA) and benzyl amino-purine (BAP)( and genotype (Koohgol and Chehel-Cheshmeh genotypes) based on a completely randomized design with three replications in the central laboratory of agricultural college, yasouj univeristy. Factors of the second experiment (somatic embryogenesis) were consisted of genotype, explant (root and shoot) and light (full light and dark). In the third study (assessment of somatic embryo), after seeing signs of torpedo embryo, number of globular, heart and torpedo embryos formed on the surface of embryogenic calluses in each genotype counted and were compared using T-test.
    Results
    In callus induction experiment (first experiment), genotype and hormonal composition in combination had a great impact on callus induction, so that the interaction between the two treatment groups was significant at 1% probability level. Explants of root and shoot in both genotypes were produced pre-embryo in the same concentration (1.5 mg/l) of NAA and BAP. Under this condition, the lowest callus induction percentage (zero ) was observed in the control (hormone-free) and the treatments that high concentrations of auxin or cytokinin concentration was used and or one of the hormones was absent in the growth medium. In the embryogenesis experiment (second experiment) shoot and root explants have formed globular embryo in Koohgol and Chehel-cheshmeh genotypes, respectively. The results of this experiment also showed that under illumination condition, by decreasing auxin concentration the shoot explant in Koohgol and root explant in the Chehel-cheshmeh have produced calluses with white and brittle texture with capability to producing embryo. By transferring calluses with globular embryos to hormone-free medium, development of globular embryo to torpedo was continued. In the third study (assessment of somatic embryo), as embryogenic callus formation conditions were the same, so only two genotypes were compared in terms of the number of somatic embryo and observed that both genotypes answered similarly to somatic embryo formation.
    Conclusion
    Overall results of this experiment showed that explant type is related to genotype and it is possible to produce somatic embryos and synthetic seed by using callus with white and brittle texture.
    Keywords: Pro, embryo, Callus Induction, Embryogenesis, Chavil, Growth Medium}
  • زینب تقی نژاد، مسعود دهداری *، امین میرشکاری، حسین زینلی
    گیاه دارویی زرشک، متعلق به تیره زرشک است. بذرهای گیاه زرشک دارای دوره خواب طولانی هستند؛ بنابراین، غلبه بر خواب و افزایش میزان جوانه زنی بذرها به روش های مختلف می تواند مفید واقع گردد. این مطالعه به صورت دو آزمایش جداگانه انجام گردید. در آزمایش اول، تاثیر سطوح مختلف اسید جیبرلیک در دمای 8 درجه سانتی گراد (0، 600 و 900 میلی گرم در لیتر) و دما (5، 10 و 25 درجه سانتی گراد به مدت 50 روز) به صورت فاکتوریل در قالب طرح کاملا تصادفی با سه تکرار و در آزمایش دوم تاثیر غلظت های مختلف محیط کشت ام اس (ام اس کامل، یک دوم و یک چهارم) در قالب طرح کاملا تصادفی با سه تکرار بر کشت جنین بذر چهار گونه زرشک بومی ایران (زرافشان، معمولی، راست خوشه و زالزالکی) بررسی شد. بر اساس نتایج حاصله در آزمایش اول، تیمار سرمادهی بذرها در مقایسه با تیمار اسید جیبرلیک، بیشترین اثر را در افزایش درصد جوانه زنی (88 درصد) بذرها نشان داد. در آزمایش دوم، بهترین ترکیب عناصر غذایی جهت کشت جنین، محیط کشت ام اس کامل بود. به گونه ای که در هر چهار گونه بعد از دو یا سه روز جوانه زنی 100 درصد مشاهده گردید. در مجموع بهترین روش برای جوانه زنی سریع زرشک، در همه گونه های مورد مطالعه استفاده از کشت جنین در محیط کشت ام اس کامل تشخیص داده شد.
    کلید واژگان: جیبرلیک اسید, خواب بذر, گیاه دارویی, محیط کشت}
    Zaynab Taghinezad, Massoud Dehdari *, Amin Mirshekari, Hossain Zainali
    Medicinal barberry plants, belong to Berberidaceae family. Seeds of barberry have long period dormancy. Therefore, overcome to seed dormancy and increasing germination rate of seeds due to different methods will be useful. In this regard, two separate experiments were designed. In the first experiment, effect of different levels of Gibberellic acid (0, 600 and 900 mg.l-1 at 8˚C) and temperatures (25 (control), 10 and 5 °C at 50 days) in a factorial experiment based on the completely randomized design with three replications and in the second experiment, effect of different nutrition concentrations of MS medium (full strength MS, 1/2MS and 1/4 MS) in a completely randomized design with three replications on embryo culture of four native species of barberry (Berberis integrima, B. vulgaris, B. crataegina and B. orthootrys) were investigated. Based on the results obtained from the first experiment, chilling treated seeds showed the greatest effect (88%) on seed germination in comparison with gibberellic acid treatment. The results of the second experiment showed that the best MS concentration for embryo culture was full strength MS medium with%100 seed germination in four above mentioned barberry species after 2-3 days. In general, the best method to overcome barberry seed dormancy was an embryo culture in full-strength MS nutrition.
    Keywords: Gibberellic acid, Seed dormancy, Medium culture, Medicinal plant}
نکته
  • نتایج بر اساس تاریخ انتشار مرتب شده‌اند.
  • کلیدواژه مورد نظر شما تنها در فیلد کلیدواژگان مقالات جستجو شده‌است. به منظور حذف نتایج غیر مرتبط، جستجو تنها در مقالات مجلاتی انجام شده که با مجله ماخذ هم موضوع هستند.
  • در صورتی که می‌خواهید جستجو را در همه موضوعات و با شرایط دیگر تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مجلات مراجعه کنید.
درخواست پشتیبانی - گزارش اشکال