به جمع مشترکان مگیران بپیوندید!

تنها با پرداخت 70 هزارتومان حق اشتراک سالانه به متن مقالات دسترسی داشته باشید و 100 مقاله را بدون هزینه دیگری دریافت کنید.

برای پرداخت حق اشتراک اگر عضو هستید وارد شوید در غیر این صورت حساب کاربری جدید ایجاد کنید

عضویت

جستجوی مقالات مرتبط با کلیدواژه « genetic diversity » در نشریات گروه « علوم دام »

تکرار جستجوی کلیدواژه «genetic diversity» در نشریات گروه «کشاورزی»
  • Opeyemi Oladejo *, Saidu Oseni, Martina Kyallo, Jean-Baka Entfellner, Noah Tor, Christian Tiambo, Roger Pelle
    Major Histocompatibility Complex (MHC) is a group of genes that generally influence immune response in vertebrates, and it has been explored among different animal species in various countries. However, there is a paucity of information on its application in Nigerian locally-adapted chickens (NLAC). This research investigated genetic polymorphism, allele variability, and genetic relationships using LEI0258 major histocompatibility complex-linked microsatellite marker among four NLAC populations: Fulani × Yoruba ecotypes, FUNNAB Alpha × Noiler breeds. Blood samples were randomly collected from 50 mature birds in each population and DNA was extracted and subsequently subjected to PCR, Sanger sequencing, and bioinformatic analysis. There were two variable numbers of tandem repeats (VNTRs), with 90% of the alleles containing only one R13 and varying numbers of the R12 motifs that ranged from 1 to 19. Additional polymorphism was revealed by the presence of five SNPs and three indels in the upstream and downstream regions of LEI0258. A total of 48 alleles were observed with sizes ranging from 188 to 530 base pairs while the allele frequencies within the populations ranged from 1.9 to 29.2%. However, only 17 out of the 48 alleles had corresponding MHC-B haplotypes. Haplotypes B2, B12, and B21 found in this study had been reported to confer resistance to infectious poultry diseases especially avian influenza in locally adapted chickens. There were high allelic variability and genetic polymorphisms observed via the atypical LEI0258 microsatellite in describing the MHC-B region.
    Keywords: Characterization, genetic diversity, Immune response, LEI0258 marker, Nigerian locally-adapted chicken}
  • بتول اصغری اسفدن*، علیرضا خان احمدی، غلامرضا داشاب، الیاس لطفی فرخد
    مقدمه و هدف

    DNA  میتوکندریایی یکی از پرکاربردترین نشانگرهای مولکولی برای مطالعات فیلوژنتیک در حیوانات به علت ساختار ساده ژنوم آن است که یک مدل ایده آل برای مطالعه تکامل و تشابه ژنتیکی ارایه می دهد. هدف از مطالعه حاضر، شناسایی شباهت ها و تفاوت های ژنتیکی و فیلوژنتیکی با استفاده از توالی کامل ژنوم میتوکندریایی به همراه توالی های جداگانه 13 ژن رمزگر پروتیین به طور جداگانه به ازای هر ژنوم، در بین هشت گونه بز وحشی و بز اهلی بود.

    مواد و روش ها

    در این مطالعه توالی های کامل ژنوم میتوکندریایی و همچنین توالی 13 ژن رمزگر پروتیین به طور جداگانه به ازای هر ژنوم مربوط به هفت نژاد بز وحشی شامل (Markhor (C. falcoeri, Capra,،Capra nubiana، Capra pyrenaica, Capra ibex sibirica, Capra caucasica,Capra aegagrus) و نژاد بز اهلی (Capra hircus) از پایگاه داده ها NCBI استخراج شدند. هم ردیفی چندگانه ژنوم ها و توالی نوکلیوتیدی 13 ژن رمزگر پروتیین به ازای هر ژنوم، با استفاده از نرم افزار DNASTAR بانام MegAlign و با روش Clustal W انجام شد؛ و برای محاسبه واگرایی و درصد شباهت ژنتیکی ژنوم ها و توالی های نوکلیوتیدی از بخش دیگر نرم افزار DNASTAR به نام Sequence Distances استفاده شد؛ برای آنالیز فیلوژنتیکی ژنوم کامل میتوکندریایی و توالی 13 ژن رمزگر با نرم افزاری MEGA7 هم تراز شدند.

    یافته ها

    بر اساس آنالیز های انجام شده مشخص شد که بیشترین شباهت در بین توالی های نوکلیوتیدی ژنوم کامل میتوکندریایی (99/50) بین بز اهلی (Capra hircus) و بز وحشی Capra aegagrus و کمترین درصد شباهت (93/79) بین نژاد Capra nubiana با بز وحشی Capra sibirica وجود دارد. هم چنین، بر اساس نتایج درخت فیلوژنتیکی مشخص شد که نژادهای بز اهلی (Capra hircus) و بز وحشی Capra aegagrus در یک گروه و نژاد وحشی Capra ibex و Capra pyrenaica در یک خوشه متمایز دیگر تقسیم بندی شده اند.

    نتیجه گیری

    در این مطالعه، تمام نتایج بدست آمده از آنالیز توالی کل ژنوم میتوکندریایی با نتایج حاصل از توالی 13 ژن رمزگر پروتیین به ازای هر ژنوم مطابقت داشت که نشان دهنده خوشه بندی صحیح نژادهای بز وحشی و اهلی می باشد؛ بنابراین می توان از توالی های ژنوم میتوکندری به عنوان یک نشانگر ژنتیکی مناسب در جهت تجزیه وتحلیل دقیق فیلوژنتیک و خوشه بندی گونه های مختلف بز استفاده کرد.

    کلید واژگان: آنالیز فیلوژنتیکی, بز, تنوع ژنتیکی, توالی یابی, ژنوم میتوکندریایی}
    Batol Asghari Esfedan*, Alireza Khan Ahmadi, Gholam Reza Dashab, Elias Lotfi Farokhad
     Introduction and Objectives

    DNA Mitochondria is one of the most commonly molecular markers for phylogenetic studies in animals due to its simple genome structure, which presents an ideal model to study evolution and genetic similarity. The aim of the present study was to investigate the divergence and percentage of genetic similarity along with the phylogenetic analysis of the eight species of wild and domestic goat based on the complete sequence of the mitochondrial genome and the separate sequences of 13 protein-coding genes for each genome.

    Materials and Methods

    In the present study, complete mitochondrial genome sequences along with separate sequences of 13 protein-coding genes per each genome from seven wild species of goat including Markhor (C. falcoeri), Capra ibex, Capra nubiana, Capra pyrenaica, Capra sibirica, Capra caucasica, Capra aegagrus, and domesticated species of goat (Capra hircus) were retrieved from NCBI database and compared to each other. Mitochondrial genomes and genes alignment were accomplished by the MegAlign module of DNASTAR software and compared by the Clustal W method. The Sequence Distances sub-section of the MegAlign module of DNASTAR also was used for the analysis of complete genome and gene sequences divergence and similarity percentage. For phylogenetic analysis, complete mitochondrial genomes and protein-coding genes’ sequences were aligned using MEGA7 software.

    Results

    Based on the analysis, it was found that the highest similarity between the nucleotide sequences of the complete genome (99.50) of domestic goat (Capra hircus) and wild Capra aegagrus goat and the lowest percentage of similarity (93.79) between the nucleotide sequences of the complete genome of the breed Capra nubiana) with wild goat Capra sibirica goat. Also, based on the results of the phylogenetic tree, it was found that domestic goat breeds (Capra hircus) and wild Capra aegagrus goat are divided into one group and wild Capra ibex and Capra pyrenaica breeds are divided into another distinct cluster.

    Conclusion

    In this study, all the results obtained from complete sequences of the mitochondrial genome analysis are consistent with the results obtained from the sequence of 13 protein coding genes per each genome, which indicates the correct clustering of wild and domestic goat breeds. Therefore, mitochondrial genome sequences could be used as a suitable genetic marker for accurate phylogenetic analysis and clustering of different species of sheep.

    Keywords: Genetic diversity, Goat, Mitochondrial genome, Phylogenetic analysis, Sequencing}
  • حسین محمدی*، امیرحسین خلت آبادی فراهانی، محمدحسین مرادی، محمد شمس الهی

    در این پژوهش، میزان همخونی ژنومی و اندازه موثر جمعیت در 879 راس بز نژادهای بیتال، تدی، پهری، نچی، بربری، دیرا دین پناه و پوس وری با استفاده از یک پنل K50 که بعد از کنترل کیفیت 36861 نشانگر  SNPو 827 راس بز بود، بررسی شد. ضریب همخونی با چهار روش ماتریس روابط خویشاوندی (FGRM)، میزان هموزیگوسیتی (FHOM)، همبستگی گامت ها (FUNI)، با نرم افزار GCTA (نسخه1/0) و قطعات هموزیگوت ژنومی (FROH) با PLINK (نسخه 1/9) محاسبه شد. اندازه موثر جمعیت (Ne) از اطلاعات عدم تعادل پیوستگی با نرم افزار SNeP (نسخه 1/1) محاسبه شد. کم ترین ضریب همخونی محاسبه شده با سه روش (FGRM، FHOM، FUNI) مربوط به نژاد بیتال و بیش ترین مربوط به نژاد بربری بود. بیش ترین میزان FROH (0/159) در نژاد بربری و کم ترین مقدار آن (0/028) در نژاد پوس وری برآورد شد. میانگین طول قطعات ROH بین 70/2 تا 391/4 مگاباز و متوسط تعداد قطعات ROH بین 8/19 تا 48/65 متغیر بود. هم چنین بیش ترین و کم ترین تعداد ROH به ترتیب روی کروموزوم های دو و 29 مشاهده شدند. اندازه Ne در نسل های حاضر (نسل پنج) نژادهای موردبررسی در دامنه 365-35 راس بود. بیش ترین Ne در نژاد بیتال (365 راس) و کم ترین در نژاد بربری (35 راس) برآورد شد. میانگین ضریب همخونی در نژادهای بیتال، تدی، پهری، نچی، بربری، دیرا دین پناه و پوس وری به ترتیب 0/035، 0/081، 0/031، 0/052، 0/15، 0/11 و 0/02 به دست آمد. هم چنین Ne اکثر جمعیت های موردمطالعه کاهش یافت. بنابراین، اقتصادی نمودن تولید و طراحی برنامه های مناسب جفت گیری برای کنترل همخونی و حفاظت از حیوانات خالص باقیمانده این نژادها ضروری  است.

    کلید واژگان: ارزیابی ژنومی, بز, تنوع ژنتیکی, قطعات هموزیگوت ژنومی, نشانگرهای تک نوکلئوتیدی}
    Hossein Mohammadi *, Amir Hossein Khaltabadi Farahani, Mohammad Hossein Moradi, Mohammad Shamsollahi
    Introduction

    The selection of animals by humans left detectable signatures on the genome of modern goat. The identification of these signals can help us to improve the genetic characteristics of economically important traits in goat. Over the last decade, interest in detection of genes or genomic regions that are targeted by selection has been growing. Identifying signatures of selection can provide valuable insights about the genes or genomic regions that are or have been under selection pressure, which in turn leads to a better understanding of genotype-phenotype relationships. A run of homozygosity (ROH) is a consecutive tract of homozygous genotypes in an individual that indicates it has inherited the same ancestral haplotype from both parents. Run of homozygosity one of the most methods were used to detecting the genomic inbreeding. The locations of ROHs which are under positive selection, or laboring favorable allele in population, tend to be fixed in the genome and formation of ROH Island during long times. Genomic regions enriched with ROH may be indicative of selection sweeps and are known as ROH islands. As detecting the ROH Islands, the genomic regions contain economic traits could be detectable.

    Materials and Methods

    In this research, the amount of genomic inbreeding and the effective size of the population were investigated using the information obtained from 879 goats of different breeds including Beetal, Daira Deen Panah, Nachi, Barbari, Teddi, Pahari, and Pothwari. In order to determine the genotype of the samples, Illumina caprine Bead Chip 50K were used. The genomic information of goat breeds was extracted from the figshare database. Quality control was conducted using the Plink software. The markers or individuals were excluded from the further study based on the following criteria: unknown chromosomal or physical location, call rate <0.95, missing genotype frequency >0.05, minor allele frequency (MAF) < 0.05, and a P-value for Hardy–Weinberg equilibrium test less than 10-3. After quality control, 36,861 SNPs from Goat SNP chip 50K on 827 goats were remained for the future analysis. Inbreeding coefficient was calculated using four methods including, genomic relationship matrix (FGRM), excess of homozygosity (FHOM), correlation between uniting gametes (FUNI) using the GCTA 1.0 software and run of homozygosity (FROH) using the PLINK 1.9 software. The effective population size (Ne) was calculated from linkage disequilibrium data with SNeP software (version 1.1). GeneCards (http://www.genecards.org) and UniProtKB (http://www.uniprot.org) databases were also used to interpret the function of the obtained genes.

    Results and Discussion

    The lowest and highest inbreeding coefficient calculated by three methods (FGRM, FHOM, and FUNI) were related to Beetal and Barbari breed, respectively. The highest (0.159) and lowest (0.028) amount of FROH was estimated in the Barbari and Pothwari breeds, respectively. The average length of ROH ranged from 70.2 to 391.4 Mb, and the average number of ROH fragments varied between 8.19 and 48.65. Also, the highest and lowest number of ROH were observed on chromosome 2 and 29, respectively. The size of Ne in in the current generations (fifth generation) of the studied breeds was ranged from 35 to 365. The highest Ne was estimated in the Beetal breed (365 heads) and the lowest in the Barbari breed (35 heads). The average inbreeding coefficient in Beetal, Teddi, Pahari, Nachi, Barbari, Daira Deen Panah and Pothwari breeds was obtained 0.035, 0.081, 0.031, 0.052, 0.15, 0.11 and 0.02, respectively. In addition, the Ne of most of the studied populations has been decreased. The results of this study revealed that, the selection processes in different goat breeds for economic traits during several years, has led to the formation of many ROH islands in goat genome, therefore scanning these regions at the genome level can be an alternative strategy to identify genes and associated loci with economic traits.

    Conclusions

    our findings contribute to the understanding of genetic diversity and population demography, and help design and implement breeding and conservation strategies for study goat breeds. Therefore, it is necessary to economize production and planning a suitable mating scheme to control inbreeding and genetically conserve the remaining pure animals of these breeds.

    Keywords: Genetic diversity, genome wide evaluation, Goat, Runs of homozygosity, Single nucleotide polymorphism}
  • حسن جلیلیان مجد، شیدا ورکوهی*، حمیدرضا سیدآبادی

    بررسی توالی نوکلیوتیدی ناحیه سیتوکروم-b ژنوم میتوکندری در درون جمعیت ها می تواند شاخص مناسبی از میزان تنوع موجود در جمعیت مورد مطالعه باشد. تحقیق اخیر به منظور بررسی تنوع ژنتیکی در اسب کرد و رابطه فیلوژنتیکی اسب کرد با سایر نژادهای اسب در دنیا با استفاده از ناحیه سیتوکروم-b انجام شد. بدین منظور از 30 راس اسب نژاد کرد خون گیری بعمل آمد و DNA آن به روش نمکی استخراج گردید، سپس با استفاده از آغازگرهای اختصاصی ناحیه سیتوکروم-b به طول 1029جفت باز تکثیر و تمام نمونه ها بعد از خالص سازی توالی یابی شدند. قطعه مورد نظر پس از توالی یابی، با نرم افزار BioEdit  ویرایش و قطعه 882 جفت بازی از آن استخراج شد. نمونه ها با توالی مرجع اسب به شماره دسترسی (X79547) با استفاده از رویه Clustal-W همردیف شدند. تعداد هاپلوتیپ، جایگاه های نوکلیوتیدی متغیر، تنوع هاپلوتیپی و تنوع نوکلیوتیدی با استفاده از نرم افزار DNASP4.0 تعیین شد. درخت فیلوژنی با استفاده از نرم افزار MEGA6.1 به روش Neighbour-joining ترسیم شد. تعداد 7 هاپلوتایپ با 7 جایگاه نوکلیوتیدی متغیر شناسایی شد. هاپلوتایپهای بدست آمده همگی در هاپلوگروه K قرار گرفتند. میزان تنوع هاپلوتیپی و نوکلیوتیدی به ترتیب 001/0±784/0 و 001/0±00218/0 برآورد شد. ترکیب نوکلیوتیدها در توالی شاخص شامل 27/21% نوکلیوتید A، 77/32% نوکلیوتید C، 15/13% نوکلیوتید G و 87/26% نوکلیوتید  Tبود. بر اساس نتایج آنالیز فیلوژنی، اسب کرد از نظر ژنتیکی به نژادهایی از ژاپن، چین ، نژادی از لهستان و عربستان نزدیکتر است، که نشان دهنده تشابه ژنتیکی بیشتر اسب کرد با نژادهای آسیایی و تا حدودی اروپایی می باشد..

    کلید واژگان: اسب کرد, تنوع ژنتیکی, ژنوم میتوکندری, سیتوکروم b, فیلوژنی}
    Hasan Jalilian Majd, Sheida Varkoohi *, HamidReza Seyedabadi

    Investigation of mitochondrial genome sequence of cytochrome-b region within population can be a good indicator for diversity in the studied population. A recent study was conducted to investigate the genetic diversity in Kurdish horses and phylogenetic relationship of between Kurdish horse with other horse breeds in the world using cytochrome-b region. Blood samples were collected from 30 Kurdish horses and total DNA was extracted by modified salting out method. Cytochrome-b sequences were amplified by primers pairs with 1029 bp length and then were sequenced after purifying. The sequences were trimmed to 882 bp using BioEdit software. The samples were aligned with the horse reference sequence with access number (X79547) using Clustal-W package. Haplotype and polymorphic site numbers, Haplotype and nucleotide diversity were estimated using DNASP4 software. Phylogenetic tree was constructed in MEGA7 software by neighbor joining method. 7 haplotypes with 7 polymorphic site were identified. Whole haplotypes were belonged to K haplogroup. Haplotype and nucleotide diversities were 0.784±0.001 and 0.00218±0.001, respectively. The compositional frequency of consensus sequences was including: A base, 21.27%; C base, 32.77%; G base, 13.15% and T base, 26.87%. According to the phylogenetic analysis, Kurdish horses were genetically more closely related to Japanese and Chinese breeds and one Polish and Saudi Arabian breeds which shows that Kurdish horse has genetic similarities with Asian and some European horse breeds.

    Keywords: Kurdish horse, Genetic diversity, Mitochondrial Genome, Cyt-b, phylogeny}
  • حسین مرادی شهر بابک*، پریسا بیابانی، حسن مهربانی یگانه، مهدی مخبر
    در مطالعه ی حاضر، از اطلاعات ژنومی 590 راس گاو شامل گاوهای بومی سرابی، کرمانی، کردی، تالشی، سیستانی، نجدی، مازندرانی و توده نژادی پارس، آمیخته های بومی شمال غرب کشور، هلشتاین ایران، هلشتاین فرانسه و هلشتاین ایرلند استفاده شد.کنترل کیفی با استفاده از نرم افزار Plink انجام شد. به-طوری که جایگاه ها و افراد با بیش از 5 درصد ژنوتیپ ازدست رفته، نشانگرهای SNP با MAF کمتر از 1 درصد و نیز نشانگرهای SNP که بر اساس تصحیح بنفرونی خارج از تعادل هاردی - واینبرگ بودند، حذف شدند. درنهایت تعداد 509 راس حیوان با تعداد 13512 نشانگر SNP برای مطالعات ساختار جمعیت مورداستفاده قرار گرفت. بررسی و شناسایی گروه های ژنتیکی با استفاده از آنالیز تحلیل مولفه های اصلی (PCA) و توسط پکیج آماری GenABEL انجام شد. اطلاعات مربوط به آنالیز PCA و اختلاط جمعیتی نشان داد که جمعیت های موردمطالعه در چهار گروه مجزا شامل گاوهای سرابی خالص در گروه اول، آمیخته های بومی شمال غرب کشور در گروه دوم، جمعیت های اصیل هلشتاین در گروه سوم و نژادهای بومی ایران در گروه چهارم قرار دارند. همچنین نتایج آنالیز شاخص تمایز جمعیتی (FST) نشان دهنده دامنه ی وسیعی از تمایز بین جمعیت ها از 180/0 بین نژادهای سیستانی و کردی تا 007/0 و 004/0 در بین نژادهای هلشتاین ایران و ایرلند با هلشتاین فرانسه بود. بررسی تمایز جمعیتی دام های بومی با هلشتاین اصیل حاکی از آن بود که نژاد سیستانی بالاترین تمایز را با نژادهای مختلف هلشتاین (128/0 تا 138/0) دارد و با اختلاف اندک نسبت به سایر نژادها، نژاد کردی و مازندرانی کمترین تمایز ژنتیکی را با جمعیت های هلشتاین موردمطالعه داشتند.
    کلید واژگان: تنوع ژنتیکی, تمایز جمعیتی, گاو هلشتاین, آمیخته های بومی}
    Hossein Moradi Shahrebabak *, Parisa Biabani, Hasak Mehrbani Yeganeh, Mahdi Mokhber
    In this study, genomic data of 590 cattle were used including native breeds of Sarabi, Kermani, Kurdi, Talashi, Sistani, Najdi, Mazandarani and Pars, crossbred from northwest of Iran, Holstein populations from Iran, France and Ireland. Quality control and data filtration were performed using Plink 1.9 software. After this quality control, individuals and SNPs with call rate below 0.95%, SNP makers with minor allele frequency (MAF) > 0.01%, divergence from Hardy-Weinberg Equilibrium were excluded. This procedure yielded 509 individuals with 13512 SNP marker. Then filtered data were used to genetic diversity and clustering analysis. Identification of genetic groups were performed using PCA analysis data by GenABEL software. PCA and ADMIXTURE analysis showed that studied populations are in 4 separate categories including purebred Sarabi population in the first group, crossbred from northwest of Iran in the second group, purebred Holstein populations in the third group and native breeds of Iran were in the fourth group. Further details of demographic differentiation were identified by Weir and Cockerham's fixation index. The range of differentiation in the present study varied from 0.180 between Sistani and Kurdish breeds to 0.007 to 0.004 between the Iran Holstein breed and Ireland with France Holstein breeds. The results showed that the highest difference between indigenous and Holstein breeds related to Sistani breed that had the highest difference with different Holstein breeds (0.128 to 0.138). With slight differences from other Iranian indigenous breeds, the Kurdish and Mazandaran breeds had the smallest genetic differences with the studied Holstein populations.
    Keywords: Genetic diversity, Fixation Index, Holstein cattle, Indigenous Crossbred}
  • حمیدرضا سیدآبادی، جواد احمدپناه، علی جوانروح*، حسن بانه
    هدف از این تحقیق، بررسی تنوع ژنتیکی اسب های عرب ایران با استفاده از نشانگرهای ریزماهواره بود. به این منظور از تعداد 10 نشانگر ریزماهواره شامل AHT04، AHT05، ASB02، ASB17، ASB23، HMS03، HMS06، HMS07 و VHL20 مورد تایید انجمن بین المللی ژنتیک دام استفاده شد. تعداد 8673 نمونه موی اسب از استان های خوزستان، یزد، کرمان، اصفهان، لرستان و البرز جمع آوری شد و سپس استخراج DNA از نمونه های اخذ شده انجام گرفت. نشانگرهای ریزماهواره با روش Multiplex PCR تکثیر شدند. سپس محصولات تکثیر شده به وسیله سیستم Genetic analyzer و با روش الکتروفورز مویینه تعیین ژنوتیپ شدند. بیشترین و کمترین تعداد آلل مشاهده شده به ازای هر نشانگر، به ترتیب مربوط به نشانگرهای ASB17 (17 آلل)، HMS06 (هشت آلل) و HMS07 (هشت آلل) بودند. مجموع تعداد کل آلل های مشاهده شده در همه جایگاه ها و میانگین تعداد آلل مشاهده شده به ترتیب برابر با 113 و 3/11 بودند. میانگین تعداد آلل موثر، شاخص شانون، میزان هتروزیگوسیتی مشاهده شده و مورد انتظار و شاخص تثبت به ترتیب 97/3، 58/1، 721/0، 736/0 و 021/0 به دست آمد. میانگین تنوع ژنتیکی در جمعیت اسب عرب مورد بررسی برابر با 736/0 محاسبه شد. بیشترین تنوع ژنتیکی در نشانگر VHL20 با فراوانی برابر با 803/0 و کمترین میزان تنوع ژنتیکی مربوط به نشانگر ASB2 با مقدار 620/0 بود. فراسنجه های جمعیتی در اسب عرب نشان داد که چندشکلی و تنوع ژنتیکی در این نژاد نسبتا بالا است. وجود تنوع ژنتیکی در این نژاد جهت اجرای برنامه های اصلاحی و حفاظت نژادی از اهمیت ویژه ای برخوردار است.
    کلید واژگان: اسب عرب, تنوع ژنتیکی, فراسنجه های جمعیتی, نشانگر ریزماهواره}
    H. R. Seyedabadi, J. Ahmadpanah, A. Javanrouh *, H. Baneh
    Introduction
    Horse has been of great interest to humans due to its speed, strength, and endurance. Based on its role in human history and civilization, it is considered the most important domesticated animal. Iranian horse breeds are bred in the north, south, and west regions of the country. Arabian horse is one of the international breeds in the world, which is bred in more than 60 countries. Preliminary evidence shows that the Arabian horse breed was established about 3000 years ago and was bred in small populations in many countries of the Middle East, including Egypt, Iran, Saudi Arabia, and Syria. These separate populations have led to the development of different maternal strains of the Arabian horse. Genetic diversity is necessary for genetic conservation and survival of the breeds. Molecular markers are used to assess the structure and genetic diversity of different populations. Therefore, one of the suitable markers is a microsatellite. Regarding the importance of genetic diversity in the survival of the breed, and designing the genetic conservation and breeding programs, the purpose of this study was to investigate the population structure and genetic diversity of Arabian horse breeds using microsatellite markers.
    Materials and Methods
    In this study, hair root samples were obtained from 8673 (5602 mares and 3071 stallions) Arabian horses from Khuzestan, Yazd, Kerman, Isfahan, Lorestan, and Alborz provinces. DNA samples were extracted from hair roots using the Direct PCR Kit (Thermo Fisher Scientific, Vilnius, Lithuania). The quantity and quality of the extracted DNA were controlled by spectrophotometry and agarose gel methods. The number of 10 microsatellite markers including AHT04, AHT05, ASB02, ASB17, ASB23, HMS03, HMS06, HMS07, HTG10, and VHL20 were used based on ISAG recommendation. Then, the amplification of genomic fragments and the genotype of samples was determined by COrDIS Horse Reagent Kit (Moscow, Russia). Forward primers were labeled with fluorescent dye at 5'-end. These microsatellite loci were amplified by the multiplex PCR method. Then, the PCR products were genotyped by the Genetic Analyzer system and the capillary electrophoresis method. Obtained data were used to estimate demographic parameters. The number of effective alleles, the number of observed alleles, the observed heterozygosity, the expected heterozygosity, and the Shannon index were calculated by GenAlex 6.5 software. Genpop 4.7.5 software was used to calculate the FIS statistic or Fixation index in the population.
    Results and discussion
    The results showed that the lowest and highest number of observed alleles were related to ASB17 (17 alleles), HMS06 (eight alleles), and HMS07 (eight alleles) markers, respectively. The total number of alleles observed at all loci was 113 alleles. The average number of observed alleles was estimated to be 11.3, which indicates high allelic diversity in the Persian Arabian horse. The mean number of effective alleles, Shannon index, observed and expected heterozygosity and Fixation index were 3.97, 1.58, 0.721, 0.736, and 0.021, respectively. The mean genetic diversity in the Arabian horse’s population was calculated to be 0.736. The highest and lowest genetic diversity was observed in VHL20 (0.803) and ASB02 (0.620) markers, respectively. The average number of effective alleles per locus in studies conducted in different countries on Arabian horses, including Egypt, Syria, and Western countries, with Persian Arabian horses in this research, showed that number of effective alleles is higher in Persian Arabian horses. The average Shannon's index has been reported to be slightly lower in previous studies of Persian Arabian horses, which is probably due to the small number of samples in these studies compared to the present study.  The highest and lowest observed heterozygosities in this study were related to AHT4 (0.788) and ASB02 (0.613) markers, which were consistent with the results of the research conducted on Arabian horses of Iran, Syria, and Egypt. The positive FIS value in Arabian horses made a decrease in heterozygosity in the population, an increase in homozygosity and consequently inbreeding in Arabian horse populations. In this research, all studied loci showed a significant deviation from the Hardy-Weinberg equilibrium. Except for the AHT04 marker, which deviated from the Hardy-Weinberg equilibrium at P<0.01, the others have deviated at P<0.001. Deviation from the Hardy-Weinberg equilibrium can indicate the presence of some factors disturbing Hardy-Weinberg equilibrium, such as migration and selection, which in Persian Arabian horses, the entry of stallions from outside the herd and the gene flow between different maternal strains and also the existence of a selection program among breeders are the main factors of deviation from Hari-Weinberg equilibrium.
    Conclusions
    Evaluation of the genetic structure of Arabian horses of Iran and comparison with other Arabian horses in the world, including those in the Middle East region, showed that Arabian horses of Iran have a higher genetic diversity, which is probably due to the presence of different maternal strains in Iran, high gene flow among the different strains, a large import of Arabian horses and crossbreeding with Arabian horses of Iran, as well as a high number of samples and so identification of new alleles in this research. On the other hand, the rate of inbreeding was positive according to the FIS in Iran Arabian horses, indicating a risk of genetic diversity loss and increasing inbreeding in these horses. Therefore, management of genetic diversity and prevention of mating among related animals should be considered.
    Keywords: Arabian horse, Genetic diversity, population parameters, Microsatellite marker}
  • علیرضا نیک منش*، مسعود اسدی فوزی، علی اسمعیلی زاده کشکوئیه، حجت اسدالله پور نعنائی، لیلا عزالدین لو
    مقدمه و هدف

    ژن BRCA1 که به آن "دروازه بان" می گویند؛ نقش مهمی در روند ترمیم آسیب های DNA، تنظیم چرخه سلولی، تنظیم فرآیند رونویسی، حفظ پایداری کروموزوم و دیگر مسیرهای مهم برای تعمیر و نگهداری از ثبات ژنوم دارد. تحقیق حاضر با هدف انجام آنالیزهای بیوانفورماتیکی و مقایسه تنوع ژنتیکی و ساختار فیلوژنتیکی ژن BRCA1 در نژادهای مختلف گوسفندان اهلی و وحشی از 49 نژاد در 6 منطقه جغرافیایی : آسیای غربی، اروپا، چین، شمال آفریقا، جنوب آفریقا و نژاد وحشی (کشور ایران) با استفاده از بانک اطلاعاتی ژنوم NCBI انجام شد.

    مواد و روش ها: 

    توالی های مورد نظر با استفاده از نرم افزار MEGA11 هم تراز و درخت فیلوژنتیکی به روش Neighbor-Joining ترسیم شد. همچنین تعداد جهش ها، تنوع نوکلیوتیدی، تنوع هاپلوییدی، تعداد جایگاه هایی که در آنها جایگزینی مشابه یا غیر مشابه اتفاق افتاده، درصد تفرق ژنی و تبدیل ژنی نیز با استفاده از نرم افزار Dnaspv5 مورد بررسی قرار گرفت.

    یافته ها:

     تجزیه و تحلیل های مربوط به مقایسه نژادهای موجود در 6 منطقه جغرافیایی، 112 چند شکلی را نشان داد که منجر به ایجاد 19 هاپلوتیپ مختلف با تنوع هاپلوتیپی 0/035 شد. تنوع نوکلیوتیدی و متوسط تفاوت های نوکلیوتیدی (k) در بین نژادها به ترتیب 0/205 و 0/052 برآورد گردید. تمایز ژنتیکی بین جمعیت گوسفندان چین با جمعیت گوسفندان وحشی کمترین بود. میانگین فواصل ژنتیکی بین تمام مناطق جغرافیایی 29/0 محاسبه گردید. میانگین نسبت نوکلیوتیدی (A+T) : (G+C)  برابر با 62 : 38 % بود که نشان دهنده غالب بودن بازهای سیتوزین و گوانین می باشد. میزان توالی حفاظت شده این تحقیق به طور میانگین 0/313 بود که نشان دهنده چند شکلی بالای این ژن و به وجود آمدن پروتیین های جدید و همچنین عملکردهای جدیدی جهت سازگاری با شرایط مختلف هموستازی می باشد. تعداد موثر کدون ها در این تحقیق 56/41 محاسبه شد. مقدارD تاجیما در آزمون بی طرفی تاجیما 0/478 به دست آمد که نشان دهنده متعادل بودن فشار انتخاب می باشد.

    نتیجه گیری: 

    تنوع ژنتیکی بالایی در جمعیت وحشی وجود دارد که از دلایل آن وجود محیط های جنگلی و باز، جلوگیری از رانش ژنتیکی و کاهش آمیزش های خویشاوندی می باشد که بر روی قدرت عضلانی، عادات غذایی، رفتارهای پرخاشگرانه، پاسخ های دفاعی، ادراک حسی مقابله با شرایط و استرس های محیطی مرتبط با بیان ژن BRCA1 در این جمعیت ها تاثیر گذار می باشد.

    کلید واژگان: تنوع ژنتیکی, ساختار فیلوژنتیکی, گوسفند, منطقه جغرافیایی, BRCA1}
    Alireza Nikmanesh*, Masood Asadi Fozi, Ali Esmailizadeh, Hojjat Asadollahpour Nanaei, Leila Ezedinloo
    Introduction and Objective

    The BRCA1 gene, which is called “gate keeper” It plays an important role in the process of repairing DNA damage, regulating the cell cycle, regulating the transcription process, maintaining chromosome stability, and other important pathways for the maintenance of genome stability. The current research was conducted with the aim of bioinformatic analysis and comparison the genetic diversity and phylogenetic structure of the BRCA1 gene of different breeds of domestic and wild sheep from 49 breeds in 6 geographical regions: Western Asia, Europe, China, North Africa, South Africa and wild (Iran) using the NCBI genome databas.

    Material and Methods

    The desired sequences were aligned using MEGA11 software and a phylogenetic tree was drawn by Neighbor-Joining method. Also, the number of mutations, nucleotide diversity, haploid diversity, the number of positions in which similar or non-similar substitutions occurred, the percentage of gene differentiation, gene conversion were also analyzed using Dnaspv5 software.

    Results

    The analyzes related to the comparison of breeds in 6 geographical regions showed 112 polymorphisms, which led to the creation of 19 different haplotypes with a haplotype diversity of 0.035. Nucleotide diversity and average nucleotide differences (k) among breeds were estimated as 0.205 and 0.052, respectively. The genetic differentiation between the Chinese sheep population and the wild sheep population was the lowest. The average genetic distance between all geographical regions was calculated to be 0.29. The average nucleotide ratio (A+T):(G+C) was equal to 38:62%, which indicates the predominance of cytosine and guanine bases. The amount of conserved sequence (c) in this research was 0.313 on average, which indicates the high polymorphism of this gene and the creation of new proteins as well as new functions to adapt to different homeostasis conditions. The effective number of codons (ENC) in this research was calculated to be 56.41. The value of D in the Tajima neutrality test was 0.478, which indicates that the selection pressure is balanced.

    Conclusion

    The high genetic diversity in the wild population, the reasons for which are the presence of forest and open environments, prevention of genetic drift and reduction of inbreeding, which affects muscle strength, eating habits, aggressive behaviors, defense responses, sensory perception of confrontation with environmental conditions and stress that related to BRCA1 gene expression in these populations.

    Keywords: BRCA1, Genetic diversity, Geographic region, Phylogenetic structure, Sheep}
  • کریم نوبری*، عباس بهاری، شکوفه غضنفری
    شتر یکی از دام های بسیار مهم در مناطق خشک و بیابانی می باشد و با توجه به تغییرات اقلیمی، به عنوان حیوان مطلوب برای این مناطق مستلزم نگاه علمی دقیق تری است. مطالعات اندکی در رابطه با تنوع و خصوصیات ژنتیکی آن در مقایسه با سایر گونه های دامی صورت گرفته است. شناخت خصوصیات ژنتیکی می تواند در تعیین استراتژی های حفظ تنوع ژنتیکی و اصلاح نژاد کمک کند. به منظور بررسی ساختار جمعیتی و تنوع ژنتیکی موجود در بین و درون گونه های مختلف شتر می توان از نشانگر های موجود بر روی DNA میتوکندری استفاده نمود. هدف این مطالعه مقایسه تنوع ژنتیکی با استفاده از توالی سیتوکروم b میتوکندری شتر تک کوهانه ترکمن با شترهای تک کوهانه، دو کوهانه و گونه های شتر بدون کوهان بود. برای این منظور، توالی کامل سیتوکروم b به طول 1140 جفت باز در شتر ترکمن با استفاده از روش توالی یابی کل ژنوم به دست آمد و با توالی سیتوکروم b در 42 نفر شتر تک کوهانه، 31 نفر شتر دوکوهانه وحشی، 121 نفر شتر دوکوهانه اهلی، شترهای بدون کوهان وحشی شامل 31 راس گواناکو (Lama guanicoe) و شش راس ویکونا-ویکونا (vicugna vicugna) و شترهای بدون کوهان اهلی شامل شش راس لاما گلاما (Lama glama) و پنج راس آلپاکا (Lama pacos) مورد مقایسه قرار گرفتند. شترهای تک کوهانه ایرانی با شترهای دوکوهانه وحشی ارتباط ژنتیکی داشتند، به طوری که ماده شترهای دوکوهانه وحشی با شترهای نر تک کوهانه آمیزش داده شده اند. به نظر می رسد که شترهای تک کوهانه دارای مادران دوکوهانه وحشی در شجره خود، به طور کامل از کشور ایران می باشند.
    کلید واژگان: تنوع ژنتیکی, درخت فیلوژنتیکی, سیتوکروم b, شتر ترکمن}
    Karim Nobari *, Abbas Bahari, Shokofe Gazanfari
    Introduction
    Camels play a major role in the life of people in parts of Africa and Asia, especially in the desert areas. Today, camels are important for sustainable livestock production species in many arid regions of the world. Camels are economically important in terms of meat, milk and wool production in the desert. Due to climate change, camel as a desirable animal for arid areas, requires more extensive scientific view. According to FAO statistics, about 95% of 35 million humped camels worldwide are single-humped camels. The cytochrome b sequence is part of the mitochondrial DNA, passing from mother to offspring’s, can be used to elucidate genetic diversity and evolutionary history within and between different species. The aim of this study was to compare the genetic diversity using cytochrome b sequence in Turkmen camel and its genetic relationship with one and two-humped camels. In addition, the genetic relationship of within and between different species of camels has been objected.
    Materials and Methods
    After preparing a blood sample from the abdominal vein of Turkmen camel, DNA extraction was performed using salting out method. Turkmen camel sequencing was performed using Illumina HighSeq 2000. Sequencing creates 150 bp reads of the genome sequence. The reads were assembled by Denovo method using CLC software and the contig of containing the cytochrome b gene was isolated based on the reference gene, NC_009849. Relevant data were obtained to compare the CYTB reference gene in new (Lamini) and old (Camelini) world species of camels. To study the genetic diversity of the camel species, a total of 42 one-humped camels, 31 wild tow-humped camels, 121 domestic tow-humped camels, and wild lamas including 31 guanicoe (Lama guanico) And 6 vicogna-vicogna (vicogna vicogna) and domestic llamas including 6 lama glama and 5 alpaca (Lama pacos) were compared. The alignment of CYTB gene sequence samples of different species was performed using CLC Genomics Workbench 12 software. Then the number of gaps, the number of differences and identities were obtained. A phylogenetic tree was drawn to investigate the genetic relationships between and within species. Sequences of Turkmen camels and other Iranian and Arabian one-humped camels along with other species were analyzed for alignment using CLC software. Phylogenetic tree of DNA and proteins sequences of the gene was performed using Neighbor Joining method with Jukes-Cantor protein distance size with 1000 bootstrap replications.
    Results and Discussion
    DNA extraction based on spectrophotometry was 304 ng/μl and was suitable for sequencing. After sequencing, 589,326,158 readings of 150 base-pairs containing more than 88 billion bases were obtained. Assembling of the obtained reads produced 235978 contigs from which the contig of containing cytochrome b gene was selected based on the reference gene. The sequence of other camel species was extracted from the database and used based on the fact that the data contained the entire cytochrome b gene, which corresponds to 1140 bp of the reference gene. There is the biggest difference between new world of wild and domestic camels. There was a minimal difference between Arabian and Turkmen camels with 100% similarity, followed by Lama Glama and Lama Guanico, as well as between wild and domestic two-humped camels. The Turkmen camel was completely similar to the Arabian camel and had the greatest difference with wild two-humped camels. In the study of Di Rocco et al. (2010) it was shown that the difference of cytochrome b sequence between wild camels (VV and L Cuanicoe) was 6.4%, which in this study was 6.3% which could be due to the larger number of samples in this study. The phylogenetic tree of cytochrome b protein sequence showed that the llamas and one and two-humped camels are located in different branches of the tree. According to the results of DNA phylogenetic tree, llamas were on one side and two-humped camels were on the other side of the tree and one-humped camels were located between them. There was a great diversity within the population of llamas. Some domestic one and two-humped camels are associated with wild two-humped camels. The results indicate that wild two-humped female camels were mated with domestic one and two-humped males that resulted one and two-humped domestic camels phenotype. The same is true of llamas, with domesticated Lama Glama and Lama Pacos locating among the wild species of Lama Guanicoe and Vicogna vicogna phylogenetic branch. Ming et al. (2016) demonstrated that domestic and wild two-humped camel species are genetically distinct from each other. In this study, it was shown that the domestic and wild two-humped camels is phylogenetically close to each other and distanced from one-humped camels. Based on the cytochrome b sequence, Cui et al. (2007) were concluded that one and two-humped camels separated before migrating to Eurasia. Similarly, in this study, it has been shown that one-humped camels are separated from two-humped camels, then wild and domestic two-humped camels are separated from each other. As a result, there is a greater phylogenetic distance between llamas and humped camels.
    Conclusion
    Iranian one-humped camels can be classified into four genetic groups, two of which are originated from wild and domestic two-humped camels and the other two groups are among the one-humped camels. Iranian domestic two-humped camels were also phylogenetically divided into four genetic groups.
    Keywords: Cytochrome b, Genetic diversity, phylogenetic tree, Turkmen camel}
  • کریم نوبری*، کاظم یوسفی کلاریکلائی، رضا کمالی
    شترهای کوهان دار از زمان اهلی شدن آنها در 3000 تا 6000 سال قبل به عنوان منبع تامین گوشت، شیر و پشم بوده و همچنین به عنوان وسیله حمل و نقل در مناطق بیابانی گرمسیری و سردسیری استفاده شداند. ژنوم حلقوی میتوکندری با DNA دو رشته ای از مادر به فرزندان منتقل شده و دارای نوترکیبی پایین و نرخ تکامل بالایی می باشد که بررسی توالی آن معمولا برای درک نرخ تنوع ژنتیک و تاریخچه تکامل استفاده می شود. ژن ATP6 بر روی سنتز ATP و متابولیسم انرژی موثر بوده و می تواند برروی صفات اقتصادی تاثیر گذار باشد. بنابراین، این مطالعه با هدف بررسی درون گونه ای و بین گونه ای توالی ژن ATP6 در شترسانان و مقایسه آنها با شتر ترکمن انجام گرفت. برای این منظور توالی 681 نوکلیوتیدی ژن ATP6 به ترتیب برای 123، 26 و 32 نفر شتر دوکوهانه اهلی، تک کوهانه و دوکوهانه وحشی تهیه گردید. هم ترازی درون و بین گونه های توالی های ژن و ترجمه پروتیینی آنها با استفاده از نرم افزار مربوطه انجام شد. سپس، تنوع ژنتیکی و درخت فیلوژنتیکی درون و بین گونه های شترسانان ترسیم شد. نتایج بررسی درون گونه ای شترها، نشان داد که بیشترین و کمترین تنوع، به ترتیب مربوط به شترهای تک کوهانه و دوکوهانه وحشی است، همچنین، بررسی بین گونه ای نشان داد که برخی از شترهای تک کوهانه قرابت نزدیکی با شترهای دوکوهانه وحشی دارند. این تحقیق نشان داد که تنوع ژنتیکی موجود در ژن ATP6 در گونه شتر تک کوهانه بسیار بیشتر از سایر گونه ها است.
    کلید واژگان: شتر ترکمن, ژن ATP6, تنوع ژنتیکی و درخت فیلوژنتیکی}
    Karim Nobari *, Kazem Yuosefi, Reza Kamali
    Humped species of camel have been used as a source of meat, milk and wool since their domestication around 3000 6000 years ago and they also can be breed and used to transportation in the tropical and cold desert areas. The mitochondrial circular genome with double-stranded DNA passes from mother to offspring and has a low recombination and high evolution rate, the sequence of which is commonly used for elucidate rate of genetic diversity and evolutionary history. According to the effect of ATP6 gene on ATP synthesis and energy metabolism, it can be affect economical traits. Therefore, the aim of this study was to investigate inter and intra species consideration of the ATP6 gene in camels and compare them with Turkmen camels. For this reason, sequence of ATP6 gene with 681 nucleotide in length were prepared for 123, 26 and 32 one-humped, domestic and wild two-humped camels, respectively. Sequence alignment and phylogenetic tree of gene and protein for inter and intra species of the camels were constructed using CLC Genomics Workbench 21 software. Then, genetic diversity and phylogenetic tree within and between camel species were constructed. Results showed that the one-humped and wild two-humped camels had the highest and the lowest diversity also, some of one-humped camels was closely related to the two humped wild camels. This study showed that the genetic diversity of ATP6 gene in one-humped camel species is much higher than other species.
    Keywords: Turkmen camel, ATP6 gene, genetic diversity, phylogenetic tree}
  • مژده موسی نژاد خبیصی، علی اسمعیلی زاده*، مسعود اسدی فوزی
    مقدمه و هدف

     از آنجاییکه، سطح بالای میزان همخونی در حیوانات اهلی، منجر به کاهش تنوع ژنتیکی و افزایش احتمال هموزیگوت بودن برای آلل‌های مضر می‌شود. بنابراین، طول عمر حیوانات همخون به دلیل کاهش شایستگی ژنتیکی، کاهش می‌یابد. فلذا، در طراحی برنامه‌های اصلاح نژادی پیش آگاهی از میزان همخونی برای کنترل افزایش همخونی و پیامدهای منفی همخونی ضروری است. در این راستا، برای برآورد ضرایب همخونی می‌توان از داده‌های ژنومی استفاده کرد. هدف از انجام پژوهش حاضر، بررسی میزان همخونی با استفاده از اطلاعات نشانگرهای SNP  موجود در سراسر ژنوم حاصل از آرایه Illumina OvineSNP600K در گوسفندان بومی ایران بود.

    مواد و روش‌ها

    در این تحقیق، همخونی ژنومی تعداد 154 نمونه شامل 11 نژاد گوسفندان بومی ایران (کرمانی، بلوچی، افشاری، قره گل، سنجابی، سیاه‌کبود، لری بختیاری، شال، قزل، کیوسی و کبوده شیراز) مورد بررسی قرار گرفت. برای این منظور، از پنج روش مختلف با استفاده از نرم‌افزار پلینک استفاده شد: شاخصهای مولکولی ضریب همخونی  مبتنی بر هتروزیگوسیتی مشاهده شده و مورد انتظار (FIS)، ضریب همخونی مبتنی بر هموزیگوسیتی (FROH)، ضریب همخونی مبتنی بر ماتریس روابط ژنومی (FGRM)، ضریب همخونی بر اساس تعداد ژنوتیپ‌های هموزیگوت مشاهده شده و مورد انتظار (FHOM) و همبستگی گامت‌های ترکیب شونده(FUNI) .

    یافته‌ها

    میانگین فراوانی آلل نادر در گوسفندان بومی ایران 0/268 بود. همچنین، میانگین هتروزیگوسیتی مشاهده شده و مورد انتظار به ترتیب 0/341 و0/360 بدست آمد. کمترین میزان همخونی بر اساس FIS مربوط به نژاد بلوچی و بیشترین مربوط به نژاد شال بود. بیشترین میزان FROH (0/129) در گوسفند نژاد کرمانی و کمترین مقدار آن (0/019) در گوسفند نژاد بلوچی مشاهده شد. همچنین، بیشترین میزان شاخصهای FGRM، FHOM و FUNI مربوط به نژاد کرمانی و کمترین مربوط به نژاد بلوچی بود. بیشترین پوشش ROH در کروموزوم 26 (20/23%) مشاهده شد، در حالیکه کمترین آن در کروموزوم 2 (6/62%) بود.

    نتیجه‌گیری

    تنوع ژنتیکی گوسفندان بومی ایران متوسط و از 0/315 تا 0/354 بود. ROH در همه نژادها یافت شد بطوریکه، میانگین طول قطعات ROH بین 48 تا 318 مگاباز و متوسط تعداد قطعات ROH بین 8 تا 53 متغیر بود. میانگین ضرایب همخونی ژنومی برای کل جمعیت گوسفندان بومی مشابه (0/05) محاسبه گردید. نتایج این تحقیق بیانگر عدم سطح بالای هم خونی ژنومی در اکثر توده های گوسفند بومی ایران است.

    کلید واژگان: چند شکلی تک نوکلئوتیدی 600K, گوسفندان بومی ایران, همخونی ژنومی, هتروزیگوسیتی}
    Mozhdeh Moosanezhad Khabisi, Ali Esmailizadeh*, Masood Asadi Fozi
    Introduction and Objective

    Whereas high levels of inbreeding in domestic animals reduce genetic diversity and increase the probability of animals being homozygous for deleterious alleles. Therefore, the longevity of inbred animals is decreased due to reduced genetic merit. Therefore, in designing breeding programs, preknowledge about the level of inbreeding is essential to control the increase in inbreeding and thus control the inbreeding depression in animals. In this regard, genomic data can be used to estimate inbreeding coefficients. The aim of this study was to investigate the rate of inbreeding using SNP marker data available throughout the genome from the Illumina OvineSNP600K array in Iranian native sheep.

    Material and Methods

    In this study, the genomic inbreeding of 154 samples including 11 Iranian sheep breeds (Kermani, Baluchi, Afshari, Karakul, Sanjabi, SiahKabud, LoriBakhtiari, Shal, Ghezel, Chios, GrayShiraz) was studied. For this purpose, five different methods were used by using Plink software: molecular indices of inbreeding coefficient based on observed and expected heterozygosity (FIS), inbreeding coefficient based on “runs of homozygosity” (FROH), inbreeding coefficient based on genomic relationship matrix (FGRM), inbreeding coefficient Based on the number of observed and expected homozygous genotypes (FHOM) and the correlation between uniting gametes (FUNI).

    Results

    The average minor allele frequency in Iranian native sheep was 0.268. Also, the mean of observed heterozygosity and expected heterozygosity was 0.341 and 0.360, respectively. The lowest rate of inbreeding according to FIS was related to Baluchi breed and the highest was related to Shal breed.  The highest amount of FROH (0.129) was observed in Kermani breed and the lowest amount (0.019) was observed in Baluchi breed. Also, the highest amount of FGRM, FHOM and FUNI indices was observed in Kermani breed and lowest amount was related to Baluchi breed. The highest ROH coverage was observed on chromosome 26 (20.23%), while the lowest was on chromosome 2 (6.62%).

    Conclusion

    The genetic diversity of Iranian native sheep was moderate and ranged from 0.315 to 0.354. ROH was found in all breeds, so that the average length of ROH was between 48 to 318 Mb, while the average number of ROH was between 8 to 53. The mean of genomic inbreeding coefficients for the whole population of native sheep were similar (0.05). The results of this study indicate that there is no high level of genomic inbreeding in most of the native sheep populations of Iran.

    Keywords: Genomic inbreeding, Genetic diversity, Heterozygosity, Iranian native sheep, Single nucleotide polymorphism 600K}
  • محمدرضا بحرینی بهزادی*، محمد کشاورزپور

    هدف از انجام پژوهش حاضر بررسی ساختار ژنتیکی جمعیت با استفاده از تحلیل شجره و همچنین پسروی ناشی از هم خونی صفات رشد در گوسفندان ایران بلک بود. از اطلاعات شجره و رکوردهای صفات وزن تولد، وزن شیرگیری، وزن شش ماهگی، وزن نه ماهگی و وزن یک سالگی مربوط به 5481 راس دام که طی سال های 1362 تا 1390 در ایستگاه اصلاح نژاد عباس آباد مشهد جمع آوری شده بود استفاده شد. برای برآورد ضرایب همخونی از نرم افزار CFC و برای سایر تحلیل های شجره از نرم افزار Endog (نسخه 8/4) و برای بررسی اثر هم خونی بر صفات رشد از نرم افزار WOMBAT استفاده شد. تعداد حیوانات بنیان گذار، تعداد موثر حیوانات بنیان گذار، تعداد موثر اجداد، تعداد موثر ژنوم حیوانات بنیان گذار، تعداد موثر ژنوم حیوانات غیربنیان گذار به ترتیب 167، 22، 17، 11 و 22 راس بود. متوسط هم تباری، متوسط رابطه خویشاوندی و متوسط ضریب هم خونی به ترتیب 71/4، 42/9 و 80/4 درصد برآورد شد. فاصله نسل 85/4 سال و اندازه موثر جمعیت با استفاده از روش افزایش هم خونی فردی 26 راس محاسبه شد. میانگین فاصله نسل در مسیر تولیدمثلی پدر- نتاج بیشتر از مسیرهای مادر- نتاج بود. همچنین نیمی از تنوع ژنتیکی جمعیت از 6 راس از اجداد منشا گرفته است. پسروی ناشی از هم خونی صفات وزن تولد، وزن شیرگیری، وزن شش ماهگی، وزن نه ماهگی و وزن یک سالگی به ترتیب 3/10، 6/130، 8/491، 5/525 و 7/414 گرم به دست آمد. نتایج نشان دهنده ی کاهش تنوع ژنتیکی جمعیت مورد مطالعه در مقایسه با حیوانات بنیان گذار بود و پسروی ناشی از هم خونی مشاهده شده نیز تاییدکننده ی آن است.

    کلید واژگان: اندازه موثر جمعیت, تنوع ژنتیکی و صفات رشد}
    MohammadReza Bahreini Behzadi *, Mohammad Keshavarzpour

    The aim of the current project was study of population structure using pedigree analysis and also inbreeding depression of growth traits in Iran-Black sheep. Pedigree information related to 5481 animals and records of body weights at birth, weaning, six-month, nine-month and yearling, collected from 1982 to 2011 at Abbasabad Sheep Breeding Station in Mashhad, were used. Calculation of inbreeding coefficients was done by CFC, and Endog (v4.8) to compute other pedigree analyses, and WOMBAT software was used for estimating the inbreeding depression of growth traits. The total number of founders, the effective number of founders, the effective number of ancestors, the effective number of founder genomes, and the effective number of non-founder genomes, were 167, 22, 17, 11, 22 heads, respectively. The estimated average for coancestry, relationship and inbreeding coefficients was 4.71, 9.42 and 4.80 percent, respectively. The generation interval and the effective population size based on individual increase in inbreeding were 4.85 years and 26 heads, respectively. The average generation interval in the sire-progeny pathway was greater than the dam-progeny pathway. Also, half of the genetic diversity of the study population originated from 6 ancestors. The inbreeding depression for body weight traits at birth, weaning, six, nine and 12 months of age were 10.3, 130.6, 491.8, 525.5 and 414.7 g, respectively. The results showed a decrease in genetic diversity of the study population compared to the founder animals and observed inbreeding depression in the studied traits could also confirms it.

    Keywords: Effective population size, genetic diversity, Growth Traits}
  • محمد توکلی، علیرضا نوشری*، بهزاد همتی

    ژن های کمپلکس اصلی سازگاری بافتی (MHC) به واسطه ارتباط با پاسخ های ایمنی و مقاومت و یا حساسیت به بیماری ها اهمیت ویژه ای در پرورش اسب دارند. هدف از این تحقیق شناسایی چندشکلی های موجود در ناحیه ای ازاگزون این ژن و مطالعه ی جمعیتی در این جایگاه می باشد. برای این منظور تعداد 120 راس اسب به طور تصادفی از 4 نژاد تروبرد، الدنبرگ، اسبچه خزر و عرب مطالعه گردید. استخراج DNA ژنومی از نمونه های خون انجام و واکنش زنجیره ای پلیمراز  برای تکثیر قطعه 309 جفت بازی ژن MHC انجام شد. محصول واکنش زنجیره ای پلیمراز برای انجام واکنش PCR-RFLP و تعیین ژنوتیپ به وسیله آنزیم برشی RsaI  تحت هضم قرار گرفت. نتایج این تحقیق نشان دهنده وجود سه آلل  A، Bو Cو شش نوع ژنوتیپAA ،AB ،AC، BB ، BCوCC  به ترتیب با فراوانی های آللی  3208/0، 3208/0 و 3584/0  و فراوانی های ژنوتیپی 05/0، 25/0، 2917/0، 1333/0، 125/0 و 15/0 درمجموع نژادهای مورد مطالعه بوده است. بیشترین و کمترین فراوانی آللی در نژادهای تروبرد، الدنبرگ، اسبچه خزر و عرب به ترتیب متعلق به آلل های B، A، A، C و A، B، B، A بوده است. نتایج بررسی برقراری تعادل هاردی واینبرگ در این تحقیق با استفاده از آزمون های  G2 و X2 نشان دهنده برقراری تعادل هاردی واینبرگ در نژادهای الدنبرگ و اسبچه خزر و عدم تعادل در نژادهای تروبرد و عرب بوده است. با استفاده از یافته های این تحقیق می توان از تنوع ژنتیکی موجود در نژادهای مورد مطالعه به عنوان یک منبع قابل استفاده در برنامه های اصلاح نژادی استفاده نمود.

    کلید واژگان: تنوع ژنتیکی, تروبرد, الدنبرگ, اسبچه خزر, عرب, کمپلکس اصلی سازگاری بافتی}
    Mohammad Tavakoli, Alireza Noshary *, Behzad Hemmati

    The major histocompatibility complex (MHC) genes are very important in horse breeding according to relationship with immunity response and resistance or susceptibility to disease. The aim of this research is study of polymorphism possible in exon gene region and population genetics. To do this, 120 horses were selected randomly from Thoroughbred, Oldenburg, Caspian pony and Arab breeds. Genomic DNA was extracted via blood samples and polymerase chain reaction was done for a 309 bp MHC gene region. The PCR products were digested by RsaI restriction endonuclease for genotyping determination. Results show that there were three allele of A, B and C and six types of genotype of AA, AB, AC, BB, BC and CC with 0.3208, 0.3208 and 0.3584 allele frequency and 0.05, 0.25, 0.2917, 0.1333, 0.125 and 0.15 genotype frequency in all studied samples respectively. The most and least allele frequency in Thoroughbred, Oldenburg, Caspian pony and Arab are related to B, A, A, C and A, B, B, A alleles respectively. The Hardy-Weinberg equilibrium study by X2 and G2 tests shows the equilibrium situation in Oldenburg and Caspian pony breeds and non-equilibrium situation in Thoroughbred and Arab breeds. The overall results shows that the genetic diversity in studied samples can be used as a resource for horse breeding programs.

    Keywords: : genetic diversity, Thoroughbred, Oldenburg, Caspian pony, Arab, MHC}
  • محمد عبدلی، محمدباقر زندی*، طاهر هرکی نژاد، مسعود خلیلی

    هدف از این پژوهش بررسی ساختار ژنتیکی اسب های بومی ایران با استفاده از 11 نشانگر ریزماهواره انجمن بین المللی ژنتیک حیوانات (ISAG) برای مقایسه تنوع ژنتیکی و درک روابط بین جمعیت ها مورد بررسی قرار گرفت. بدین منظور از بانک اطلاعاتی فدراسیون سوارکاری کشور تعداد 565 اسب از سنین مختلف(6 ماهگی الی 25 سالگی) از نژادهای اسب عرب اصیل، کاسپین، دره شوری، کرد و ترکمن هر کدام به تعداد 113 راس انتخاب شدند. تعداد الل های مشاهده شده برای هر جایگاه از هفت تا 19 الل و با میانگین 10/81 الل بود که جایگاه ASB17 با 19 الل و جایگاه HTG4 با هفت الل به ترتیب دارای بیشترین و کمترین تعداد الل بودند. مقادیر میانگین هتروزیگوسیتی مشاهده شده از بزرگترین به کوچکترین، متعلق به نژاد ترکمن (0/110 ± 0/68)، کاسپین (0/07 ± 0/67)، کرد (0/06 ± 0/66)، دره شوری (0/07 ± 0/65)، و عرب اصیل (0/08 ± 0/62) بود. در بررسی ساختار جمعیتی به روش جفت گروهی غیروزنی با کمک میانگین حسابی (UPGMA)، جمعیت های کاسپین و کرد با یکدیگر در یک گروه ژنتیکی و سایر جمعیت ها نیز در گروه های جداگانه ای قرار گرفتند. نتایج حاصل از این پژوهش، این فرضیه که جمعیت های کاسپین و کرد به اسب های نسایی نزدیک هستند را تایید کرد بطور کلی نتایج بدست آمده از این مطالعه نشان دهنده تنوع ژنتیکی بالا علیرغم علی رغم وجود شباهت ژنتیکی در برخی از جمعیت های اسب مورد مطالعه است. و از طرفی گروه بندی ژنتیکی جمعیت ها با مناطق جغرافیایی آنها همسان می باشد. نتایج حاصل از ریزماهواره ها بیانگر چندشکلی بودن و کارآمدی بالای جایگاه های مورد استفاده در آزمایشات مطالعات تعیین نژاد، تنوع و ساختار ژنتیکی برای اسب های بومی کشور می باشد.

    کلید واژگان: اسب های بومی ایران, تنوع ژنتیکی, ساختار ژنتیکی, نشانگرهای ریزماهواره, هتروزیگوسیتی}
    Mohammad Abdoli, Mohammad Bagher Zandi *, Taher Harkinezhad, Masoud Kahlili

    The aim of this study was to investigate the genetic structure of Iranian native horse breeds to compare genetic diversity and understanding the relationships between the populations using 11 ISAG microsatellite markers. For this reason, 565 samples of the Iranian Equestrian database from different ages including the Iranian Arab Asil, Caspian, Darehshouri, Kurdish and Turkmen and 113 samples were used for each breed. The number of observed alleles for each locus was 7 to 19 alleles with an average of 10.81 alleles, and it was 19 for ASB17 and 7 for HTG4 locus with the highest and lowest observed alleles ranking respectively. The average observed heterozygosity from the largest to the lowest rank was, Turkmen (0.68±0.11), Caspian (0.67±0.07), Kurdish (0.66±0.06) Darehshouri (0.65±0.07), and Arab Asil (0.62±0.08). Population structure analysis with UPGMA method showed that Caspian and Kurdish populations were grouped as a unit cluster while the other populations grouped as a separate cluster. These results confirmed this hypothesis that the Caspian and Kurdish populations are close to the Nisa horses. In general, the results of this study indicate that the Iranian native horses have got a high genetic diversity, despite of populations have genetic similarity and the other hand genetic clustering of the populations is consistent with their geographic distances. The result of this study shows that the ISAG microsatellite markers are polymorphic and have more efficiency for assignment genetic diversity and genetic structure analysis of Iranian native horse breeds.

    Keywords: Genetic diversity, genetic structure, heterozygosity, Iranian Native Horse Breeds, microsatellite markers}
  • بتول اصغری اسفدن، غلامرضا داشاب*، محمدحسین بنابازی، محمد رکوعی

    جهش در طول توالی ژن ها سبب بروز تغییرات نوکلیوتیدی و درنتیجه ایجاد عملکرد جدید در ژن ها می شود. هدف از مطالعه حاضر، ارزیابی تنوع ژنتیکی و تحلیل بیان متفاوت ژن های مرتبط با سیستم ایمنی در بین دو جمعیت گاوهای نژاد خالص و آمیخته سیستانی و مونت بیلیارد بود. در این مطالعه از نتایج مربوط به آنالیز بیان افتراقی در بین جمعیت گاو های نژاد خالص و آمیخته سیستانی و مونت بیلیارد با استفاده از داده های RNA-Seq جهت تجزیه ژنتیکی و ترسیم درخت فیلوژنتیکی استفاده شد. توالی های نوکلیوتیدی با روش ClustalW توسط نرم افزار MegaAlign هم ردیف سازی شدند و درخت فیلوژنتیکی و ماتریس تفاوت و تشابه توالی ها ترسیم  شد. بر اساس نتایج این تحقیق، میانگین اختلاف نوکلیوتیدها و تعداد کل جهش ها برای ژن های مورد مطالعه در بین جمعیت های گاو نژاد خالص و آمیخته سیستانی و مونت بیلیارد به ترتیب در محدوده ی (2598/66-186) و (3898-74) قرار داشت. هم چنین، نواحی حفاظت شده بخش اندکی از توالی ژن های مورد مطالعه را تشکیل دادند که این امر نشان دهنده چند شکلی بالای این ژن ها و هم چنین مستعد بودن به تغییرات نوکلیوتیدی و جهش می باشد. نتایج حاصل از درخت فیلوژنی توالی نوکلیوتیدی ژن های مورد مطالعه نشان داد که تنوع ژنتیکی و واگرایی برای ژن های مورد مطالعه در بین جمعیت های گاو نژاد خالص، آمیخته سیستانی و مونت بیلیارد و ایندیکوس وجود دارد. میزان عددی نسبت جایگزینی dN/dS برای ژن های مورد مطالعه نشان دهنده انتخاب مثبت این ژن ها بود.

    کلید واژگان: تکامل, تنوع ژنتیکی, جهش, فیلوژنتیک, گاو سیستانی}
    Batol Asghariesfeden, Gholam Reza Dashab*, MohammadHossein Banabazi, Mohammad Rokouei

    Mutations during gene sequencing lead to nucleotide changes, resulting in new function in gene. The aim of the present study was to evaluate the genetic diversity and analysis the reasons for the differential expression of immune-related genes between the two populations of purebred and crossbreed Sistani and Montebeliarde cows. In this study, the results of the analysis of differential expression among the population of purebred and crossbreed Sistani and Montebeliarde cows using RNA-Seq data were used for genetic analysis and phylogenetic tree mapping. Clustal W nucleotide sequences were aligned using the MegaAlign software, and the phylogenetic tree and matrix of differences and similarities of the sequences were plotted. Based on the results of this study, the mean difference between nucleotides (nucleotide divergence) and the total number of mutations for the studied genes among purebred and crossbreed Sistani and Montebeliarde populations were in the range (2598-1869) and (3898-74) . Also, conserved regions make up a small part of the sequence of genes studied, indicating a high polymorphism of these genes and their susceptibility to nucleotide changes and mutations. The results of the phylogenetic tree for the nucleotide sequence of the studied genes showed that there is genetic diversity and divergence in the studied genes among purebred and crossbreed Sistani and Montebilliard and Indicus populations. The numerical value of the dN/dS ratio for the studied genes indicated the positive selection for these genes.

    Keywords: Evolution, Genetic diversity, Mutations, Phylogenetic, Sistani cows}
  • منا هاشمی*، قدرت رحیمی میانجی، محمدحسین بنابازی، پابلو اوروزکو ترونگل، فیلیپو بیسکارینی
    سابقه و هدف

    ریزماهواره‌ها نواحی تکراری در دی.ان.آشامل آرایه‌های همگنی از موتیف‌های مونو، دی، تری، تترا، پنتا و هگزا نوکلیوتیدی با طول کمتر از یک کیلو جفت باز هستند که به صورت غیر تصادفی در سطح ژنوم پراکنده‌اند. تعداد و تراکم ریزماهواره‌ها در گونه‌های مختلف متفاوت است. حتی در گونه های بسیار نزدیک به هم مثل انسان و شامپانزه نیز تفاوت هایی وجود دارد. فراوانی موتیف‌های ریزماهواره‌ایی نیز در موجودات مختلف، متفاوت و دارای نرخ جهش متفاوتی می‌باشند. در ژنوم پستانداران، ریزماهواره‌های دی نوکلیوتیدی فراوانترین و پس از آنها ریزماهواره های مونو و تترا نوکلیوتیدی از وفور بالایی برخوردارند. تکرارهای تری نوکلیوتیدی معمولا در گیاهان فراوان‌تر هستند. اما بررسی اثراین موتیف‌های ریزماهواره‌ای متفاوت روی برآورد پارامترهای تنوع ژنتیکی و یا ساختار ژنتیکی در جمعیت‌ها بحثی است که کمتر به آن توجه شده است.

    مواد و روش‌ها:

    این پژوهش با استفاده از فایل نشانگرهای ریزماهواره‌ای حاصل از 36 نمونه از گوسفندان اهلی و وحشی ایرانی از توالی کل ژنوم گوسفندان به روش توالی یابی نسل جدید، تعداد 163973 نشانگر ریزماهواره را شناسایی شد. پراکنش نمونه های اهلی مربوط به نواحی شمال غرب کشور و نمونه های وحشی مربوط به نواحی مرکزی و شمال غرب کشور می باشند. پس از طی مراحل مختلف جهت مرتب سازی و فیلتراسیون جایگاه‌ها در نرم افزارهای Samtools و VCFtools نشانگرها در چهار فایل جداگانه شامل نشانگرهای دی، تری و تترا نوکلیوتیدی و نیز فایلی حاوی ترکیبی از هرسه نشانگر دسته بندی شدند. سپس اسکریپتی در نرم افزار R جهت تهیه زیرمجموعه‌های مختلفی شامل10، 20، 30، 40، 50، 60، 70، 80، 90، 100، 150، 200، 250، 300، 400 و 500 نشانگر از هر یک از انواع موتیف‌ها تهیه نوشته شد و شش پارامتر معمول مورد استفاده در مطالعات تنوع ژنتیکی از جمله هتروزیگوسیته مشاهده شده، هتروزیگوسیته مورد انتظار، شاخص تنوع ینی، شاخص شانون، غنای آللی و ضریب همخونی با استفاده از هر یک از انواع موتیف‌ها و تعداد مختلفی از ریزماهواره‌ها در نرم افزار MSA (نسخه 4.05) محاسبه شد. برای هر پارامتر 10 تکرار در نظر گرفته شد. در نهایت میانگین و واریانس هر پارامتر در بین 10 تکرار محاسبه و نتایج به صورت نمودارهای باکس پلات در نرم افزار R (نسخه 3.3.3) گزارش شد. برای بررسی آماری اختلاف‌هایی که در مقدار برآورد پارامترهای مختلف با استفاده از تعداد و انواع مختلف موتیف‌های ریزماهواره‌ای مشاهده شد، از روش تحلیل واریانس برای آزمون فرض مقایسه میانگین زیرمجموعه‌های مختلف در نرم افزار R استفاده شد.

    یافته‌ها

    برآورد شش پارامتر با استفاده از تعداد و موتیف‌های مختلف نشانگرهای ریزماهواره‌ایی نتایج متفاوتی را نشان دادند. به طوریکه در هر زیر مجموعه، پارامتر برآورده شده با استفاده از موتیف‌های نوع دی مقدار عددی بالاتری را به خود اختصاص داد. همینطور در اکثر پارامتر‌های مورد بررسی بیشترین مقدار برآورده شده برای آن پارامتر با استفاده از 40 نشانگر دی نوکلیوتیدی و کمترین آن با استفاده از 10 نشانگر تری و یا تترا نوکلیوتیدی به دست آمده است. برای بررسی وجود اختلاف معنی دار در نتایج به دست آمده از برآورد پارامترها با استفاده از تعداد و انواع مختلف موتیف‌های ریزماهواره‌ای از تکنیک آنالیز واریانس برای مقایسه میانگین‌ها استفاده شد. در مواردی که اجرای مدل نتایج معنی داری نشان داد به منظور بررسی دوبه‌دوی زیرمجموعه‌هایی که با یکدیگر اختلاف معنی دار نشان دادند از روش مقایسه میانگین توکی استفاده شد.

    نتیجه گیری

    نتایج این پژوهش برتری استفاده از موتیف های نوع دی نوکلیوتیدی در مطالعات تنوع ژنتیکی بر جمعیت‌ گوسفند را نشان داد. همینطور نتایج این پژوهش لزوم استفاده از حداقل 50 جایگاه ریزماهوره‌ای را برای داشتن برآوردهایی باثبات از پارامترهای جمعیتی در مطالعات تنوع ژنتیکی پیشنهاد میدهد

    کلید واژگان: تنوع ژنتیکی, موتیف های ریزماهواره ایی, نشانگرهای ریزماهواره, گوسفند}
    Mona Hashemi *, Godrat Rahimi Mianji, MohammadHossein Banabazi, Pablo Orozco Ter Wengel, Filippo Biscarini
    Background and objective

    Microsatellites are repetitive regions in DNA including homogeneous array of mono, di, tri, tetra, penta and hexa nucleotides with length of less than 1 Kbp which are non-randomly distributed in genome. The number and density of microsatellites is vary within species even in very close spices such as humans and chimpanzees. The frequency of microsatellite motifs and their mutation rate is reported differently in various organisms. In mammalian genomes di-nucleotide microsatellites are the more abundant type following by mono and tetra microsatellite motifs as next. Tri microsatellites are more frequent in plants. However, the effect of variety in microsatellite motifs on genetic diversity or population structural parameters is a topic that has received less attention.

    Material and methods

    In the present study with using the 36 VCf file of microsatellite markers extracted from whole genome of Iranian sheep “Ovis aries and Ovis orientalis” by NGS, the total number of 163973 microsatellite markers were detected. The distribution of Ovis aries samples is from north-west part of Iran and ovis orientalis samples are belongs to central part and north-west of Iran. After rearrangement and filtration on data file using Samtools and VCFtools softwares, we classified the whole markers on four different motif types including di- tri- and tetra-nucleotide microsatellites and a file includes all three microsatellite types. Several subsets including 10, 20, 30, 40, 50, 60, 70, 80, 90, 100, 150, 200, 250, 300, 400 and 500 markers were generated from each microsatellite motif types using a R script. Six common genetic diversity parameters including observed and expected heterozygosity, Nei diversity index, Shanon index, Allelic richness and FIS were calculated for each different subset of number and motif type of microsatellites in MSA (V.4.05) software. 10 replications were considered for each parameter. The mean and variance were calculated among 10 replications and results were represented by boxplots using R (v.3.3.3). The statistical investigation of parameter estimation differences using different microsatellite number and motif types were analyzed using ANOVA for testing the hypothesis of equality of means in R (v.3.3.3).

    Results

    Estimation of all six parameters revealed various results using different number of loci as well as motif types. Additionally, the results revealed higher values for parameters estimated with di microsatellite motifs compared to others. In addition, the highest and lowest value for most parameters were obtained by 40-di and 10-tri/tetra microsatellites respectively. The statistical significance on findings of parameter values using different number/motif of microsatellite markers were analyzed using ANOVA in R (v.3.3.3). In the case with significant results, Tukey Honestly Significant Difference test was used to test pairwise contrasts between different subsets.

    Conclusion

    Our result proposes a better application of di microsatellites for genetic diversity studies in sheep populations. Moreover, results showed that for stable estimation of population parameters in genetic diversity studies a minimum of 50 microsatellite loci are needed.

    Keywords: genetic diversity, microsatellite motifs, microsatellite markers.Sheep}
  • Hasan Baneh, Ali Javanrouh, Seyed Abu Taleb Sadeghi, MohammadSadegh Yazdanshenas, Ajoy Mandal, Javad Ahmadpanah, Yahya Mohammadi *

    Characterization of population structure and genetic diversity of Adani goats of Iran was assessed through pedigree analysis by using the pedigree data on 2535 kids (offspring of 748 does and 106 bucks), collected for a period of 12 years (2003 through 2014). The kids born during 2011 to 2014 were considered as the reference population. A small proportion of kids (4.10%) were inbred with mean inbreeding coefficients of 0.31 and 7.68 % for the whole and inbred populations, respectively. The mean of generation interval, computed from four gametic pathways including sire-son, sire-daughter, dam-son and dam-daughter, was 2.87 years, with a longer interval from dam-progeny pathway relative to the sire-progeny ones. The effective population size estimated from the individual rate in inbreeding was 45.6. Probability of gene origin measures including the effective numbers of founders (fe), ancestors (fa), founder genomes (fg) and non-founder genomes (fng) were 26, 25, 18 and 70, respectively. Approximately, 50% and 75 % of the total genetic variations were explained by the first 11 and 37 influential ancestors, with a maximum individual contribution of 11.8%. The ratio of fe to fa, as a measure of bottleneck, was 1.04. The average values for genetic conservation index (GCI) in whole, male and female individuals were 2.57, 2.85 and 2.36, respectively. The results revealed that although 3% of the total heterozygosity had been lost from the population, a considerable genetic variability still existed in the population of Adani goats.

    Keywords: Adani goats, pedigree, Inbreeding, ancestral contribution, genetic diversity}
  • احمد ابراهیم زاده آله آباد، خدیجه نصیری، زهرا رودباری*

    امروزه ژن های موجود در ژنوم میتوکندریایی به عنوان نشانگر ژنتیکی قوی به صورت گسترده کاربرد دارند. هدف از این مطالعه، توالی یابی ناحیه ND6 ژنوم میتوکندری مرغ خزک و بررسی رابطه فیلوژنتیکی این ناحیه از مرغ بومی خزک با دیگر نژاد های مرغ و برخی از ماکیان بود. برای این منظور نمونه خون از ورید بال 20 قطعه مرغ خزک از پژوهشکده دام های خاص استان سیستان و بلوچستان جمع آوری شد. استخراج DNA از خون کامل انجام گرفت. سپس ژن ND6 به همراه بخشی از tRNA بالادست و پایین دست (854 جفت باز) توسط آغازگرهای اختصاصی در واکنش زنجیره ای پلیمراز تکثیر شد. نمونه ها پس از خالص سازی توالی یابی شدند و تنوع ژنتیکی درون جمعیتی مورد بررسی قرار گرفت. در ادمه، پس از گرفتن 19 توالی مشابه ژنوم میتوکندریایی مربوط به سایر نژادهای مرغ و برخی از ماکیان از بانک جهانی ژن، تجزیه و تحلیل فیلوژنتیک انجام گرفت. نتایج بدست آمده نشان داد که هیچ تفاوت نوکلیوتیدی بین توالی های نوکلیوتیدی ND6 مرغ های بومی خزک وجود نداشت. نتایج حاصل از رسم درخت فیلوژنتیک مرغ بومی خزک با دیگر نژادها نشان داد که بیشترین تشابه ژنتیکی این ناحیه از ژنوم میتوکندری مرغ خزک با نژاد مرغ های هوانگ لانگ، ژوسیانگ، فیجی، فلیپین، هانگشان زرد، جینو ووفنگ، مرغ جنگلی قرمز و مرغ اهلی مشاهده می شود. نتایج نشان دهنده قرابت ژنتیکی زیاد بین مرغ بومی خزک با مرغ های ژاپن و چین (جنوب شرقی آسیا) می باشد. کمترین تشابه ژنتیکی این ناحیه از مرغ بومی خزک با پرنده ماهی خوار تاج قرمز مشاهده شد.

    کلید واژگان: مرغ خزک, درخت فیلوژنتیک, تنوع ژنتیکی, ژن ND6}
    Ahmad Ebrahimzadeh-Alahabad, Khadijeh Nasiri, Zahra Roudbari *

    Today, genes in the mitochondrial genome are widely used as a strong genetic marker.The purpose of this study was to determine sequence of ND6 gene of the mitochondrial genome of Khazak chicken and investigate the phylogenetic relationship of this region of the genome with other chicken breeds and some fowls of around the world. 20 blood samples of wing vein were collected from Khazak chicken of Research Center of specific livestock of Sistan and Baluchestan province. DNA was extracted from whole blood. Then, the ND6 gene along with a portion of upstream and downstream tRNA (854 bp) was amplified from mitochondrial genome by specific primers in Polymerase Chain Reaction. Samples were sequenced after purification and genetic diversity was investigated within the population. After Download similar sequences of the other mitochondrial genome from the chicken breeds and some fowls of the NCBI, phylogenetic analysis was carried out. The results showed that there was no nucleotide difference between ND6 sequences of native Khazak chicken. The results of the phylogenetic tree from native Khazak chicken with other breeds showed that the highest genetic similarity was observed from this region of the mitochondrial genome of native Khazak chicken with HuangLang, Zhuxiang, Fiji, Philippines, Hengshan Yellow, Jinhu Wufeng and Red jungle fowl breeds which indicates that there are a high genetic relationship between the native Khazak chicken with the Japanese and Chinese (southeastern Asia) chicken breeds. The least genetic similarity of ND6 sequence from native Khazak chicken was observed with the Grus japonesis.

    Keywords: Khazak Chicken, Phylogenetic tree, Genetic diversity, ND6 gene}
  • سروین جباری، محمدرضا مشایخی*، علی حسن پور، بهزاد شیرمحمدلی

    اسب حیوانی است که در طول تاریخ همواره کنار انسان بوده و در تشکیل تمدن بشری نقش مهمی داشته است. نژادهای متنوعی از این حیوان در سراسر جهان وجود دارد که ازلحاظ ظاهری با یکدیگر تفاوت دارند. امروزه پژوهشگران از نشانگرهای مولکولی مانند STR های معرفی شده از سوی انجمن ژنتیک حیوانات، جهت مطالعات ژنتیکی و تعیین اصل و نسب استفاده می کنند که می توانند خطاها را به حداقل برساند. در این مطالعه، تنوع ژنتیکی 50 راس اسب نژاد عرب موردبررسی قرار گرفت. برای این منظور از نشانگرهای ریز ماهواره پیشنهادی ISAG استفاده شد. این نشانگرها شامل ریز ماهواره های ASB17، LEX3، HMS1، CA425 می باشند. این جایگاه ها توسط روش مولتی پلکس PCR با چهار جفت پرایمر نشان دار به رنگ فلورسانس تکثیر شدند. سپس اندازه محصولات حاصل از PCR توسط الکتروفورز مویینه جداسازی و موردبررسی قرار گرفتند. پس از آنالیز داده ها، نتایج نشان داد که تعداد آلل های مشاهده شده برای هر جایگاه از 5 تا 9 آلل متغیر بود. بیشترین تعداد آلل مربوط به نشانگر LEX3 با 9 آلل بود و بیشترین مقدار هتروزیگوسیتی را نشانگر ASB17 دارا بود. جایگاه CA425 دارای 5 آلل بود که کمترین تعداد آلل در میان جایگاه های بررسی شده را داشت و جایگاه LEX3 دارای پایین ترین مقدار هتروزیگوسیتی بود. همچنین بیشترین مقدار PIC و نیز شاخص شانون برای جایگاه LEX3 و کمترین مقدار برای جایگاه CA425 مشاهده شد. نتایج حاصل از این مطالعه نشان داد که تنوع ژنتیکی جمعیت اسب های عرب، فراوانی بسیار بالایی در مقایسه با سایر نژادهای اسب دارد.

    کلید واژگان: اسب عرب, تنوع ژنتیکی, مولتی پلکس PCR, STR}
    sarvin jabbari, mohammadreza mashayekhi*, ali hasanpour, behzad shirmohammadly
    Introduction

    Horses (Equus ferus caballus) have always been alongside humans and played an important role in the formation of human civilization. Horses are vertebrates that belong to the Mammalia class, the Equidae family, and the Equus genus. There are free and wild horses in Africa, Asia, Australia, Europe, North and South America, and some oceanic islands. Because of the long-standing relationship with human civilization, horses are considered as companions, a symbol of power and predilection, human assistant, and rival of other animals. The origins of domesticated horses have always been interesting to humans, and studying them is very important. Archaeological evidence and analysis of the horse's body color indicate that the first horses were found in the Eurasian steppes between 5th and 4th millennia BC. Among the genetic studies, simple repeat sequencing can be implied. Random repetitive sequences are scattered throughout the genome and show high polymorphisms that are harbored consecutively and repeat almost every 3-5 Kbp of genome. These sequences comprise a total of 20% of the mammalian genome sequence.

    Material and methods

    Blood samples were obtained from Arabian horses and their DNAs extracted using salting out method. Extracted DNAs was run in an agarose gel and concentration and quality of DNAs were measured by Nano-drop. Four microsatellite markers were used that all have been recommended by International Society for Animal Genetics (ISAG) for testing the parentship. These markers included ASB17, LEX3, HMS1 and CA425. These loci were amplified by multiplex polymerase chain reaction (PCR) with fluorescent dye-labeled primers. PCR was performed using total volume of 25 ml for each sample and PCR products were separated and analyzed with capillary electrophoresis and the products were evaluated using GenMapper software.

    Results and discussion

    According to the results obtained, the smallest allele was found is 88 bp at the position of ASB17 locus, as expected. Moreover, the largest allele observed in this population was 110 bp. The most frequent allele observed in the population was also 110 bp, with an allele frequency of 0.46%. For LEX3, the smallest allele observed is 144 bp, which was expected. The largest allele observed in this population was 166 bp, which was more than expected range. The most frequent allele observed in the population was 160 bp, with an allele frequency of 0.32%. However, the smallest allele observed in the population at position HMS1 was 172 bp, which was expected to be within the normal allele frequency range. The largest allele observed in the population was 182 bp, which was expected to be in the allele range. The most abundant allele observed in the population was the 174 bp allele, with a frequency of 0.41%, which has a high prevalence in other races. For CA425, the smallest size of the allele observed for this site was in the population of 242 bp, which was smaller than the expected allele size and had a significant frequency of 0.11%. The largest allele size observed in this site was 248 bp, which was expected to be above the expected allele range. The largest allele observed in the population was 182 bp, which was expected to be in the allele range. The most abundant allele observed in the population was the 174 bp allele, with a frequency of 0.41%, which has a high prevalence in other races. For CA425, the smallest size of the allele observed for this site was in the population of 242 bp, which was smaller than the expected allele size and has a significant frequency of 0.11%. The largest allele size observed in this site was 248 bp, which was expected to be higher than the expected allele range.

    Conclusion

    According to the results obtained from the observed alleles in the studied population of Arabian horses, there is a relatively high genetic variation among this population. It can also be said that for some alleles, there is a high prevalence in the Arabian horse population, while they were not seen in other breeds of horses. In general, several alleles in the Arabian horse population of Iran have been observed with different frequencies that were not present in rest of the races, which implies to the differentiation of this race from horses of other races.

    Keywords: Arab horse, genetic diversity, multiplex PCR, STR}
  • نعمت هدایت ایوریق*، رضا خلخالی ایوریق، رضا سیدشریفی، مصطفی عمری

    علیرغم وجود تنوع بالا در ژنوم میتوکندریایی و خط مادری، تنوع کمی در کروموزوم Y و خط پدری در اغلب پستانداران، از جمله اسب ها وجود دارد. تاکنون مطالعات کمی در زمینه شناسایی تنوع ژنتیکی در کروموزوم Y اسب ها در جهان صورت گرفته است. در مطالعه کنونی، از تعداد 53 اسب از شش جمعیت نژادی مختلف در ایران شامل شامل اسب های موجود در باشگاه های سوار کاری شهرستان اردبیل (24 نمونه)، اسب های بومی شمال غرب (باشگاه ها) (17 نمونه)، اسب های کردی (15 نمونه)، اسب های عرب (10 نمونه)، اسب های دره شوری (10 نمونه) و اسب های قره باغ (5 نمونه) نمونه گیری شده و برای شناسایی تنوع در کروموزوم Y قطعه 264 جفت بازی از طریق روش توالی یابی سانگر مورد بررسی قرار گرفتند. نتایج بدست آمده نشان داد که شش جایگاه متغیر در بین توالی ها وجود دارد که منجر به ایجاد نه هاپلوتایپ مختلف می شوند. از بین هاپلوتایپ های شناسایی شده، هاپلوتایپ دو (H-2) با در برگرفتن 15 نمونه، بزرگترین هاپلوتایپ محسوب شد. میانگین تنوع نوکلئوتیدی و تنوع هاپلوتایپی به ترتیب برابر با 0067/0 و 81/0 برآورد شد. هاپلوتایپ های یک (H-1) و دو (H-2) با در برگرفتن پنج نژاد از شش نژاد مورد مطالعه، متنوع ترین هاپلوتایپ ها بودند. اسب های عرب و دره شوری با فاصله ژنتیکی 00327/0 نزدیکترین نژادها و اسب های نمونه گیری شده از باشگاه های سوارکاری اردبیل و قره باغ با فاصله ژنتیکی 00822/0 دورترین نژادها نسبت به هم هستند. همچنین مشخص شد که برخلاف نژاد عرب، نژاد قره باغ دارای کمترین قرابت ژنتیکی پدری با اسب های ایرانی می باشد.

    کلید واژگان: اسب های ایرانی, تنوع ژنتیکی, خط پدری, کروموزوم Y, هاپلوتایپ}
    Nemat hedayat evrigh*, reza khalkhali evrigh, reza seyed sharifi, Mostaf Omri
    Introduction

     Among domesticated animals, the horse can be considered as one of the most influential animals in the process of human life modernization. Based on archaeological evidence, the presence of horses in Iran goes back to 3000 BC. Today, over 300 horses are recognized worldwide and a great number that is indigenous to Iran. The statistics provided by FAOSTAT indicate that there are about 140,000 horses. Due to climate diversity in Iran, there are various horse breeds in different parts of the country, such as Turkmen, Kordi, Drehshuri, Arab, Sistani, Northwest native and Caspian horses. Study of variations in Y chromosome and mtDNA make it possible to the characterization of genetic diversity in the maternal and paternal lines, respectively. Despite the high diversity in the genome of mitochondria in horses, but variation in Y chromosome is in low level. Low variation in Y chromosome of horses can be due to small male effective population size and loss of variations due to bottleneck during domestication. Several studies on Chinese indigenous and European modern horses revealed that native horses have more Y chromosomal variation in compared with modern breeds. So, the aim of present study was an assessment of genetic diversity in paternal line of Iranian horses using Y chromosome. Identified the genetic structure is important for appropriate breeding programs.

    Material and Methods

     Blood samples were collected from Jugular vein using 4 ml tubes containing EDTA (1 mg/ml) of 81 horse belonging to six different populations including Ardebil’s stables horses (24 samples), Northwest horses (17 samples), Kordi horses (15 samples), Arab horses (10 samples), Darehshuri horses (10 samples) and Qarebagh horses (5 samples). Total genomic DNA was extracted from whole blood. A total of the 264-bp fragment (locus: Y-50869) of Y chromosome was amplified using a pair of 20-nucleotide primer (Genbank accession number: JX646950). Polymerase Chain Reaction (PCR) was carried out and then, products of PCR sequenced using Sanger sequencing method. Alignment of sequences was performed by MEGA 6.0 software. Also, MEGA 6.0 used for segregating sites identification and also phylogeny tree construction based on identified haplotypes. DnaSP5 was used to the estimation of haplotype diversity (Hd), nucleotide diversity (π), genetic distance (Dxy) and an average number of differences (k). Finally, the median-joining network was generated using the Network 5 program to present the possible relationships among haplotypes.

    Results and Discussion

     Alignment of sequences led to the identification of six segregating sites and consequently nine haplotypes based on Y chromosome sequences. Three haplotypes (H_1, H_2, and H_6) are widely distributed among under study samples, so that, 65 of 81 (more than 80 %) individuals have placed in three haplotypes. Among haplotypes with more than one individual, there is no special haplotype for any of breeds.  Haplotype diversity values ranged from 0.6 for Arab breed to 0.86 for Kordi breed. The nucleotide diversity values ranged from 0.00288 for Arab breed to 0.01442 for the Qarebaghg breed. Average values for nucleotide diversity and haplotype diversity were 0.0067 and 0.81 respectively. Comparison of present results with the previous study on mtDNA diversity of Iranian horses revealed that maternal line of Iranian horses is more divers from paternal line.  Among Iranian breeds, Dareshuri breed has the lowest nucleotide diversity 0.00481 and haplotype diversity 0.00481 and 0.8 respectively. Assessment of genetic distance among breeds revealed that Ardebil and Qarebagh horses have the highest distance (0.00822), while Arab and Dareshuri horses showed the lowest genetic distance (0.00327). Obtained results indicated that, unlike Arab breed, Qarebagh horses had low influence in Iranian horses. Phylogeny tree based on haplotypes of Iranian horses showed that divided into two branches. Generally, 73 individual (90.12% of all horses) and 8 individuals (9.88% of all samples belongs to each of the two branches.

    Conclusion

     The number of haplotypes which was found for Iranian native horses was placed among three haplogroups, which indicate moderate genetic variety and numerous maternal lines in native horses of Iran. It seems that the presence of the accurate pedigree information along genetic studies can help us to better categorize Iranian horses. In fact, to designing effective breeding strategies, we need to identify the precise genetic structure of Iranian horses. What we learned from this study was that Iranian horses in compared with European pure breeds are more diverse. Obtained results from this study showed that Stalions of Arab breed had high impact in Iranian horses.

    Keywords: Genetic diversity, Haplotype, Iranian horses, Paternal line, Y chromosome}
  • رضا سید شریفی *، سجاد بادبرین، نعمت هدایت، سیما ساور، جمال سیف، حسن خمیس

    نژادهای بومی به دلیل دارای بودن ویژگی های منحصر به فرد، جزء ذخایر ژنتیکی کشور محسوب شده و شناخت بیشتر ساختار ژنتیکی آنها به حفظ و حراست آنها و تدوین برنامه های اصلاح نژادی کمک خواهد کرد. در این پژوهش تنوع ژنتیکی 136 راس اسب از سه نژاد ایرانی (کاسپین، عرب و تالشی) با استفاده از 12 نشانگر ریزماهواره توصیه شده توسط انجمن بین المللی ژنتیک حیوانی، مورد بررسی قرار گرفت. تمام نشانگرهای استفاده شده چند شکل بودند و نشانگرهای ASB17 با 12 آلل و HMS6 با 6 آلل به ترتیب بیشترین و کمترین تعداد آلل را تولید کردند. بیشترین و کمترین میزان هتروزیگوسیتی مورد انتظار به ترتیب در نشانگرهای VHL20 (0/78) و ASB23 (0/62) محاسبه شد. میانگین شاخص شانون برای همه جایگاه ها برابر با 1/72 به دست آمد. در نمودار فیلوژنی رسم شده با استفاده از ضریب تشابه جاکارد و روش UPGMA (14)، اسب های کاسپین و تالشی در یک شاخه و اسب های عرب در شاخه جداگانه قرار گرفت. آنالیز واریانس مولکولی نشان داد که تنوع ژنتیکی زیادی در درون نژادهای بررسی شده وجود دارد و با توجه به جمعیت کم اسب های تالشی و کاسپین، پیشنهاد می شود برنامه های اصلاح نژادی جهت بهبود کارایی و جلوگیری از انقراض آنها تا رسیدن به سطح امن طراحی و اجرا گردد

    کلید واژگان: اسب های تالشی, تنوع ژنتیکی, روابط فیلوژنی, کاسپین و عرب, نشانگرهای ریزماهواره}
    Reza Seyedsharifi*
    Introduction

    Due to having historical value and climatic diverse, Iran has unique horse breeds. Unfortunately, due to the lack of attention and control of the import of foreign breeds into this rich
    genetic source, huge damage has been created. Therefore, many horse breeds in the country got crossbred and their racial purity reduced. Knowing the genetic structure of native breeds will play an important role in their safeguarding and ensuring of their survival. Indigenous breeds, due to their unique characteristics, are considered as part of the genetic resources of the country, and their genetic structure will help them to protect and develop eugenic programs.

    Materials and Methods

     This study was conducted on 136 horses including Taleshi (25 samples), Caspian (49 samples) and Arabic (62 samples) breeds from their breeding areas. Taleshi horse samples was captured from local stock in the Guilan province, Caspian samples was captured from horse riding clubs around Tehran and Guilan provinces, and Arabian samples was captured from horse riding clubs around the provinces of Tehran, Khuzestan and Alborz. They were unrelated and selected randomly. The race recognition of horses was based on books published by the Federation of Equestrian and their phenotypic characteristics. After determining of the concentration and uniformity of the concentration of extracted DNA, all individuals under study were conducted for 12 microsatellite markers recommended by the Animal Genetic Association (ISAG) to determine the genotype in order to estimate the parameters such as heterozygosity, inbreeding, Hardy and Weinberg equilibrium, and so on and find an appropriate strategy to maintain these valuable breeds. The number of observed alleles (na), and effective (ne), observed heterozygosity (Ho) and the Expectation case (He), Shannon index (I), inbreeding coefficient (ISF), genetic distance, genetic similarity, Hardy-Weinberg equilibrium, and phylogeny tree between races were calculated using POPGENE 1.31 software.

    Results and Discussion

     All of the used markers were multi-shaped and the ASB17 markers with 12 alleles and HMS6 produced the highest and lowest number of alleles with 6 alleles, respectively.
    The highest and lowest expected heterozygosity were calculated in VHL20 (0.78) and ASB23 (0.62) markers, and the average Shannon index for all sites was 1.72. Hardy Weinberg balance
    analysis by Chi square test showed that except ASB2 and HMS3 markers in Taleshi breed, ASB17 and HTG4 markers in the Caspian breed and ASB17 markers in the Arabic breed, all markers had a significant deviation from Hardy and Weinberg equilibrium (P <0.05). The highest observed heterozygosity was related to AHT5 marker (0.81) and the lowest observed heterozygote was related to ASB17 and HTG4 markers (0.68). The Shannon index, like the observed heterozygosity, shows the amount of genetic diversity, and because the maximum value is equal to Ln (n), it is useful to express the genetic diversity of multi-formed sites. The highest and lowest values of Shannon index were 1.96 and 1.46, respectively, for VHL20 and HTG4 markers. Given the fact that the VHL20 marker showed the highest and the HTG4 marker showed the least effective allele, so the calculated values for the Shannon index are justified. Phylogeny diagram showed that Caspian and Taleshi horses were placed in one branch and Arab horses in separate branch.

    Conclusion

    Breeds with fewer populations are more at risk for genetic changes and extinction. Reducing of the genetic diversity of indigenous populations will result in the loss of many useful
    genes, especially those that are compatible with different environments and resistant to regional diseases. Undoubtedly, it is very important to pay attention to the genetic diversity of small-sized
    population of breeds such as Taleshi and Caspian. The results of this study showed that due to the low number of Caspian and Taleshi horses, genetic diversity is still at a high level, so it would be hoped that by adopting the principled measures, we would prevent their extinction in the long duration.

    Keywords: Genetic diversity, Microsatellite markers, phylogeny tree, Taleshi, Caspian, Arabianhorse}
نکته
  • نتایج بر اساس تاریخ انتشار مرتب شده‌اند.
  • کلیدواژه مورد نظر شما تنها در فیلد کلیدواژگان مقالات جستجو شده‌است. به منظور حذف نتایج غیر مرتبط، جستجو تنها در مقالات مجلاتی انجام شده که با مجله ماخذ هم موضوع هستند.
  • در صورتی که می‌خواهید جستجو را در همه موضوعات و با شرایط دیگر تکرار کنید به صفحه جستجوی پیشرفته مجلات مراجعه کنید.
درخواست پشتیبانی - گزارش اشکال